PRUEBAS GENERALES PARA AMINOACIDOS Y PROTEINAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA GENERAL

OBJETIVOS

 Observar la presencia de aminoácidos o proteínas que son evidentes con

un cambio de color en las diferentes soluciones.
 Identificar algunos aminoácidos que presenten grupos característicos en las
cadenas laterales utilizando ensayos cualitativos y específicos para cada
función.
 Determinar a qué compuesto corresponde la solución problema.

RESULTADOS

La reacción xantoproteica es una reacción exotérmica, hay desprendimiento de

calor al adicionar los reactivos.

REACCIÓN XANTOPROTEICA

La reacción xantoproteica es una reacción exotérmica, hay desprendimiento de

color al adicionar los reactivos. La prueba da resultado positivo en aquellas
proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, tirosina, fenilalanina,
triptófano. En esta prueba se produce la nitración del anillo bencénico presente en
los aminoácidos mencionados, lo que hace que de positivo en la prueba de la
gelatina pues esta es una proteína compleja, es decir, un polímero compuesto por
aminoácidos, en los cuales puede estar cualquiera de los anteriores aminoácidos
mencionados; asimismo arrojo resultados positivos la albúmina que es una
proteína conformada por una larga cadena de aminoácidos que forman una
estructura compleja tridimensional que le da sus características químicas;
fenilalanina que es un aminoácido con un anillo bencénico; y triptófano el cual es
un aminoácido esencial que posee 2 grupos bencénicos. En estas reacciones
podemos observar que en la adición de ácido nítrico concentrado a soluciones que
contienen proteína generalmente causa la formación de un precipitado blanco que
cambia a amarillo al calentarlo.
 PRUEBA COLOR RESULTADO
Gelatina Positivo
Amarillo fuerte
Albumina Positivo
Fenilalanina Amarillo Claro Positivo
Triptófano Amarillo fuerte Positivo
Blanco Negativo
Incolora
Solución Problema Negativo

PRUEBA DE BIURET

Esta prueba sirve para reconocer las uniones peptídicas. La positividad se

manifiesta por la aparición de una coloración violeta. Las proteínas por sus
uniones peptídicas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en medio
alcalino formando un complejo de color violeta. En la aplicación de esta prueba
dieron positivos la gelatina, y la albumina. La gelatina al ser una proteína
compleja, es decir, un polímero compuesto por aminoácidos, reacciona
positivamente para Biuret; La urea CO(NH2)2 al no tener composición proteica no
reacciona de forma positiva a esta prueba; la albumina al ser una proteína arroja
un resultado positivo para la prueba de Biuret; Observamos como la solución
problema dio negativo lo cual indica que no es una solución proteica.

PRUEBA COLOR RESULTADO

Gelatina Violeta Positivo
Urea Azul Negativo
Albumina Violeta Positivo
Glicina Negativo
Blanco Azul Negativo
Solución Problema Negativo

PRUEBA DE NINHIDRINA

En esta prueba se da una reacción en todas aquellas sustancias que presentan al

menos un grupo amino y uno carboxilo libre. La positividad se manifiesta por la
aparición de un color violáceo o amarillo. Debido a que las proteínas y los
aminoácidos, poseen esta característica, la reacción sirve para identificarlos. En
esta prueba dio positivo en Albumina, Glicina, fenilalanina Asparagina y solución
problema. La albumina a pesar de ser una proteína, contiene un aminoácido el
cual reacciona con la ninhidrina para dar un color azul el cual es positivo para esta
reacción; en cuanto la glicina, la fenilalanina y la Asparagina al ser aminoácidos
producen una reacción positiva.

PRUEBA COLOR RESULTADO

Albumina  Violeta claro Positivo
 Violeta
Positivo
Glicina oscuro
Fenilalanina  Violeta Positivo
Asparagina  Azul Positivo
Blanco   Negativo
Solución Problema  Incoloro Positivo

REACCION DE HOPKINS –COLE

Esta prueba, es una prueba estándar para el triptófano y para las proteínas que
contienen triptófano. Un anillo entre violeta y rojo en la unión de 2 líquidos
(sustancia con ácido glioxílico + ácido sulfúrico concentrado), indica que la
reacción es positiva. En esta reacción solo dio positivo para Triptófano en el cual
se observó la presencia de un anillo en la solución.

PRUEBA COLOR RESULTADO

Asparagina Negativo
Trasparente
Gelatina Negativo
Formación de un
Triptófano anillo anaranjado Positivo
tenue
Histidina Negativo
Blanco Trasparente Negativo
Solución Problema Negativo

REACCIÓN DE EHRLICH

La reacción de Ehrlich-Sachs es una reacción orgánica con la cual podemos

reconocer la presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la
cadena lateral de los aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con
ácido sulfanílico y nitrito de Sodio por formación de sales de Diazonio fuertemente
coloreadas permitiendo así detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o
formando péptidos y proteínas.
 PRUEBA COLOR RESULTADO
Albumina Positivo
Gelatina Anaranjado Positivo
Fenilalanina Positivo
Alanina Trasparente Negativo
Blanco Positivo
Anaranjado
Solución Problema Positivo

¿A QUE CORRESPONDE LA SOLUCIÓN PROBLEMA?

La solución problema solo dio positiva con Ninhidrina y Ehrlich, para el resto de
pruebas realizadas arrojo resultados negativos, lo cual nos indica no hay proteínas
pero si hay aminoácidos libres.

¿QUE CARACTERIZA A LOS AMINOÁCIDOS O A LAS PROTEÍNAS QUE

DIERON POSITIVO A LA PRUEBA EN LA REACCIÓN?

En la práctica utilizando la prueba xantoproteica las reacciones que dieron

positivas fueron en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos
aromáticos, especialmente en presencia de tirosina. Con la prueba de Biuret
detecto polipeptidos el reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de
proteínas, y varia a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. La
prueba de ninhidrina Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se
encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso.
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos
casos donde no da positiva la prueba de Biuret y da positiva la de ninhidrina,
indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres. La reacción de
Hopkins-Cole, también conocida como reacción de Adamkiewiczs, es una prueba
estándar para el triptófano y para las proteínas que contienen triptófano. Un anillo
entre violeta y rojo en la unión de los dos líquidos indica que la reacción es
positiva.

CONCLUSIONES

 Las proteínas presentan comportamiento especifico frente a distintos

reactivos, dependiendo el tipo de estructura de la proteína, Identificando y
reconociendo aminoácidos y proteínas a través de algunas reacciones
sencillas que producen sustancias coloreadas
 Las pruebas efectuadas en esta práctica pueden servir para determinar la
presencia de proteínas, pero para determinar si es un aminoácido esta
prueba no es la mejor
 BIBLIOGRAFIA

 Manual de prácticas de laboratorio de Bioquímica General.

 http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organi
ca/guia_9_aminoacidos.pdf