UNIVERSIDAD DE SONORA

DIVISIÓN DE CS. BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CS. QUÍMICO-BIOLÓGICAS

CARRERA
LIC. CIENCIAS NUTRICIONALES

Práctica 4

REACCIONES DE COLOR PARA IDENTIFICACIÓN DE

AMINOÁCIDOS

Nombre del alumno

GLORIA CAROLINA GARCIA RAMOS

Hermosillo, Sonora Fecha: 12/03/21

*PRACTICA 4

OBJETIVO
Realizar las reacciones de identificación de aminoácidos y proteínas: Biuret, Ninhidrina,
Millon, Xantoproteica.

Reacción de Biuret: Identifica proteínas.

Reacción de la Ninhidrina: Universal para detectar Aminoácidos.

Reacción de Millon: Identifica Tirosinas en solución o en Proteínas.

Reacción Xantoproteica: Identifica Tirosina y Triptófano.

PROCEDIMIENTO

Reacción de biuret

Se marcó cada tubo de ensayo con el nombre de la muestra, se introdujo un mini litro de cada
disolución y proteína estudiada en el tubo de ensayo, se preparó un tubo de ensayo con agua
destilada como blanco en los tubos de ensayo que hemos puesto en cada muestra, añadimos un
mililitro de reactivo de biuret y se agito, observamos y anotamos.

Reacción de ninhidrina

Se marcó cada tubo de ensayo con el nombre de la muestra, se introdujo un mini litro de cada
disolución y proteína estudiada en el tubo de ensayo, se preparó un tubo de ensayo con agua
destilada como blanco en los tubos de ensayo que hemos puesto en cada muestra, añadimos un
mililitro de reactivo de ninhidrina, se preparó en baño maría, se dejó actuar por 6 minutos y
observamos y anotamos.

Reacción de Millón

Se marcó cada tubo de ensayo con el nombre de la muestra, se introdujo un mini litro de cada
disolución y proteína estudiada en el tubo de ensayo, se preparó un tubo de ensayo con agua
destilada como blanco en los tubos de ensayo que hemos puesto en cada muestra, añadimos un
mililitro de reactivo de millón, se preparó en baño maría, se dejó actuar por 6 minutos y
observamos y anotamos.

Reacción de Xantoproteica
Se marcó cada tubo de ensayo con el nombre de la muestra, se introdujo un mini litro de cada
disolución y proteína estudiada en el tubo de ensayo, se preparó un tubo de ensayo con agua
destilada como blanco en los tubos de ensayo que hemos puesto en cada muestra, añadimos un
mililitro de reactivo de xantoproteica, se preparó en baño maría, se dejó actuar por 6 minutos y
observamos y anotamos.

FUNDAMENTO DE LAS REACCIONES

Reacción de la Ninhidrina: Esta prueba permite identificar compuestos que poseen

grupos aminos libres como son todos los alfa-aminoácidos, aminas-primarias y amoniaco.
Al añadir ninhidrina a una solución que contenga aminoácidos, experimenta una reacción
de oxidación y reducción con los grupos amino libres, desdoblándolos en grupos carbonilo
y amoniaco por desanimación oxidativa. Esta reacción ocurre a pH entre 4 y 8.

Reacción de Millón: Esta prueba nos permite detectar compuestos con radical
hidroxibenceno como el aminoácido tirosina 6 sus derivados; así como proteínas que los
contengan (albumina). El reactivo de millón es una mezcla de nitritos y nitratos mercúricos
los cuales ocasionan la mercuracion y nitración, o nitrosación del grupo fenólicos de los
aminoácidos libres o presentes en proteínas, generando un precipitado blanco por la
acción del calor, toma un color rosado o rojo ladrillo.

Reacción Xantoproteica: Mediante esta prueba cualitativa podemos identificar

aminoácidos que contienen anillos aromáticos o heterocíclicos en su molécula o proteínas
que los contengan; aunque el anillo bencénico de la fenilalanina no tiene suficiente
capacidad para tornar positiva la prueba. Cuando los aminoácidos con la característica
estructural ya mencionada, se calienta en presencia de ácido nítrico concentrado,
producen compuestos nitrados de color amarillo, a los cuales el álcali como el NaOH o
NH4OH, convierten en sus sales respectivas de color naranja.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS
 DATOS EXPERIMENTALES

Reacción de Biuret

Tubo No. Muestra Color ¿Es proteína o AA?

1 Tirosina Celeste AA
2 Valina Celeste AA
3 Leucina Celeste AA
4 Metionina Celeste AA
5 Prolina Celeste AA
6 Caseína Violeta Proteína
7 Gelatina Violeta Proteína

Reacción de Ninhidrina

Tubo No. Muestra Color ¿Es proteína o AA?

1 Tirosina Violeta-azul AA
2 Valina Violeta-azul AA
3 Leucina Violeta-azul AA
4 Metionina Violeta-azul AA
5 Prolina Violeta-azul AA
6 Caseína Violeta-azul AA
7 Gelatina Violeta Proteína

Reacción de Millon

Tubo No. Muestra Color ¿Es proteína o AA?

1 Tirosina Anaranjado Proteína
2 Valina Celeste AA
3 Leucina Celeste Proteína
4 Metionina Celeste AA
5 Prolina Anaranjado Proteína
6 Caseína Ninguno AA
7 Gelatina Ninguno AA

Reacción Xantoproteíca
 Tubo No. Muestra Color ¿Es proteína o AA?
1 Tirosina Amarillo claro Proteína
2 Valina Ninguno AA
3 Leucina Ninguno AA
4 Metionina Ninguno AA
5 Prolina Ninguno AA
6 Caseína Ninguno AA
7 Gelatina Naranjo claro Proteína

DISCUSION DE RESULTADOS

Reacción de Ninhidrina

En teoría, todas las muestras deberían ser positivas porque el reactivo de ninhidrina puede
reconocer aminoácidos porque forma complejos con sus grupos α-amino. Para las dos proteínas
de la muestra, albúmina y gelatina, también tienen un efecto positivo en la reacción, porque
estructuralmente tienen grupos α-amino libres, por lo que el color característico de la ninhidrina
no es tan fuerte con los aminoácidos utilizados.

Reacción de Millón
Puesto que este reactivo es para identificar la presencia de aminoácidos fenólicos en
una solución, la tirosina dio positivo al formar complejos con los iones del reactivo, lo que
produce una precipitación con un color rojo o anaranjado. La Gelatina no reaccionó a esta
prueba porque en su estructura no tiene anillos aromáticos. Sin embargo, la tirosina, prolina
indicaron la presencia de proteína

Reacción Xantoproteica

Esta prueba cualitativa determina si existen proteínas o aminoácidos con grupos aromáticos en la
muestra, es decir, el ácido nítrico reacciona con los grupos fenólicos de los aminoácidos para
generar derivados nitro; se produce naranja o amarillo. Y las que reaccionaron (tirosina y gelatina)
indican que son proteínas.

CONCLUSIÓN

Se identificaron las reacciones de biuret, millón, xantoproteica y ninhidrina. Las diferentes pruebas
cualitativas para identificar aminoácidos y proteínas se basa en sus propiedades químicas,
dependiendo del grupo carboxilo, grupo amino, como la reacción xantoproteica o de la cadena
lateral, como fue el caso de la reacción de Millón.

CUESTIONARIO
¿De qué manera se pueden diferenciar proteínas de aminoácidos mediante la prueba de Biuret?

El Reactivo de Biuret indica la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos
o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. ... El reactivo cambia a
violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena
corta.

¿Qué significa que una muestra negativa la prueba de biuret pero positiva la prueba de
ninhidrina?

Cuando la reacción de biuret da negativa, queda de color azul y solo tiene un componente y la
ninhidrina Da positiva cuando se manifiesta por la aparición de una coloración violeta y tiene más
de dos componentes

¿Por qué la prolina no forma un complejo de color azul-violeta en la reacción con ninhidrina?

La ninhidrina reacciona con un mol adicional de ninhidrina oxidada y un mol de ninhidrina

reducida para dar una sustancia de color azul violeta.

En el caso de los aminoácidos como la prolina, el producto que se forma tiene color amarillo, con
un máximo de absorción de 440 nanómetros.

¿Por qué la gelatina daría negativa la prueba de millón?

La Gelatina no reaccionó a esta prueba porque en su estructura no tiene anillos aromáticos.

Bibliografías

1. Universitat Politècnica de València - UPV. (2017, 4 octubre). Identificación

cualitativa de aminoácidos y proteinas | | UPV. YouTube.

https://www.youtube.com/watch?v=V6TV6aeJQQA

2. Laboratorios FCNI. (2020, 20 agosto). Pruebas de reconocimiento de aminoácidos.

Reacción con la ninhidrina. YouTube. https://www.youtube.com/watch?

v=KcfuspLbDM8

3. Knust oer. (2012, 25 octubre). Xanthoproteic Test - Colour Reaction of Proteins.

YouTube. https://www.youtube.com/watch?v=VCzu3sCEE1c