FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ENFERMERÍA

PRÁCTICA Nro. 04

Laboratorio de: Fecha:

Microbiología y Parasitología
Temática:
Infecciones e infestaciones en el ser humano. Interacción Agente infeccioso-hospedador. Agente
Infeccioso : Factores de virulencia Hospedador : Mecanismos de respuesta inmunológica innato y
adaptativo
Sesión:4 Resultado de aprendizaje:
Explica el crecimiento microbiano
considerando los procesos de
desinfección, esterilización y antisepsia
que se utiliza para el control de
microorganismos.
Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía:
IV Ciclo de la Escuela Profesional de Enfermería 150 minutos

I. INTRODUCCIÓN
“Los leucocitos son células presentes en la sangre cuya función es la defensa del
organismo frente a las agresiones del medio externo. Unos intervienen directamente en
los mecanismos de fagocitosis (neutrófilos y monocitos) y otros en la respuesta
inmunológica (linfocitos, células plasmáticas y monocitos) En sangre periférica podemos
observar granulocitos, linfocitos y monocitos. A su vez, los granulocitos, según el tipo de
gránulos que posean en el citoplasma, serán eosinófilos, basó- filos o neutrófilos. Los
linfocitos y monocitos son células mononucleadas sin granulación. El recuento total y
porcentual de los leucocitos circulantes se conoce como fórmula leucocitaria. Indica la
proporción relativa de los distintos tipos celulares. Sin embargo, el valor absoluto tiene
mayor importancia clínica. Se obtiene multiplicando el porcentaje por el número total de
leucocitos. La interpretación del hemograma es básica en un gran número de patologías”
“Las bacterias poseen mecanismos de patogenicidad específicos que emergen al superar
las defensas de un hospedero. Un microorganismo patógeno posee la capacidad de
producir un daño, a cualquier nivel, en un organismo hospedero susceptible. La virulencia
es una medida cuantitativa de la patogenicidad y se mide por el número de
microorganismos necesarios para causar una enfermedad, es decir, es el grado de
patogenicidad. Debido a la eficiencia de esos mecanismos una bacteria puede ser poco
virulenta o muy virulenta; bacterias de importancia médica pueden causar una gran
mortalidad. Las bacterias a lo largo de la evolución han adquirido características que les
permiten invadir el ambiente del hospedero, expresar receptores superficiales
especializados para su adhesión, permanecer en estos sitios a través de procesos de
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colonización, evadir al sistema inmune y finalmente causar daño tisular con incorporarse
al hospedero por diversas vías, que en conjunto se denominan puertas de entrada”.

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS: Evaluación Inicial

¿Cuáles son los leucocitos sanguíneos?
¿Cuál es el significado clínico de los leucocitos sanguíneos?
¿Qué es un factor de virulencia bacteriano?

III. MATERIAL
1. Material de Laboratorio (por mesa de práctica).
 01 Mechero de alcohol.
 01 Asa bacteriológica
 01 Frasco de colorante Wright
 01 Frasco con agua tamponada pH 6,4
 03 goteros de plástico
 Caja de láminas portaobjeto.
 01 Frasco de peróxido de hidrógeno
 03 Tubos de ensayo con 0,5 mL de plasma citratado de conejo (1 tubo positivo para
lectura de coagulasa)
 Lancetas para extraer sangre
 Aceite de inmersión
 01 Cultivo de Staphylococcus aureus
 01 Cultivo de Streptococcus sp.
2. Material individual
 Guía de prácticas
 Guantes descartables, mascarilla descartable y gorro
 01 Marcador indeleble
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IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Actividad 1. Coloración de extendidos sanguíneos: (Método de Wright)
 Realizar un frotis sanguíneo fino en una lámina limpia y desengrasada
 Cubrir el frotis sanguíneo con un volumen de colorante y dejar por un minuto
 Añadir el doble de volumen de agua tamponada pH. 6.4, mezclar bien, y dejar
por 5 a 10 minutos.
 Lavar con agua corriente y dejar secar a temperatura ambiente.

Actividad 2. Reconocimiento de leucocitos sanguíneos

 Observar las láminas previamente coloreadas con objetivo de inmersión
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1 PUNTO

Observación:

NEUTRÓFILO ABASTONADO

Muestra:

Coloración:

Aumento:

1 PUNTO
Observación:

NEUTRÓFILO SEGMENTADO

Muestra:

Coloración:

Aumento:

1 PUNTO Observación:
 Muestra:

Coloración: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA

SALUD

1 PUNTO Aumento:

Observación:

MONOCITO

Muestra:

Coloración:

Aumento:

1 PUNTO Observación:

LINFOCITO

Muestra:
Actividad 2. Factores de virulencia
 Prueba de la catalasa
Coloración:
- Colocar una gota de peróxido de hidrógeno en una lámina porta
objeto
-
Transferir una asada de un cultivo bacteriano sobre la gota de
Aumento:
peróxido de hidrógeno
-
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1 PUNTO

BACTERIA RESULTADO
Staphylococcus aureus
Streptococcus sp.

 Prueba de la coagulasa
- En un tubo de ensayo colocar 0.5 mL de plasma citratado de conejo
- Transferir una asada de un cultivo bacteriano y mezclar suavemente con
el plasma
- Incubar a 37°C por 4 horas, observar cada media hora hasta las 4 horas
- Observar si hay formación de coágulo
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BACTERIA RESULTADO
Staphylococcus aureus
1 Streptococcus sp.

V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
PUNTO
Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos vivos
peligrosos.
Portar la bata y equipo de protección (guantes)
Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.
No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.

VI. CONCLUSIONES (1 PUNTO)

VII. EVALUACIÓN
1. ESCRIBA LA FÓRMULA LEUCOCITARIA (1 PUNTO)

2. GENERALMENTE: ¿QUÉ LEUCOCITO SANGUÍNEO ESTARÍA AUMENTADO EN EL CASO

DE UNA?:
a. INFECCIÓN BACTERIANA: (1 PUNTO)
b. INFECCIÓN VIRAL: (1 PUNTO)
c. PARASITOSIS: (1 PUNTO)
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3. ¿POR QUÉ LA CATALASA BACTERIANA ES UN FACTOR DE VIRULENCIA? (2 PUNTOS)

4. ¿POR QUÉ LA COAGULASA BACTERIANA ES UN FACTOR DE VIRULENCIA? (2 PUNTOS)

VIII. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES

Trabajar en grupos de mesa siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Preguntar cualquier duda al docente de mesa
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
No correr, saltar, gritar
No cambiarse de mesa salvo autorización del docente
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IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (4 PUNTOS)

Código de LIBROS/REVISTAS/ARTÍCULOS/TESIS/PÁGINAS WEB.TEXTO
biblioteca
616.0797 / A11C Abbas A, Lightman A, Pober J. Inmunología Celular y Molecular. 8va ed.
Madrid: McGraw-Hill Interamericana; 2015.
579.1788 / M14A Madigan M, Martinko J, Parker J. Biología de los Microorganismos de Brock.
12ava ed. Madrid: Pearson; 2009.
616.01 / K74A Koneman E et al. Diagnóstico Microbiológico Texto y Atlas. 6ta ed. Argentina:
Médica Panamericana S.A; 2008.
616.079 / F16A Fainboim L, Geffner J. Introducción a la Inmunología Humana. 6ta ed.
Argentina Médica Panamericana S.A.; 2005.
Diaz C, Bastida P. Interpretación del hemograma pediátrico. Sevicio Hematol y
Oncol Hosp Infant Vall dHebron. 2004;2(5):291–6.
Cárdenas-Perea M. E., et al. Factores de virulencia bacteriana: la “inteligencia”
de las bacterias. Elementos 94 (2014) 35-43