DOCUMENTO DE APOYO PARA EL DESARROLLO DEL

PROGRAMA DE ASIGNATURA

FACULTAD REGIONAL MULTIDISCIPLINARIA DE CHONTALES.

“CORNELIO SILVA ARGÜELLO”
2022, “POR MAS VICTORIAS
EDUCATIVAS”

DEPARTAMENTO CIENCIAS, TECNOLOGÍA Y SALUD

MICROBIOLOGÍA MÉDICA

GUÍA DE LABORATORIO N°1

Docentes:

• Dra. Ingrid Vanessa Campos González.

Ginecóloga Obstetra.

Dra. Jamilah Sánchez Guevara

Dr. Melendez
 Microbiología clínica.

Laboratorios básicos – niveles de

bioseguridad 1 y 2
Las orientaciones y recomendaciones que se ofrecen en el presente manual a título de requisitos
mínimos para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad atañen a los microorganismos
de los grupos de riesgo 1 a 4. Aunque algunas precauciones pueden parecer innecesarias para
algunos organismos del grupo de riesgo:
1. son convenientes con fines de capacitación, para fomentar el uso de técnicas
microbiológicas apropiadas (es decir, seguras). Todos los laboratorios de diagnóstico y de
atención de salud (de salud pública, clínicos o de hospital) deben estar diseñados para
cumplir, como mínimo, los requisitos del nivel de bioseguridad.
2. Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que
recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo más altos de lo
previsto. Esa posibilidad debe tenerse presente en la elaboración de los planes y las políticas
de seguridad. En algunos países se exige que los laboratorios clínicos estén acreditados. En
general, siempre deben adoptarse y aplicarse las precauciones normalizadas. Las directrices
para laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 que aquí se exponen son
completas y detalladas, ya que son fundamentales para todo tipo de laboratorios. Las
directrices para los laboratorios de contención – nivel de bioseguridad.
3. Los laboratorios de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 que se ofrecen más
adelante (capítulos 4 y 5) son modificaciones y adiciones a estas directrices y están
concebidas para trabajar con los agentes patógenos más peligrosos (de mayor riesgo).

Protección personal

1. Se usarán en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo en el

laboratorio.
2. Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que puedan entrañar
contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente
infecciosos o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarán de forma aséptica
y a continuación se lavarán las manos.
3. El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales y animales infecciosos,
así como antes de abandonar las zonas de trabajo del laboratorio.
4. Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de protección cuando sea necesario
proteger los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.
5. Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por ejemplo, en cantinas,
cafeterías, oficinas, bibliotecas, salas para el personal y baños.
6. No se usará calzado sin puntera.
 Microbiología clínica.

7. En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, fumar, aplicar cosméticos o manipular
lentes de contacto.
8. Estará prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano en las zonas de trabajo
del laboratorio.
9. La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos armarios o taquillas que la
ropa de calle.
10. Limpiar y desinfectar la superficie de mesones antes y después del trabajo del día.
11. Lave sus manos con agua y jabón antes y después de cada práctica. Luego asegure de frotarse
las manos con alcohol.
12. En caso de regarse un cultivo sobre la mesa o el piso o cualquier accidente como cortadura,
quemaduras, caída del material infectado en la conjuntiva ocular, ruptura de una lámina montada
al microscopio de aviso inmediato al profesor o monitor. Tome todas las precauciones posibles
para evitar estos accidentes.
Cuando tenga el asa bacteriológica cargada con algún cultivo de microorganismos no se desplace
de un área a otra ya que puede crear aerosoles, trabaje solo en su puesto.
13. Flamee el asa antes y después de usarla.
14. Descarte todo el material usado en recipientes destinados para tal fin por ningún motivo en
los desagües o lavatorios.
15. Tenga cuidado con las preparaciones teñidas ya que puede salpicar colorantes a mesones y
pisos.
16. Al final de la práctica dejar el lugar limpio y ordenado.

Equipo: Microscopio Marca OLYMPUS modelo CX21

1. Objetivo

Conocer, manejar y aplicar el uso del microscopio marca: Oympus Modelo: CX21

2. Descripción

1. Perilla de encendido ON/OFF

2. Perilla de intensidad luminica
3. Pinza y platina
4. Carro con tornillos coaxiales X y
Y
5. Revolver
6. Tornillos macrometricos y
micrometricos
7. Tubo ocular
8. Oculares
9. Condensador
10. Diafragma y foco
11. Objetivos

Descripción de sus partes

 Microbiología clínica.

2.1 Sistema óptico

2.1.1 Oculares: Compuesto por dos lentes uno plano convexo y otro biconvexo dentro de un
tubo cilíndrico que conforman el ocular. Situados en la parte superior del microscopio
introducidos en el tubo ocular con un aumento de 10x. Por los cuales se observa la muestra
2.1.2 Objetivos: son cuatro y tienen un sistema de lentes dentro de un tubo cilíndrico los
cuales tienen aumentos de 4x, 10x, 40x y (100x el cual necesita aceite de inmersión para la
observación). Están situados en el revolver.
2.1.3 Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos y los pasa a través de la
preparación hacia los objetivos.

2.1.4 Diafragma: Regula la cantidad de luz que pasa a través del condensador.
2.1.5 Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

2.2 Sistema mecánico

2.2.2 Cuerpo del microscopio: Compuesto por la base la cual descansa sobre el mesón y
en la cual se encuentra el interruptor de encendido ON/ OFF y la perilla de intensidad
lumínica y la columna o cuerpo principal en la cual se encuentra toda la parte mecánica y
óptica que compone el microscopio
2.2.3 Platina: Lugar donde se deposita la preparación y soporta el carro.
2.2.4 Tubo ocular: Contiene un sistema de prismas y espejos los cuales dirigen la imagen
que tomaron los objetivos hacia los dos oculares para la observación.
2.2.5 Revólver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite al girar cambiar los
objetivos.
2.2.6 Tornillos de enfoque: Compuesto por: Tornillo macrométrico; está situado a ambos
lados de la columna. Se utiliza para acercar la platina con la muestra hacia el objetivo o
alejarla. Se utiliza para darle enfoque a la muestra.
2.2.7 Carro: Se encuentra sobre la platina y está compuesto por la pinza que sujeta al
portaobjetos y los tornillos coaxiales X y Y los cuales mueven la pinza sobre la platina hacia
la derecha y la izquierda, adelante y hacia atrás para centrar la muestra.

2. Funcionamiento
1. Enchufar a la red eléctrica de 110 V.
2. Verificar que el regulador de iluminación se encuentre a su menor intensidad.
 Microbiología clínica.

3. Accionar el interruptor ON/OFF para encenderlo.

4. Graduar la iluminación deseada con el regulador
5. Bajar la platina con la ayuda del tornillo macrométrico.
6. Colocar el portaobjetos con la muestra a observar sobre la platina y se asegura con la Con
la ayuda del mando coaxial “X y Y” del carro, colocar la muestra en el centro de la luz
que pasa a través del condensador.
7. Para iniciar la observación se coloca el objetivo de menor aumento “5X” , observar, subir
la platina hasta enfocar la muestra.
8. Con el tornillo micrométrico se le da mayor nitidez a la muestra observada.
9. Si hay eventuales ametropías de los ojos, compensarlo con el ocular enfocable.
10. Para enfocar a un objetivo de mayor aumento no se debe mover la platina, sólo se giran
los objetivos con la ayuda del revólver.
11. Al enfocar con el objetivo de 100X, se debe colocar una gota de aceite de inmersión
sobre el cubreobjeto que está tapando la muestra.
12. Terminada la observación, se baja la platina, se retira la muestra y se coloca en posición
de observación, el objetivo de menor aumento.
13. Se apaga y se desconecta.
14. Limpiar el objetivo de inmersión “100X” si se utilizó.
15. Dejar enfriar el microscopio si se va a transportar.
16. Colocar el forro.
 Microbiología clínica.

ACTIVIDAD N° 1. Lea detenidamente los nombres y uso de los equipos e instrumentos de

laboratorio y dibújelos en los espacios vacíos. Esto debe ser realizado antes de la práctica de
laboratorio.
OBJETIVO
Identificar en la práctica los equipos e instrumentos de laboratorio de Microbiología.
Aparatos (ABMM)

DIBUJO NOMBRE USO

Es un aparato que tiene una

gran sensibilidad, algunas
Balanza Analítica tienen hasta 1 diezmilésima
de sensibilidad.

Es una aparato que permite

Balanza pesar sustancias, su
sensibilidad es de 1 décima de
gramo.

Aparatos (ABME).

DIBUJO NOMBRE USO

Es un equipo que se utiliza

para la esterilización de
material, tanto de limpio como
Autoclave contaminado, que se basa en
la producción de vapor
contenido a altas presiones.

Es un aparato que permite

Vortex agitar sustancias en forma
homogénea.

Es un aparato que permite

PH-metro medir el pH
de las sustancias.

Equipo que permite la

reducción de la cantidad del
Destilador total de sales disueltas (TSD)
 Microbiología clínica.

de aguas dulces a salobres

Es una cámara con atmósfera

controlada por medio de
Cámara de Anaerobiosis gases especiales para el
cultivo de bacterias
anaerobias.

Se Usa para mantener a una

temperatura constante los
Incubadora cultivos microbiológicos, y
asegurar el crecimiento de los
microorganismos.

Se usa en la identificación de
los gases producidos en el
metabolismo bacteriano. El
Cromatógrafo con integrador integrador reporta los
resultados obtenidos por el
cromatógrafo.

Se usa para secar el material

Horno de vidrio usado en el
laboratorio, y guardar el
material esterilizado.

Se usa para almacenar

material limpio y conservar los
microorganismos. También se
Nevera emplea para conservar
reactivos que requieren bajas
temperaturas.

Se utiliza para aumentar la

vista de las colonias en la caja
Cuenta Colonias de petri, con el fin de facilitar
la identificación microscópica
y el conteo.

Es un aparato que permite

Plancha de calentamiento y calentar sustancias.
agitación

Es un aparato que se utiliza

para desgelificar los medios
Baño Marìa de cultivo y mantenerlos a una
temperatura constante.
 Microbiología clínica.

Utensilios de sostén.

Son utensilios que permiten sujetar algunas otras piezas de laboratorio. En este material
bibliográfico se le asignaron las siglas UDS. Dentro de esta categoría tenemos a lossiguientes
utensilios.

DIBUJO NOMBRE USO

Utensilio que sirve para

colocar tubos de ensayo.
Gradilla. Este utensilio facilita el manejo
de los tubos de ensayo.

Pinzas para crisol. Permiten sujetar crisoles

Permiten sujetar tubos de

Pinzas para tubo de ensayo. ensayo

Utensilios de uso específico.

Son utensilios que permiten realizar algunas operaciones específicas y sólo puede utilizarse
para ello. En este material bibliográfico se le asignaron las siglas UDUE. Dentro de esta
categoría tenemos a los siguientes utensilios.

DIBUJO NOMBRE USO

Están hechos de varilla de
Agitador de vidrio. vidrio y se utilizan para agitar
o mover sustancias..

Se usan para inocular

Asa de siembras muestras o bacterias puras en
los medios de cultivo.

Se usan para taponar tubos

Tapones caucho de ensayo para análisis
anaeróbicos.

Se usa para absorber líquidos

Pipeteador a través de pipetas.

Se utilizan para tomar e

Jeringas
inocular sustancias.
Cubetas para tinción
Microbiología clínica.

Se usan para contener los

colorantes y sumergir en ellas
el material a teñir.

Se usan para tomar pequeños

Pipetas Pasteur
volúmenes de sustancias.

Se usan para depositar en

Portaobjetos ellos las muestras a observar
al microscopio.

Se usan para cubrir las

muestras que están sobre el
Cubreobjetos
portaobjetos.

Se usan para contener los

Cajas de petri medios de cultivo donde
posteriormente se realiza la
siembra.

Se usa para el conteo de

Cámara de Newbauer.
células.

Permite realizar calentamiento

de sustancias a altas
Crisol
temperaturas.

Es un embudo que presenta

un diámetro de 90 mm. Se
Embudo de polietileno. utiliza para envasar sustancias
o soluciones.

Permite tomar sustancias

Espátula químicas y medios de cultivo.

Mechero bunsen Son utensilios metálicos que

permiten calentar sustancias.
 Microbiología clínica.

Presentan una base, un tubo,

una chimenea, un collarín y un
vástago.
Con ayuda del collarín se
regula la entrada de aire. Para
lograr calentamientos
adecuados hay que regular la
flama del mechero a modo tal
que ésta se observe bien
oxigenada (flama azul).

Son utensilios hechos de

diferentes materiales como:
porcelana, vidrio o ágata, los
morteros de vidrio y de
Mortero de porcelana con
porcelana se utilizan para
pistilo o mano. triturar materiales de poca
dureza y los de ágata para
materiales que tienen mayor
dureza.

Es un utensilio que permite

medir la temperatura que
Termómetro
tienen algunas sustancias .

Son mallas de hierro más o

menos finas, a veces con un
circulo de asbesto en el centro
(malla de asbesto). Son
Malla de asbesto usadas cuando no se requiere
calentamiento a fuego directo,
el asbesto es buen aislante
del calor.

Para el lavado del material de

vidrio. Los más comunes se
Escobillas O Churruscos utilizan para tubos de ensayo,
buretas y para balones.
 Microbiología clínica.

Utensilios volumétricos.
Son utensilios que permiten medir volúmenes de sustancias líquidas. En este material
bibliográfico se le asignaron las siglas UV. De esta categoría tenemos a los siguientes
utensilios.

DIBUJO NOMBRE USO

Son matraces de vidrio que

permiten realizar soluciones
Balon aforado valoradas, los hay de diversas
medidas como: 50ml, 100ml,
250 ml, 500 ml,1L etc.

Este material existe en dos

presentaciones:
Pipetas aforadas.
Pipetas volumétricas.
Las primeras permiten medir
Pipetas. diversos volúmenes según la
capacidad de esta, las
segundas no están graduadas
y sólo permiten medir un
volumen único.

Este material permite medir

volúmenes,
Probeta. las hay de vidrio y de plástico
y de diferentes capacidades.
 Microbiología clínica.

Utensilios usados como recipientes.

Son utensilios que permiten contener sustancias, en este material bibliográfico se le

asignaron las siglas UUCR. Dentro de esta categoría tenemos a los siguientes utensilios.

DIBUJO NOMBRE USO

Permite contener sustancias

Frasco gotero. que se necesitan agregar en
pequeñas cantidades.

Permite guardar sustancias para

almacenarlas, los hay ámbar y
transparentes, los de color ámbar se
utilizan para guardar sustancias que
son alteradas por la acción de la luz
Frascos reactivos. del sol, los de color transparente se
utilizan para guardar sustancias que
no son afectadas por la luz solar.

Vasos de precipitado
Permite calentar y contener
sustancias

Matraces
Son recipientes de vidrio, esféricos,
de fondo redondo, provistos de un
cuello, sirven para calentar líquidos.
Hay balones con cuello más largo y
soldado a él un tubo estrecho
inclinado ligeramente hacia abajo
(Balones de destilación).
 Microbiología clínica.

Es un utensilio que se emplea para

contener sustancias, los hay de varias
Matraz Erlenmeyer capacidades.

Es un recipiente que se utiliza para

contener agua destilada, este
utensilio facilita la limpieza de
Frasco lavador electrodos.

Estos utensilios sirven para hacer

experimentos o ensayos los hay en
Tubos de ensayo varias medidas y pueden ser de vidrio
o de plástico.

Se usa para obtener precipitados de

Tubo de centrifuga líquidos, por medio de la
centrifugación.

Frasco de rosca Se usa para la toma de muestras.

Su objeto es quitar humedad a

algunas sustancias mediante otras
sustancias que son ávidas de ella
(ácido sulfúrico concentrado, cloruro
de calcio fundido, carbonato de
potasio, óxido de calcio, anhídrido
Desecador fosfórico, etc.). La sustancia a
desecar se coloca en recipientes
especiales en el compartimiento
superior, mientras la sustancia
desecadora va en el compartimiento
inferior comunicado con el anterior
por un orificio.

EVALUACION: El total de la actividad será de 100 ptos, distribuyéndose de la siguiente manera:

- Al inicio de la actividad, se realizara una prueba escrita con un valor de 50 ptos, en la que se evaluaran
los contenidos ya descritos.
- Se realizara una presentación donde se abordaran los objetivos previamente planteados;
. Parámetros internacionales, para clasificación de los laboratorios por niveles, Clasificación de los
microorganismos infecciosos por grupos de riesgo, conceptos básicos, microscopio, asepsia, contaminación,
microorganismo, antisepsia, lavado de manos e higiene de lavado en seco.
. En base a la norma 059, método de extracción, conservación y transporte de la muestra.
. Tipos de microscopio, ventajas e inconvenientes de uso, diferencias entre sí. Indicaciones principales de uso
. Descripción y función de cada equipo del instrumental de laboratorio
Llevar un microscopio en Banner para explicar partes de un óptico ( valor 5 ptos)
Microbiología clínica.