TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO / INSTITUTO

TECNOLÓGICO DE TEPIC
CINÉTICA
Tema: Cinética Microbiana
Práctica 4

Carrera: Ingeniería Bioquímica.

Profesor: Jorge Alberto Sanchez Burgos

Alumnos: Núm. De Control:

- Santibañez Quinteros Iris Jhanely 19401306
- Muñoz Ponce Rossy Montserrat 17400434
-Polanco Rodriguez Diana Stephanie 18400206
-Pérez Medina Leonardo Gabriel 19401284
-Gallegos Buenrostro Artueo 18400

Fecha de entrega: 5/06/2022

 ÍNDICE

Páginas
Marco teórico…………………………………………………………….……………...……3
Crecimiento Microbiano………………………………………………………………………3
Fases del crecimiento Microbiano……………………………………………………………..4
Factores que influyen en el crecimiento microbiano…………………………………………..5
Objetivos………………………………………………………………………………………6
Metodología ( Materiales y Procedimiento)...........................................................................7
Conteo celular…………………………………………………………………………………7
Datos tomados ( pH, sólidos totales y conductividad)...............................................................8
Interpretación de los resultados……………………………………………………………..9
Conteo celular…………………………………………………………………………………9
Conclusiones…………………………………………………………………………………
11
Referencias bibliográficas………………………………………………………………..…12

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 MARCO TEÓRICO

CRECIMIENTO MICROBIANO

Este se define como el incremento del nivel de las células. Este es un sinónimo de
multiplicación; y esta se refiere al incremento del número de células. El incremento de la gran
mayoría de los microorganismo procariotas ocurre por la fisión binaria, esto quiere decir que
a partir de una célula se forman dos células. Durante este ciclo de la división celular es
cuando ocurre la duplicación. csaconsultores (2018). A continuación se mostrará un ejemplo
visual.

El crecimiento microbiano se define por el incremento en el número de células o en la masa

celular por unidad de tiempo. La velocidad específica de crecimiento es característica para
cada tipo de microorganismo y medio de cultivo (sustrato). (csaconsultores, 2018)

El tiempo de generación es el tiempo requerido para que, a partir de una célula, se forman dos
células, esto quiere decir que es el tiempo que tarda una población microbiana en duplicarse.
Este tiempo varía considerablemente con los microorganismos y las condiciones ambientales
como la temperatura. (csaconsultores, 2018).

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FASES DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

El crecimiento de los microorganismos se pueden medir en lo que se le conoce como en una

“Curva de Crecimiento” , cabe recalcar que cada curva son distintas esto varía según el tipo
de microorganismos y según las condiciones en la que se encuentre el medio.
(csaconsultores, 2018).

Todas las curvas de crecimiento tienen en común las siguientes fases:

➔ Fase de lag o fase de latencia: es una fase de adaptación. Se corresponde con la

primera parte de la curva, y en ella el número de UFC permanece prácticamente
constante. (csaconsultores, 2018).

➔ Fase logarítmica o exponencial: es la fase en la cual los microorganismos se

multiplican con rapidez. Durante cada intervalo de replicación se producen tantas
nuevas células como se habían producido anteriormente de manera acumulada.
(csaconsultores, 2018).

Esta fase sigue continuando siempre y cuando no haya factores que limitan el
crecimiento, en los cultivos discontinuos el factor que hace que el crecimiento cese
puede ser el agotamiento de nutrientes, la acumulación de productos metabólicos o
una combinación de ambos. (csaconsultores, 2018).

➔ Fase estacionaria: Durante este periodo los microorganismos no se multiplican, lo

cual provoca la acumulación y la liberación de metabolitos inhibidores los cuales son
producidos por la escasez de nutrientes esenciales. (coli, 2019)

➔ Fase muerta: En esta última parte de la fase las condiciones no favorecen el

crecimiento de nuevas células, esto provocado principalmente por la falta de
nutrientes. (coli, 2019).

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FACTORES QUE INFLUYEN EN EL DESARROLLO MICROBIANO

Los microorganismos son seres vivos, por lo tanto necesitan unas condiciones adecuadas para
permitir su desarrollo. A continuación se mencionan algunos factores los cuales afectan el
desarrollo del crecimiento bacteriano (coli, 2019) :

➔ Temperatura: La temperatura es uno de los factores ambientales más importantes

para el crecimiento de los microorganismos. Como se sabe cada microorganismo tiene
una temperatura óptima de crecimiento. Cuando la temperatura es óptima esta
aumenta la velocidad de crecimiento, por lo tanto provoca la multiplicación de los
microorganismos. (coli, 2019).

➔ Temperatura del alimento: El pH y la acidez es otro de los parámetros ambientales

más importantes que existen, como pasa con la temperatura diversas especies de
bacterias presentan un pH máximo como mínimo. (coli, 2019) nos dice que mientras
más alejado sea el pH óptimo el crecimiento será más lento y mientras mas optimo o
mas sercas del mismo será más óptima la multiplicación de los microorganismos. Una
gran cantidad de microorganismos crecen a una velocidad de 7, esto sucede entre un
pH de 5 y 8.

➔ aw del alimento: la cantidad de agua disponible de un alimento no se mide en

términos de porcentaje de agua, sino mediante el parámetro a w. La aw de un alimento
es la relación entre la presión de vapor de agua en el alimento y la presión de vapor
del agua pura:

aw = PV del agua en al alimento / PV del agua pura

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 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Estudiar y analizar el crecimiento de los microorganismos.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

● Determinar el por que del crecimiento de las bacterias.

● Aprender a determinar ciertas condiciones de crecimiento bacteriano óptimas.
● Calcular el número de microorganismos que crecen en aproximadamente 30 minutos.

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 DESARROLLO (MATERIALES Y MÉTODOS)

A continuación se mostraran los equipos y los materiales que fueron necesarios que fueron
necesarios para cada etapa de la práctica.

CONTEO CELULAR

EQUIPO:
● Microscopio
● Cámara de Neubauer
● Micropipetas

MATERIALES:
● Puntillas para micropipetas
● Portaobjeto
● Aceite de inmersión
● Microtubos
● Azul de bromotimol
● Vasos para desechos

PROCEDIMIENTO

● Con una micropipeta se toma una muestra de la solución incubada de 100 ml.
● Posteriormente se empieza la dilución seriada, se vacía la muestra tomada en un
microtubo y se le agrega 900 microlitros y posteriormente se homogeniza.
● Se toma otro microtubo; el cual se llena con 500 microlitros y se homogeniza con
otros 500 microlitros pero de agua.
● En otro microtubo se le agrega 50 microlitros de la solución homogenizada, pero esta
vez se le agrega 50 microlitros pero de azul de bromotimol, posteriormente se
homogeniza.
● Se le agrega 10 microlitros a la cámara de Neubauer de la última solución
homogenizada y se pone el portaobjeto.

● Se coloca la cámara en el microscopio, pero antes de enfocar con el objetivo de 10x se

debe de agregar aceite de inmersión.
● Una vez enfocado con el de 10x se cambia el objetivo a 40X para empezar a contar
las células vivas y muertas de los cuadrantes que se encuentran en las esquinas (4).

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 ● Se hace el conteo de las células vivas y muertas y se reporta ese
dato.
● Los pasos anteriormente mencionados se realizan 2 veces, tanto para la muestra T3 y
T4.

TOMA DE DATOS : pH, SÓLIDOS TOTALES Y CONDUCTIVIDAD.

EQUIPO:
● Medidor de pH
● Medidor de conductividad
● Medidor de sólidos totales

MATERIALES:
● Leche
● Soporte universal
● bureta
● Probeta de 25 ml
● Agua destilada
● Matraz
● Indicador de fenolftaleína al 1% e hidróxido de sodio al 0.275 molar

PROCEDIMIENTO
● Vaciar un poco de la leche al vaso de precipitado , posteriormente medir pH,
conductividad, sólidos totales.
● Después vaciar la probeta y aforar a 25 , siguiendo a vaciar al matraz agregando 2
gotas de indicador y titular con hidróxido de sodio hasta 3 gotas.
● Observar el gasto de hidróxido.

Estos pasos mencionados anteriormente se repiten 2 vez más, tanto para el matraz T3 y T4.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

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 Conteo celular

Después de haber realizado la lectura de las muestras T3 y T4 en la cámara de neubauer

obtuvimos los siguientes datos, los cuales se mostrarán en la siguiente tabla:

Tabla de resultados de la muestra T3

Muestra T3

Cuadrante Vivas Muertas

1 7 1

2 7 2

3 15 0

4 7 0

Total 36 3

Tabla de resultados de la muestra T4

Muestra T4

Cuadrante Vivas Muertas

1 7 1

2 7 5

3 15 3

4 7 3

Total 32 12

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 A diferencia de los resultados obtenidos en las lecturas de las Muestras T1
y T2 se puede observar un crecimiento de los microorganismos, por lo que
se le puede considerar a las tablas mostradas anteriormente como los resultados obtenidos de
la “fase exponencial” del crecimiento microbiano.

Esto parece indicar que todo el procedimiento de sembrado de bacterias y las condiciones son
óptimas para el crecimiento bacteriano y todo va por muy buen camino.

A continuación se mostrarán unas tablas con los resultados obtenidos sobre la acidez
y la conductividad de las muestras T3 y T4.

Con los resultados obtenidos sobre la acidez podemos decir que los microorganismos
no se adaptaron bien al medio, esto pudieron ser varios factores como los factores
ambientales o un mal procedimiento. Esto se aprecia en la tabla, ya que el nivel del ácido fue
constante prácticamente todo el tiempo y de repente subió. Esto no debería de pasar.

En la gráfica sobre la conductividad se puede observar que los niveles de

conductividad fueron subiendo de manera constante.

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 CONCLUSIONES

Al realizar esta práctica de cinética microbiana nos sirvió demasiado para poder observar el
crecimiento microbiano, poder identificar algunos factores que pudieron afectar al
crecimiento.

Pero sobre todo sirvió como un tipo test o como su nombre lo dice una práctica para poder
familiarizarse más con los instrumentos o material de laboratorio, esto para ser más eficientes
en las próximas prácticas de laboratorio.

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 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● Alimentaria, C.-S. (2021, 28 septiembre). ¿Qué es la cinética microbiana? -

CSA Seguridad Alimentaria. Recuperado 5 de junio de 2022, de
https://csaconsultores.com/que-es-la-cinetica-microbiana/

● Crecimiento bacteriano. Modelos predictivos de ComBase. (s. f.). Recuperado

5 de junio de 2022, de
http://coli.usal.es/web/demos/demo_alteracion/FactoresCrecimiento/
FactoresCrecimiento.html

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