Coatzacoalcos ver.

Centro Bachillerato tecnológico industrial y de servicios No. 85 (cbtis 85)

Dr. José María Liceaga

Modulo #3. Ejecuta métodos de análisis cuantitativos químicos y microbiológicos

Submódulo #3. - Cuantifica microorganismos (CMICRO)
Profesor: Q. F. B. Jesús Melesio Ornelas Mijangos
Grado y grupo. - 4BLM
Equipo. – 5
Integrantes:
• Rueda Leetch Kevin Manuel

Especialidad: Técnico Laboratorista Químico

Competencia profesional No. 6: Cuantifica microorganismos viables por métodos

indirectos, preparando las muestras e insumos en diferentes productos, siguiendo
instrucciones y procedimientos y aplicando buenas prácticas de laboratorio.

3.6 Práctica de laboratorio

"Programa de recolección de residuos sólidos urbanos

(reciclaje)"

Periodo semestral: enero 23 / junio 23

Fecha de entrega: 12/06/2023
 -_Contenido_-
Introducción ................................................................................................................. 3
Objetivo ........................................................................................................................ 3
Procedimiento .............................................................................................................. 3
Resultados ................................................................................................................... 4
Conclusión ................................................................................................................... 4
Bibliografía ................................................................................................................... 5
Introducción

El método de cuantificación de microorganismos (indirecto) haciendo uso del azul de metileno,

se le conoce como reductasa, y es un método utilizado en la industria química, industria
farmacéutica, así como también en la industria alimentaria. Esta técnica tiene como fin
determinar la cantidad de microorganismos presentes, ya sea vivos o muertos. Se basa en la
capacidad del azul de metileno para penetrar en las células microbianas y teñirlas, lo que
facilita su observación y conteo.

Objetivo

▪ Cuantificar la cantidad de microorganismos presentes en una muestra.

▪ Determinar la viabilidad de los microorganismos en la muestra.

▪ Estimar la carga microbiana total en un entorno determinado.

Procedimiento

1. Marca 3 tubos estériles: C (Control), Tubo 1 y Tubo 2.

2. Registrar el peso del frasco estéril (P1). Despues de agregar el residuo sólido, registrar el
peso del frasco (P2).

3. Realizar una diferencia de ambos pesos para determinar el peso total del nuestro residuo.

4. Medir con una jeringa 10 ml de solucion salina esteril, verter en el frasco con residuo y
agitamos.

5. Preparamos una solucion de azul de metileno al 0.005%.

6. Vertemos 10 ml de leche LALA semidescremada ultra pasteurizada en cada tubo y a cada

uno le agregamos lo siguiente:

▪ Tubo C: 1ml de azul de metileno

▪ Tubo R1: 1 ml de azul de metileno y 1 ml de la solucion salina estéril del frasco de residuo
▪ Tubo R2: 1 ml de azul de metileno y 1 ml de la solucion salina estéril del frasco de residuo

7. Rotar los tubos 25 veces, despues introducir a la estufa de cultivo a 37°C

8. Observar los cambios de cada tubo durante 10 minutos, despues cada 30 minutos hasta
pasar las 9 horas, registrar las observaciones dependiendo de cada intervalo de tiempo.
Resultados

𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 𝑃2 − 𝑃1
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 167.8092𝑔 − 161.3644g
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 6.4448g
Tiempo resultante: 1 hora y 45 min
= 10,000,000 microorganismos

𝑀𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠 ∙ 𝑉 ∙ 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑙𝑒𝑐ℎ𝑒
𝑀𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠/𝑔 =
𝑔 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

10,000,000 ∙ 1𝑚𝑙 ∙ 10𝑚𝑙

𝑀𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠/𝑔 =
6.4448𝑔
100,000,000
𝑀𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠/𝑔 =
6.4448𝑔
𝑀𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠/𝑔 =15,516,385

R= 15,516,385 microorganismos/g, por lo que determinamos que esta es la cantidad que

se encuentra en nuestro residuo solido urbano

Conclusión

Durante la realización del metodo, se logra observar un cambio de color haciendo que se vea
más incoloro en ambos tubos al cabo de un tiempo, durante el transcurso del tiempo logramos
determinar la cantidad de microorganismos que se generaron durante el intervalo de tiempo
en la estufa de cultivo, determinar que la cantidad de microrganismos/g = 15,516,385
 Bibliografía

 Evaluación DE la calidad fisicoquímica e higiénica DE la Leche fresca

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https://issuu.com/javieraponteelera/docs/universidad_20catolica_20sedes_20s
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 Practica 1 - Prueba de la reductasa en leche - UNIVERSIDAD AUTONOMA DE
NUEVO LEÓN FACULTAD DE. (s/f). Studocu. Recuperado el 13 de junio de
2023, de https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-autonoma-de-
nuevo-leon/higiene-y-saneamiento/practica-1-prueba-de-la-reductasa-en-
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 Unknown. (s/f). QUIMICA DE ALIMENTOS. Blogspot.com. Recuperado el 12 de
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reductasa-de-la-leche.html
 Wikipedia, F. (2011). Quimica de Alimentos: Aditivos Alimentares, Carboidratos,
Lipidos, Proteinas, Vitaminas, Grb2, Riboflavina, Colesterol, Ubiquitina. Books
LLC, Wiki Series.
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https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/38380/Eva
 (S/f-b). Org.co. Recuperado el 13 de junio de 2023, de
http://www.scielo.org.co/pdf/bsaa/v6n2/v6n2a08.pdf