Tecnológico Nacional de México/Instituto

Tecnológico de Durango.

Carrera: Ingeniería bioquímica

Materia: Biología

Tema: Práctica No. 2 Reconocimiento de

biomoléculas orgánicas

Alumnas: Avitia Betancourt Carla Daliz 21040638

Esparza Galvan Ana Luisa 21040649
Práctica No. 2 Reconocimiento de biomoléculas orgánicas

Competencia: Reconocer las moléculas esenciales para la vida,

determinar e identificarlas en muestras biológicas.

Introducción
Los organismos se distinguen de la materia inanimada por estar compuestos de
moléculas orgánicas, que incluyen carbohidratos, grasas, proteínas y ácidos
nucleicos. Estas moléculas son orgánicas porque están compuestas en gran
medida por átomos de carbono. Los átomos de carbono pueden formar una gran
diversidad de moléculas porque pueden enlazarse hasta cuatro elementos para
formar el esqueleto de las moléculas orgánicas. Sin embargo, las moléculas
orgánicas son algo más que estructuras de átomos de carbono.

CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las células y son
además una forma importante de almacenar energía. Los carbohidratos se
clasifican como monosacáridos (una sola molécula de azúcar), disacáridos (dos
monosacáridos), o polisacáridos (dos o más disacáridos), dependiendo del tamaño
y la complejidad de la molécula.

Los carbohidratos incluyen azúcares, almidones, quitina y celulosa. Los azúcares

sirven temporalmente para almacenar energía y construir otras moléculas.

Reactivo de Benedict:

La prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de azúcares

reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre y éste se reduce
en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se
oxida. La reacción antes mencionada se conoce como una reacción
oxidación-reducción (“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede
 simultáneamente con la reacción de reducción del cobre. Cuando se añade
el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor el color de la
mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia
de azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de
menos azúcares reductores. Los azúcares que no reducen como la sacarosa
no producen cambios en color y la solución se mantiene azul.

• Prueba de yodo:
El fundamento de esta técnica se basa en la especificidad del almidón
(polímero de glucosa) cuando está presente en solución, la cual da un color
azul en presencia del yodo. El yodo presenta: yoduro de potasio y yodo
bisublimado más agua (solución de Lugol). El yodo de la solución tiene
afinidad por los enlaces  1--> 4 y  1--> 6 de la molécula de almidón, esta
interacción del yodo por dichos enlaces produce el cambio de coloración.

LÍPIDOS
Los lípidos igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía
almacenada. Los lípidos son componentes importantes de las membranas
celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol.

Prueba de Sudán:

Detecta las cadenas de hidrocarbonos. El reactivo de Sudán produce una

reacción hidrofóbica donde los grupos no polares (los hidrocarbonos se
agrupan y son rodeados por moléculas del reactivo. La prueba de Sudán tiñe
los hidrocarbonos o lípidos de rojo.

PROTEÍNAS
Las proteínas son moléculas compuestas por una o más cadenas de aminoácidos.
Las proteínas desempeñan muchas funciones; esta diversidad de funciones es
posible gracias a la variedad de estructuras proteínicas. Las células contienen
cientos de enzimas diferentes, que son proteínas importantes que dirigen casi todas
las reacciones químicas que se dan en la célula. Incluso otras proteínas brindan una
fuente de aminoácidos para el desarrollo de animales jóvenes como la albúmina de
la clara de huevo y la caseína de la leche. La hemoglobina transporta el oxígeno en
la sangre; mientras que las proteínas contráctiles en los músculos permiten el
movimiento tanto de células individuales como del cuerpo completo de los animales.

Prueba de Biuret:

El reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio (NaOH) y sulfato de

cobre (CuSO ). El grupo amino de las proteínas reacciona con los iones de
cobre del reactivo de Biuret y el reactivo cambia de color azul a color violeta.
Este cambio de color se considera resultado positivo para proteínas.
El propósito de esta práctica es familiarizarse con algunas de las pruebas
que se utilizan para detectar moléculas orgánicas según sus propiedades
únicas. Por lo general se puede determinar la clase de molécula orgánica
añadiendo un reactivo que reacciona con un grupo funcional particular. Si el
grupo funcional está presente, el reactivo tomará un color específico. De lo
contrario no habrá cambio de color. Esto es un ejemplo de una prueba
colorimétrica. Las pruebas que detectan la presencia de moléculas orgánicas
son pruebas cualitativas, mientras que las pruebas que permiten determinar
la cantidad de una molécula orgánica son pruebas cuantitativas.

Correlación con el programa de Biología

Esta práctica se relaciona con la competencia 2, Estructura y función celular, cuyo subtema
es 2.1 Biomoléculas y bioelementos.
 Material y equipo necesario
→ 40 Tubos de ensayo chicos (capacidad de 10 a 15 mL)
→ Pinzas para tubos de ensayo
→ Gradillas
→ Vasos de precipitados de 50 y 200 mL.
→ Mortero de porcelana
→ Bisturí y hojas para éste
→ Goteros
→ Toallas de papel
→ Pipetas
→ Reactivo de Benedict
→ Lugol
→ Reactivo de Biuret
→ Reactivo de Sudán
→ Solución de glucosa al 20%
→ Una papa
→ Una pera
→ Un sobre de gelatina sin sabor
→ Un huevo de gallina
→ Aceite vegetal
→ Mantequilla
→ Agua
→ Mechero
→ Tripié
→ Rejilla de asbesto
 Metodología
a) Detección de carbohidratos
Prueba de Benedict
1. Pele y triture un pedazo de papa, tratando de extraer el jugo.
2. Pele y triture un pedazo de pera, tratando de extraer el jugo.
3. Marque una serie de cuatro tubos.
4. Agregue a cada tubo:
Tubo 1: 3 mL de agua
Tubo 2: 3 mL de jugo de papa
Tubo 3: 3 mL de jugo de pera
Tubo 4: 3 mL de solución de glucosa al 20%
5. Adicionar 1 ml a cada tubo de reactivo de Benedict.
6. Mezclar cada uno de los tubos.
7. Calentar los tubos a baño María durante 10 minutos.
8. Observar y registrar resultados. Reconocer colores, intensidad de
color, comparar las muestras.

Tabla 1. Resultados de pruebas de Benedict para detección de carbohidratos.

 Muestra Benedict Benedict
Antes de calentar Después de calentar

Agua Azul cristalino Azul cristalino

Jugo de papa Ligeramente Naranja
café, degradado
con azul y fondo
blanco
Jugo de pera Un poquito Verde
naranja
Sol. de glucosa al 20% Azul cristalino Café naranjoso

Antes. A) Resultados. A)

b) Detección de lípidos
Reactivo de Sudán
1. Marque tres tubos de ensaye con los números 1, 2 y 3
respectivamente.
2. Agregue a cada tubo:
Tubo 1: 1 mL de aceite + 1 mL de agua
Tubo 2: 1 mL de jugo de papa o pera + 1 mL de agua
Tubo 3: 2 mL de agua
3. Adicione una gota de reactivo de Sudán a cada uno de los tubos.
4. Mezcle.
5. Observe y registre resultados.
 Muestra Sudán Sudán
Antes de calentar Después de calentar

Agua+Aceite De la base se quedo Conservo los mismos colores

transaprente mientras que e la que al inicio
parte superios camnip a un tono
rojizo muy tenue
Jugo de pera+Agua Presento un ligero color naranja Su color se desvanecio
ligeramente
Agua No presento cambios No presento cambios

Mantequilla+Agua La parte superior estaba Conservo los colores del

amarilla y por debajo un poco inicio
rojo

Antes. B) Después. B)
c) Detección de proteínas
1. Preparar ¼ del sobre de gelatina sin sabor, según las instrucciones
de la caja y mantener a baño María.
2. Separar la clara de huevo (albúmina).
3. Rotular cuatro tubos de ensayo con los números del 1 al 4.
4. Adicionar a cada tubo:
Tubo 1: 2 mL de agua
Tubo 2: 2 mL desolución de gelatina
Tubo 3: 2 mL clara de huevo
Tubo 4: 2 mL de jugo de pera
5. Agregar a cada tubo 1 mL de reactivo de Biuret.
6. Mezclar.
7. Observar y registrar observaciones.
 Sugerencias didácticas
A partir de los resultados y observaciones realizadas contesta las siguientes
preguntas, apoyándote en fuentes documentales relevantes:

¿Porque en los experimentos se incluye un tubo con agua?

Se incluye un tubo con agua para mirar la reacción que esta va a tener con
algunos de los reactivos que se le agregan a los tubos con muestras.

¿En la detección de carbohidratos, cuál tubo contiene más azúcares reductores,

por qué?

En la detección de carbohidratos, el tubo que tiene mas azucares reductores el

que contiene la pera, ya que la pera es una fructosa, un azúcar monosacárido,
además la papa es un almidón o sea un polisacárido que este compuesto por
varios monosacáridos, teniendo en cuenta estos azucares reductores los
monosacáridos y la mayoría de los disacáridos.

¿Cuál es la función del almidón para las plantas?

Es fuente de material alimenticio es consumida durante el metabolismo de las

plantas, como alimento cuando las plantas están bajo estrés, o bien como fuente
de energía en la germinación de las semillas y en las primeras etapas de las
plántulas.

¿Cuál es el principal componente de la clara de huevo y de la gelatina comercial?

La clara del huevo, está compuesta por agua y proteínas.

La gelatina sin sabor es una proteína de color amarillento, por lo tanto, libre de
carbohidratos o azucares, grasa y colesterol. La gelatina se obtiene del colágeno
natural del tejido conectivo animal, específicamente del cuero vacuno y se elabora
a través de una estricta selección de materias primas.

¿Qué es el reactivo de Benedict y qué detecta en los carbohidratos?

El reactivo de Benedict es una solución de sulfato de cobre, carbonato de sodio y
citrato de sodio en agua. Se utiliza para detectar la presencia de ciertos tipos de
carbohidratos conocidos como azúcares reductores. Estas sustancias pueden
sufrir reacciones químicas en las que dan electrones a otros compuestos, dando
como resultado la producción de nuevas sustancias, y reaccionan de esta manera
con el reactivo de Benedict para producir un compuesto insoluble de color rojizo.
La glucosa y la fructosa producen una reacción positiva, pero la sacarosa, el
azúcar de mesa, no. El reactivo se usa en pruebas de alimentos y para detectar
glucosa en la orina, lo que puede ser un signo de diabetes.

Cómo funciona

Los azúcares reductores reaccionan con el sulfato de cobre en el reactivo de

Benedict, reduciéndolo a óxido de cobre I, un compuesto insoluble de color rojizo
que forma un precipitado. El carbonato de sodio es necesario para alcalinizar la
solución, que es esencial para permitir que reaccionen algunos tipos de
carbohidratos, mientras que el citrato de sodio evita que el sulfato de cobre
reaccione con el álcali. La solución es de color azul, debido al sulfato de cobre. La
prueba es esencialmente cualitativa, es decir, se usa simplemente para verificar si
hay o no un azúcar reductor, y no para determinar la cantidad. Sin embargo,
puede usarse como una prueba cuantitativa cruda, ya que un color verdoso indica
solo un poco de azúcar reductor; amarillo, un poco más; y rojo, mucho.

¿Qué es el Lugol y por qué tiñe a ciertos carbohidratos?

El Lugol o disolución de Lugol es una disolución de yodo molecular y yoduro

potásico KI en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y recibe su
nombre en honor al médico francés Jean Guillaume Auguste Lugol.

Se utiliza esta disolución como indicador en la prueba del yodo, que sirve para
identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas,
formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por presentar
distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula de
polisacárido. El Lugol no reacciona con azúcares simples como la glucosa o la
fructosa.

El reactivo de Lugol, que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite

reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una
coloración azul-violeta intensa y el glucógeno y dextrinas por la formación de
coloración roja.

¿Qué es el reactivo de Sudán y por qué se usa para reconocer lípidos?

La técnica del Sudán III es un método utilizado generalmente para demostrar la

presencia de grasas mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros
lípidos. Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no
tienen afinidad por estructuras ácidas o básicas.

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las

grasas, porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser
de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.

¿Qué es el reactivo de Biuret y cómo reacciona con las proteínas?

La reacción o prueba de Biuret es un método que detecta la presencia de

compuestos de tres o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las
proteínas y péptidos cortos. El reactivo de Biuret consiste en una solución acuosa
de sulfato cúprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un ensayo
positivo con los enlaces peptídicos entre aminoácidos, cuando la solución queda de
color violeta. Esto se debe a que el cobre tiene la propiedad de formar iones
complejos, especialmente entre los enlaces peptídicos.
 Bibliografía
• Chagoya H. 2012. Manual de prácticas de Biología general. Universidad
Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Facultad de Biología.
• Murray K., Bender D., Botham K., Kennelly P., Rodwell V., Weil P. 2013.
Harper Bioquímica Ilustrada. 29ª edición. Editorial Mc Graw-Hill LANGE,
ISBN 9786071509147.
• http://academic.uprm.edu/jvelzg/labmoleculas.pdf

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