Instituto Politécnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología

Laboratorio de Biotecnología Molecular

Práctica 2. Operación de equipo e

instrumental de Laboratorio (Uso de
micropipetas y equipo de laboratorio)

Profesores: Equipo 3 Integrantes:

Pérez Solis Erick Emmanuel Flores Gómez Christian Jesús

Villalobos Escobedo Flor Selene Gómez Martínez Mayra del Carmen

Zamora Contreras Aida Margarita Martínez Castellanos Gonzalo

Mulato Carrasco Alexis
Reyes Martínez Berenice
Grupo: 4BM2

Semestre 22-2
 Fecha de entrega: 18 de febrero de 2022.
Práctica 2. Operación de equipo e instrumental de Laboratorio (Uso de micropipetas
y equipo de laboratorio)

Objetivo General

Conocer el uso adecuado de equipo e instrumental de laboratorio, principalmente

micropipetas de diversos volúmenes.

Objetivos específicos

 Adquirirá destreza en la utilización de equipo e instrumental general de

laboratorio.
 Conocer los tipos, las partes y el funcionamiento de las micropipetas que utilizará
en el laboratorio de Biotecnología.
 Determinará si su juego de micropipetas está calibrado de acuerdo con CV y %E.

Metodología

 Partes de la micropipeta

Ilustración 1. Diagrama de metodología - Partes de la micropipeta

 Llenado de la micropipeta
 Ilustración 2. Diagrama de metodología - Llenado de la micropipeta

 Expulsión de la muestra

Ilustración 3. Diagrama de metodología - Expulsión de la muestra

 Calibración de la micropipeta

Ilustración 4. Diagrama de metodología - Calibración de la micropipeta

Tabla 1. Reactivos

Reactivo
Agua Es el nombre dado al agua que ha sido sometida al proceso de Intercambio
desionizada iónico para eliminar sales.
Glicerol Es un alcohol con tres grupos hidroxilos (–OH). Se trata de uno de los
principales productos de la degradación digestiva de los lípidos, paso previo
para el ciclo de Krebs y también aparece como un producto intermedio de la
fermentación alcohólica. Se presenta en forma de líquido a una temperatura
ambiental de 25 °C y es higroscópico e incoloro. Posee un coeficiente de
viscosidad alto y tiene un sabor dulce como otros polialcoholes.
Alcohol El etanol es un subproducto natural de fermentación vegetal y también se
puede producir mediante la hidratación del etileno. Debido a que puede
disolverse fácilmente en el agua y otros compuestos orgánicos, el etanol
también es un ingrediente de una variedad de productos.

Cuestionario previo

1. Busca la definición de los siguientes conceptos: Calibración, Precisión y

Exactitud. 
 
La calibración es el conjunto de operaciones aplicadas a un instrumento o equipo de
medición, siguiendo un procedimiento sistemático, cuyos resultados debidamente
documentados permiten determinar los errores (desviaciones) de este instrumento
con respecto a los valores indicados por un instrumento de referencia (patrón) de
incertidumbre conocida.
La exactitud de un instrumento es su capacidad de acertar en el valor correcto, es decir
nos informa de la cercanía al valor real. La exactitud será estimada como la desviación
positiva o negativa observada al calibrar un dispositivo en determinadas condiciones
ambientales y de montaje, siempre siguiendo un procedimiento establecido.
La precisión de un instrumento designa su capacidad de indicar el valor medido con poco
margen de variación. Otra manera de entenderlo es con el concepto de repetibilidad. Si en
las mismas condiciones ambientales y aplicando el mismo procedimiento, el instrumento
repite la lectura, es decir indica o transmite el mismo valor medido anteriormente, el
instrumento es preciso. Dicho de otra forma, el instrumento tiene un bajo nivel de
dispersión de las medidas.
¿Qué es la calibración? (s.f.), de geometrics.net. Recuperado 18 de febrero de 2022.
Disponible en: https://www.gometrics.net/que-es-la-calibracion-3/
2. Describe los pasos para calibrar una micropipeta.  

Se necesita previamente, agua destilada, frasco de puntas sucias y tubos eppendorf para
hacer las mediciones.

1. Tarar la balanza analítica.

2. Una vez que la balanza esté tarada, poner el tubo eppendorf vacío sobre la balanza
y registrar su peso. Repetir este proceso entre 5 y 10 veces tarando la balanza en
cada ocasión y esperando un mínimo de 30 segundos entre cada operación.
3. Depositar a continuación, con una micropipeta y dentro de los tubos eppendorf, el
volumen que indica el fabricante y un volumen más pequeño.
4. Una vez que los tubos eppendorf contengan el agua, volver a pesarlos en la
balanza analítica repitiendo el procedimiento antes mencionado.
5. Proceder a realizar los cálculos. Se realiza la diferencia de los pesos obtenidos en
las mediciones para saber el peso real. Posteriormente, con el dato de la densidad
del agua se convierte el peso a volumen. Si la pipeta arroja resultados
correspondientes a lo que indica, entonces está calibrada.

3. Investiga los tipos de errores generales que se pueden presentar al realizar la

calibración de una micropipeta.  

El error de medición de un instrumento es la diferencia entre el valor real y el valor

obtenido. Básicamente, hay dos tipos de errores de medición:

Error aleatorio (imprecisión)

 Se produce por eventos únicos imposibles de controlar durante el proceso de

medición.
 Es un error inevitable.
 Si se aumenta el número de mediciones, se puede disminuir el error.

Error sistemático (inexactitud)

 Se produce de igual modo en todas las mediciones. Puede ser debido a un defecto
del instrumento, a una particularidad del operador, al proceso de medición...
 Este tipo de errores se puede prevenir: calibración del instrumental, protocolo de
medición, etc.
Los factores ambientales pueden producir errores de medición, sobre todo, la
temperatura. Otros agentes como la humedad o la presión también pueden influir.
La mayoría del material de laboratorio se calibra a 20°C (temperatura ambiente). Es una
cuestión a tener en cuenta cuando se trabaja con soluciones frías o calientes debidas a la
refrigeración, reacciones químicas, salas sin ventilación o cualquier otra circunstancia.

Calibración de micropipetas (s.f.), de testexamen.com. Recuperado 18 de febrero de 2022.

Disponible en: https://www.testexamen.com/test/practicas-laboratorio/calibracion/
metodo-calibrar-micropipeta-gravimetrico.html

4. ¿A qué se refiere el Porcentaje de Exactitud (E%) y Coeficiente de variación (CV

%)?  
 
El porcentaje de exactitud indica la medida de la exactitud del valor medido respecto al
valor teórico, expresado en porcentaje.
El coeficiente de variación es una medida estadística que informa acerca de la dispersión
relativa de un conjunto de datos. Es decir, informa al igual que otras medidas de
dispersión, de si una variable se mueve mucho, poco, más o menos que otra.

Francisco Javier Marco Sanjuán, 02 de octubre, 2017

Coeficiente de variación. Economipedia.com
5. Investiga que es el valor nominal y el valor Z.   

El valor nominal indica el valor teórico o ideal de cualquier cosa que pueda ser
cuantificable, en oposición al valor real, que es el que se obtiene en una medición dada.
El valor Z es un estadístico de prueba para las pruebas Z que mide la diferencia entre un
estadístico observado y su parámetro hipotético de población en unidades de la
desviación estándar. Por ejemplo, un conjunto de moldes de fábrica tiene una
profundidad media de 10 cm y una desviación estándar de 1 cm. Un molde con una
profundidad de 12 cm tiene un valor Z de 2, porque su profundidad es dos desviaciones
estándar mayor que la media. 

El factor Z (mL/g que es lo mismo que µl/mg), que toma en consideración la densidad del
agua, la temperatura de control y la presión atmosférica. Z es igual a 1,0032 µl/mg,
referido a 21,5 ° C, 1013 mbar (hPa) y a la utilización de agua destilada o z es igual a
1,0029 µl/mg, referido a 20 5 ° C y 1013 mbar (hPa). El factor Z es igual a 1/densidad.
 Ilustración 5. Factor Z del agua destilada a diferentes temperaturas

Contreras-Pineda, J. (s.f.) Práctica – El uso de micropipetas. Recuperado 18 de febrero de

2022. Disponible en: https://jorge-contreras.webs.com/guia-El%20uso%20de
%20micropipeta-BM.pdf
¿Qué es un valor Z? (s.f.), de support.minitab.com. Recuperado 18 de febrero de 2022.
Disponible en:
https://support.minitab.com/es-mx/minitab/18/help-and-how-to/statistics/basic-
statistics/supporting-topics/tests-of-means/what-is-a-z-value/

Valor nominal (s.f.), de Wikipedia.org. Recuperado 18 de febrero de 2022. Disponible en:

https://es.wikipedia.org/wiki/Valor_nominal#:~:text=En%20distintos%20campos%20de
%20la,obtiene%20en%20una%20medici%C3%B3n%20dada.

6. Menciona algunos tips para tomar el volumen correcto con una micropipeta.  
 
 Asegurarse que la pipeta esté en el rango del volumen necesario.
 No dispensar los líquidos tomados demasiado deprisa.
 Asegurarse que al tomar la muestra la pipeta siempre esté posicionada de manera
vertical.
 Utilizar las puntas adecuadas para cada rango de micropipeta.

Otras referencias
Glicerol (s.f.), de Wikipedia.org. Recuperado 18 de febrero de 2022. Disponible en:
https://es.wikipedia.org/wiki/Glicerol
Etanol (s.f.), de chemicalsafetyfacts.org. Recuperado 18 de febrero de 2022. Disponible
en: https://www.chemicalsafetyfacts.org/es/etanol/