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PRÁCTICA 7

Género Candida

1.- INTRODUCCIÓN

Información relevante sobre Candidiasis.

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 2 autores ya sea de libros,


revistas electrónicas etc. (no más de 5 años) indicando con superíndices los autores y
la bibliografía irá al final con la opción insertar nota al pie. (2 puntos)
Las especies del género Candida sp. son hongos en forma de levaduras ovales que conviven
como microorganismos comensales, en el individuo inmunocompetente, ya que hacen parte
de la flora normal de piel y mucosa en la mayoría de sistemas del cuerpo humano
(gastrointestinal, respiratorio y genitourinario); este microorganismo es el más frecuentemente
implicado en las infecciones por hongos en pacientes críticos, pero para que se llegue a
generar la infección del torrente sanguíneo se requiere un aumento considerable en el
número de levaduras. Las especies más frecuentes de Candida sp son: C. albicans, C.
tropicalis, C. glabrata, C. dubliniensis, C. parapsilosis, C. orthopsilosis, C. metapsilosis, C.
krusei, C. famata, C. guilliermondii y C. lusitania. Una de las principales diferencias entre la C.
albicans y C. no albicans es que la primera es dismórfica.1

Las infecciones producidas por Candida spp van a variar desde una candidiasis superficial
como puede ser la candidiasis oral y candidiasis vaginal o vaginitis en la mujer y candidiasis
en el varón, hasta candidiasis sistémicas. En muchos de los casos son mortales y se las
conoce como candidemias y suelen afectar a personas que están inmunodeprimidas, como
pueden ser pacientes con cáncer, trasplantados o con SIDA, también pacientes que han
sufrido algún tipo de cirugía no traumática.2
La candidiasis vulvo-vaginal es una de las infecciones más frecuentes, después de la
vaginosis bacteriana. Entre el 10-25% de las mujeres en edad reproductiva tienen
colonizado el tracto vaginal por especies de Candida spp (esporas), incluso se encuentra
presente en el 6-7% de las mujeres pre-púberes . El 70-75% de las mujeres tendrá, al
menos, un episodio de candidiasis en su vida, de los cuales el 8-10% se transformarán en
episodios recurrentes. A su vez la mayor incidencia de candidiasis vulvo-vaginal se ha
reportado en pacientes jóvenes, disminuyendo considerablemente su frecuencia cuando se
acerca la menopausia. Cabe recalcar que, en las niñas, la candidiasis vulvovaginal
generalmente es sobre diagnosticada y confundida con la leucorrea fisiológica de la infancia.
El 80-90% de las infecciones son causadas por Candida albicans, mientras que el porcentaje
restante se produce por Candida glabrata y Candida parapsilosis.3

1
Lazo, V., Hernández, G., & Méndez, R. (2018). Candidiasis sistémica en pacientes críticos, factores predictores de
riesgo. Horizonte Médico (Lima), 18(1), 75-85.
2
Sánchez-Martín, M. A., Pellón-Olmedo, M., San-Miguel-Hernández, Á., Pachón-Julián, J., Rodríguez-Barbero, E.,
Pastor-Martín, M. R., ... & Albert-Hernández, M. (2019). Importancia clínica de la candidiasis con especial relevancia en
la candidiasis vulvovaginal recurrente. Gaceta Médica de Bilbao, 116(2), 74-82.
3
López, F., & Argote, V. Candidiasis.
2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN.

Metodología para la identificación de hongos

1.- El estudiante deberá tomar la muestra para la obtención del género


Candida (Exudado Faringeo,exudado vaginal,urocultivo)

2.-El estudiante deberá tomar imagen del sitio de la muestra.

3.- El estudiante deberá realizar una observación microscópica directa o en fresco de


la muestra obtenida.

4.- El estudiante deberá proceder a sembrar la muestra obtenida en los medios de


cultivo, así mismo deberá incubarlos a la temperatura y tiempo adecuados.

5. El estudiante deberá realizar la observación macroscópica de los cultivos y como


evidencia deberá tener una imagen, así mismo describirá el tipo de colonias
(colonias, consistencia y tipo).

6.-El estudiante deberá realizar la observación microscópica de los cultivos.

7.- El estudiante realizará pruebas selectivas (Chromoagar) en caso de ser necesario.

8.- El estudiante mediante investigación bibliográfica determinará cuáles son los


agentes micóticos causales más frecuentes de las micosis del sitio donde se tomó la
muestra en base a Información estadística, de 2 autores ya sea de libros, revistas
electrónicas etc. (no más de 5 años) indicando con superíndices los autores y la
bibliografía se colocará con la opción insertar nota al pie. (2 puntos).

9.- El estudiante realizará la Identificación taxonómica (Género y especie) del agente


micológico en base a lo anterior y apoyándose en el banco de imágenes
proporcionado por el profesor.
3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONC.


Hidróxido de potasio 20 %
NaCl 0.9 %
Azul de Lactofeno.
Agar Dextrosa Sabouraud
Agar Dextrosa y Papa
Chromoagar
Agua destilada

3.2 Equipos de Laboratorio


Estufa de cultivo
Autoclave
Balanza granataria
Microscopio

3.3 Materiales de laboratorios

DESCRIPCIÓN
Caja de Petri estéril
Portaobjetos estéril
Hisopos estériles
Alcohol etílico al 70 %
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes desechables
Cubrebocas
Maskintape
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de exudado faríngeo

4.1 Pedirle al paciente que se presente en ayuno, sin haber tomado agua, se le toma el
exudado faríngeo con un hisopo de algodón estéril. Una vez tomada la muestra se
inocula en el medio de cultivo Agar dextrosa y Papa, incubándose de 24-48 horas a 37
grados centígrados.
4.2 Al término de este tiempo se observa la morfología colonial.
4.3 Si se observa levaduras verificarlo al microscopio y posteriormente realizar la prueba de
tubo germinativo para determinar presencia de Candida álbicans/dublinensis de
Candida no albicans.
4.4 Para la prueba de tubo germinativo se depositan 0.5 ml. de suero humano reciente y se
inocula una colonia de Cándida incubándose de 2 a 3 horas a 37 C. Al término de este
tiempo se coloca con una pipeta Pasteur una gota en un portaobjetos y se cubre con un
cubreobjetos y se observa al microscopio con 40 x.
4.5 Por otro lado, para determinar la especie de Cándida realizar un cultivo en Chromoagar
incubando la muestra de 24-48 horas.

5.-MUESTREO Y MUESTRA

5.1. Se selecciona una zona de la faringe del paciente en donde se observe alguna lesión
blanquesina.
6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

El profesor supervisa que la toma de la muestra sea la adecuada.


6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con las diferentes soluciones.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones para garantizar que están observando las
estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD

7.1. Verificar que los reactivos a utilizar en la tinción no presenten precipitado o


contaminación.
7.2 Contar con un control negativo y positivo para los medios de cultivo utilizados.
7.3 Para control negativo se coloca una placa de agar sin inocular y se incuba junto con los
demás cultivos. (No debe haber desarrollo colonial)
7.4 Para control positivo se deja una placa de Sabouraud abierta durante todo el proceso
al termino de este se cierra y se incuba junto con las demás placas.

8.- REPORTE DE RESULTADO

El reporte debe de tener las siguientes características

1.- Foto del paciente del lugar donde se tomó la muestra (1/2 punto)
2.- Descripción del lugar donde se tomó la muestra (estado de la faringe) (1 punto) 3.-
Cuestionario aplicado al paciente (1 punto)
Fecha:
Nombre del paciente:
Género:
Edad:
Ocupación:
Muestra de:
Lugar de la muestra:
Presenta picazón?
Tiempo de presentar este problema:
Ha llevado tratamiento o si está llevando tratamiento? El
tratamiento le fue recetado por algún medico?
Se está aplicando algún remedio?
Tiene algún familiar con un padecimiento igual o similar? Es
Diabético/a ?
¿Está llevando algún tratamiento con quimio o radioterapia?
¿Está embarazada?
¿Es hipertenso/a?
4.- Imagen (Foto) macroscópica de los cultivos (1 punto) 5.-Descripción macroscópica y
microscópica

DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA (1 punto)


Pseudohifas Si

Blastoconidios Si

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA (1 punto)

Color de las colonias


Forma de las colonias
8.- Diagnóstico (Identificación taxonómica del hongos)

PRUEBAS ESPECÍFICAS

Tubo germinativo (Foto)


(Positivo o negativo)

(1 punto)

Chromoagar (imagen) (1 punto)

Género y especie

(1 punto)
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

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