MALARIA

MALARIA
Es una enfermedad con manifestaciones agudas y crónicas
causada por protozoarios del género Plasmodium spp; estos
parásitos son transmitidos al humano a través de la picadura de
la hembra del vector Anopheles.
 AGENTE ETIOLÓGICO
Plasmodium género de protozoos parásitos perteneciente al filo
Apicomplexa y la familia Plasmodiidae. Son parásitos intracelulares
capaces de multiplicarse en el hombre, las especies que causan
malaria humana son:

• Plasmodium falciparum
• Plasmodium vivax
• Plasmodium malariae
• Plasmodium ovale y
• Plasmodium knowlesi

P. falciparum es el que frecuentemente causa complicaciones y

mortalidad.
 AGENTE ETIOLÓGICO
En Colombia las especies más frecuentes en zonas endémicas son
P. vivax y P. falciparum; la transmisión de P. malariae ocurre en
focos dispersos a lo largo de la costa Pacífica, sobre P. ovale se
considera que no hay transmisión en el país y sobre P. knowlesi se
ha reportado trasmisión en el continente asiático. También pueden
ocurrir casos de infecciones mixtas, por 2 especies, usualmente
P. vivax y P. falciparum.
MODO DE TRANSMISIÓN
 DIAGNÓSTICO DE MALARIA
El diagnóstico de la malaria no complicada es de especial
importancia para evitar los casos de malaria complicada, por lo
tanto se debe dar de forma oportuna y adecuada. Este se realiza
teniendo presente tres tipos de criterios, los cuales siempre se
deben analizar en asociación:
• Clínicos
• Epidemiológicos
• Laboratorio
CRITERIOS CLÍNICOS DE MALARIA NO COMPLICADA
Presenta manifestaciones clínicas que se conocen como la triada
clásica que consiste en escalofrío, fiebre y sudoración. Los picos
febriles pueden variar dependiendo de la especie parasitaria, P.
vivax y P. falciparum usualmente el pico febril se presenta cada
tres días, la infección se denomina malaria terciaria benigna en
el caso de P. vivax que generalmente no presenta complicaciones
CRITERIOS CLÍNICOS DE MALARIA NO COMPLICADA

Por P. falciparum se denomina malaria terciaria maligna la

infección puede llegar a tener un cuadro clínico con
complicaciones. En el caso de P. malariae la infección se
denomina cuartana benigna por que los picos febriles ocurre
cada cuatro días. La malaria no complicada puede estar
acompañada de otros síntomas
CRITERIOS CLÍNICOS DE MALARIA COMPLICADA
CRITERIOS CLÍNICOS DE MALARIA COMPLICADA
 CRITERIOS EPIDEMIOLÓGICOS
Antecedentes de:
• exposición, en los últimos 15 días, en áreas con transmisión activa
de la enfermedad (ocupación, turismo, entre otros).
• hospitalización y transfusión sanguínea.
• medicación antimalárica en las últimas cuatro semanas.
• Nexo epidemiológico (tiempo y lugar) con personas que hayan
sufrido malaria.
 CRITERIO POR EL LABORATORIO
Es posible realizar el diagnóstico por laboratorio a través de
diferentes métodos tales como: el uso de la microscopía, uso de
pruebas rápidas y diagnóstico molecular que incluye la reacción
en cadena de la polimerasa y amplificación isotérmica de Ácido
Desoxirribonucleico- ADN mediada por bucles (LAMP).
 CRITERIO POR EL LABORATORIO
En Colombia la prueba de referencia para el diagnóstico rutinario sigue
siendo la gota gruesa, es el examen de elección para confirmar o
descartar la malaria, ya que es una muestra concentrada y
deshemoglobinizada que permite revisar mayor cantidad de sangre en
una pequeña área con muestra, lo que la hace más sensible que el
extendido. Pueden existir pacientes que tengan una baja parasitemia y
cuente con una gota gruesa positiva y un extendido negativo. El extendido
es utilizado principalmente para aclarar dudas de especie o realizar
recuentos cuando se presentan altas parasitemias.
 BIOSEGURIDAD
La toma de muestra debe hacerse siguiendo las normas
generales de asepsia, antisepsia y bioseguridad. En caso de
remisión de láminas o muestras estas deberán ser enviadas con
todas las medidas de bioseguridad, utilizando el sistema de triple
embalaje.
TOMA DE MUESTRA GOTA GRUESA
Idealmente debe hacerse por punción capilar (dedo índice o medio de la
mano, en el grueso artejo, o lóbulo de la oreja) debido a que se obtienen
mejores preparaciones, también es posible hacer el montaje con sangre
tomada por punción venosa utilizando anticoagulante EDTA.
Para el diagnóstico directo de malaria se emplean, dos laminas para gota
gruesa y una para el extendido de sangre periférica.
1. Identifique las láminas.
2. Desinfecte la zona de punción con alcohol antiséptico.
TOMA DE MUESTRA GOTA GRUESA
3. La punción se hace de manera firme y segura, hacer presión y limpiar la
primera gota de sangre y usar la segunda gota presionando hasta
obtener una gota grande y globosa. Colocar la lámina por encima de la
gota de sangre evitando tocar la incisión hecha con la lanceta
4. La gota debe extenderse con movimientos de "N“ para lograr formar un
cuadrado de aproximadamente 1 cm x 1 cm sobre el portaobjeto, con un
grosor y homogeneidad adecuados y así obtener un mayor número de
campos microscópicos ideales.
5. Las gotas gruesas se dejan secar a temperatura ambiente por 20 minutos.
 TOMA DE MUESTRA EXTENDIDO
A partir de la punción capilar o de sangre anticoagulada se toma una
gota pequeña para elaborar el extendido, este se debe hacer en un
portaobjetos diferente al de la gota gruesa, esto se debe a que en el
caso específico de Colombia es adecuado contar con dos gotas gruesas
en una misma lámina para dar mayor probabilidad de detectar las
bajas parasitemias. Por otra parte, el extendido difiere en el proceso
de coloración al requerir metanol para su fijación y no es indicado que
el alcohol toque la gota gruesa
 TOMA DE MUESTRA EXTENDIDO
1. La gota de sangre que se utiliza para realizar el extendido es 1 µL
aproximadamente
2. Se coloca hacia un lado de la lámina y con la ayuda de otro portaobjeto
de borde biselado se procede a extender la muestra con una inclinación
aproximada de 45° y por capilaridad se deja extender la gota de sangre
en el borde de la lámina extensora y antes de que la sangre llegue a los
bordes de la lámina se desliza la extensora hacia adelante.
 PRECOLORACIÓN Y COLORACIÓN: MÉTODO DE
ROMANOWSKY MODIFICADO
Sumergir en azul de metileno fosfatado por 2 segundos; escurrir sobre papel
absorbente en posición vertical, para eliminar el exceso; enjuagar con agua
amortiguadora pH 7,2; escurrir y proceder a colorear. Para la coloración, por
cada lámina a colorear, en un tubo Falcon dispensar 3 mL de agua
amortiguadora, una gota de solución A y una gota de solución B, mezclar
suavemente por inversión. En una lámina cóncava para coloración colocar las
láminas con la muestra hacia abajo. Adicionar la solución colorante evitando
la formación de burbujas y dejar actuar por 17 minutos y colocar la lámina en
posición vertical para secado.
 COLORACIÓN PARA EXTENDIDOS DE SANGRE
PERIFÉRICA
Coloración de Wright:
• Se cubre la placa con solución de Wright dejando actuar por 3 minutos.
• Posteriormente, se adicionan unas gotas de agua destilada o solución
tamponada sobre el colorante.
• Con una pipeta se procede a soplar hasta que se genera un brillo metálico
verdoso en la superficie del colorante.
• Se deja actuar la coloración por 7 minutos y se lava la placa.
 EXAMEN MICROSCOPICO
Para la lectura de la gota gruesa se enfoca al microscopio con
objetivo de 100X, luego se busca un campo microscópico ideal
(que contenga de 10 a 20 leucocitos) y se continúa observando
los campos adyacentes de arriba abajo o de izquierda a derecha,
 EXAMEN MICROSCOPICO
En el diagnóstico microscópico es posible observar las
características morfológicas de cada especie y realizar el recuento
parasitario a través del microscopio se observan las formas
parasitarias con las características propias de cada especie. Los
estadios parasitarios que se pueden observar son los asexuados
(trofozoitos y esquizontes) y los sexuados (gametocitos).
FÓRMULA DEL RECUENTO PARASITARIO EN
GOTA GRUESA
El principio del recuento en términos generales establece una relación del
número de parásitos presentes en 200 leucocitos y el número de leucocitos
por mm3 del paciente; cuando se usa este método, generalmente se asume
que el recuento leucocitario promedio de los individuos es 8000
leucocitos/µL, así:
FÓRMULA DEL RECUENTO PARASITARIO EN
GOTA GRUESA
• Si al contar 200 leucocitos se observan 10 o más parásitos, aplicar la
fórmula en base a 200 leucocitos. Si al contar 200 leucocitos se observan 9
o menos parásitos, continuar el recuento hasta llegar a los 500 leucocitos
y aplicar la fórmula en base a los 500 leucocitos.
• Si se cuentan más de 500 parásitos sin llegar a contar los 200 leucocitos, el
recuento se dará por terminado cuando se finalice la lectura del último
campo y la parasitemia debe calcularse según la fórmula anterior
 INFORME DE RESULTADOS
Es necesario informar método de diagnóstico (Gota gruesa),
positividad/negatividad de la muestra, especie parasitaria infectante y
recuento parasitario en unidades parásitos/µL.
• Se interpreta como positiva: una lámina de gota gruesa en la que se
observen formas parasitarias compatibles con especies de Plasmodium
spp. Si se diagnostica una muestra positiva se debe confirmar especie o
especies parasitarias (infección mixta),
• Se interpreta como negativa: una lámina de gota gruesa en la que no se
observen formas parasitarias compatibles con Plasmodium spp, es
negativa para hemoparásitos cuando hay ausencia de parásitos después
de observar por lo menos 300 campos microscópicos con objetivo 100x.
 FUNDAMENTO DE PDR
Es un dispositivo que cuenta con un papel de nitrocelulosa que tiene
proteínas fijas llamadas anticuerpos que se unen a los antígenos del parásito
presentes en los glóbulos rojos de la muestra. Cuando se presenta la unión
del antígeno y el anticuerpo específico se evidencia por una reacción de color
violeta a expensas del conjugado (segundo anticuerpo marcado) que se
encuentra en el lugar donde son liberados los antígenos uniéndose a ellos.
Esta unión migra por la nitrocelulosa y es capturada por el anticuerpo
monoclonal ubicado en la banda de reacción.
ALGORITMO PARA LA ATENCIÓN DE PACIENTES
UTILIZANDO PDR
 DIAGNÓSTICO MOLECULAR
La extracción del ADN del parásito se realizará a partir de una
muestra de sangre impregnada en papel filtro o sangre
anticoagulada mediante kit comercial, siguiendo las
instrucciones del fabricante. Se usará una hoja de bisturí por
cada muestra y antes de comenzar el proceso con las muestras
de los pacientes se hará el control de extracción tomando un
círculo de papel filtro sin sangre y realizando el mismo
procedimiento.