Agar sangre

Materiales:
 Agar base (Blood agar base) 10 g.
 Matraz.
 Capsulas de Petri.
 Cilindro graduado.
 Termómetro de sonda.
 Sangre desfibrinada 5% preferiblemente de ovejo o caballo (12,5 ml)
 Autoclave de chamberland.
 Balanza.
 Agua destilada o purificada (250 ml)
 Mechero.
 Asa.
 Espátula.
 Plancha de calentamiento, baño maría o cocina eléctrica.
 Exudado faríngeo.

Preparación:

Una vez desinfectada el área de trabajo y esterilizados los materiales de vidrio

previamente lavados con jabón neutro y agua destilada, se pesa en una balanza
10 g de agar base (blood agar base) con ayuda de una espátula y se agrega al
matraz donde se va a preparar la mezcla, seguidamente se agrega 250 ml de
agua destilada o purificada, tapar y disolver.

Para obtener una mezcla homogénea se debe colocar el matraz en una plancha
de calentamiento, un baño maría, cocina eléctrica o sobre el mechero, con este
último ir moviendo la mezcla en círculos para evitar que se asiente el agar base y
se queme.

Ya disuelto se lleva al autoclave de chamberland a 121 °C durante 15 minutos,

transcurrido este tiempo apagamos el autoclave dejamos que se enfríe un poco,
destapamos y retiramos el matraz con la mezcla. La mezcla debe bajar a una
temperatura no menor de 50 °C, teniendo como referencia el calor que la mano
soporte.

Seguidamente destapamos el matraz y agregamos el 5% de sangre (12,5 ml),

para realizar este paso es necesario estar cerca del mechero y flamear la boca de
los tubos de ensayo donde este la sangre. Luego disolvemos y vertemos en las
capsulas de Petri, abiertas solo a mitad tomando en cuenta no sobrepasar los 18
a 20 ml de agar sangre por capsula de Petri.

Una vez frías las capsulas se guardan al revés para evitar contaminación del agar
cuando se formen gotas de agua.

Para realizar la siembra del cultivo tomamos el exudado faríngeo y lo

descargamos frotando el hisopo en las orillas de las capsulas de Petri con agar
sangre. Luego procedemos a realizar las estrías a partir de la descarga.
Para la siembra tomamos un asa y la esterilizamos en el mechero hasta que se
torne de color rojo, abrimos la capsula de Petri cerca del mechero, enfriamos el
asa en una sección del agar donde no haya colonia y procedemos a realizar las
estrías.

Con ayuda del asa tomamos una colonia y comenzamos a distribuirlo en forma
de zig–zag anchos por toda la capsula, giramos la capsula y realizamos el mismo
procedimiento, así hasta que hayan distribuido 3 0 4 estrías en diferentes zonas
de la capsula.
Se marca la capsula con fecha, cepa y medio de cultivo y se lleva a la incubadora
por 24 h a 35-37 °C.

Luego se retiran y se identifica el cultivo con sus respectivas pruebas.