1. Prueba o Reacción de Millon.

Se agregaron unas gotas de reactivo de Millon a 1 ml de cada una de las

soluciones a identificar, y se calentó hasta llegar a la ebullición. Posteriormente se
hizo observación para anotar los resultados siguientes.
1.1. ¿Qué tipo de reacción ocurre en esta prueba?
1.2. ¿Cuál es el fundamento teórico de la prueba de Millon?
El fundamento teórico de esta prueba nos muestra que este reactivo consiste
en una solución de nitrato de mercurio (II) (Hg(NO3)2), en solución de ácido
nítrico-nitroso (HNO3/HNO2), siendo esta la reacción que da lugar con la tirosina
ocasionando la mercuración y nitración del grupo fenólico de los aminoácidos, y
todo eso ocurre ya que el anillo fenólico tiene un comportamiento característico
frente a las sales de Mercurio a pH ácido, generando así un coagulo o precipitado
blanco que por calentamiento se torna de color rosado o rojo ladrillo identificando
los restos de tirosina.

1.3. ¿Por qué deben calentarse a ebullición las soluciones?

El calentarse a ebullición es un paso necesario en esta prueba porque algunas
proteínas pueden formar su característico precipitado rojo desde el inicio, pero hay
otras que forman primero un precipitado blanco, y se debe calentar la solución
para poder dar el color rojo indicativo de la presencia de tirosina.
1.4. Plantee el mecanismo de reacción general que ocurre en esta
prueba.

1.5. Investigue los posibles resultados de esta prueba para cada una de
las soluciones que se emplean.
Solución Resultado
Albumina al 2% Positivo
Caseína al 2% Negativo
Tirosina al 2% Positivo
Triptofano al 2% Negativo
Arginina al 2% Negativo
Cistina al 2% Negativo
Metionina al 2% Negativo
Prolina al 2% Negativo
Acido glutámico al 2% Negativo
Acido aspártico al 2% Negativo
Serina al 2% Negativo
Fenilalanina al 2% Negativo
 1.6. Explique el porqué de los resultados negativos de algunas
soluciones en esta prueba.
La prueba de Millon ayuda a identificar únicamente a aminoácidos con anillos
fenólicos, como la tirosina, por lo tanto las soluciones que no cuenten con un anillo
fenólico en su estructura no podrían reaccionar en esta prueba y daría un
resultado negativo.
https://es.scribd.com/document/284438105/Reaccion-de-Millon
http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1020111502/1020111502_023.pdf
2. Prueba o Reacción de Hopkins-Cole.
Se añadieron 3 ml de reactivo de Hopkins-Cole a 1 ml de cada una de las
soluciones en estudio, se procedió a mezclar, se inclinaron los tubos para dejar
caer por sus paredes en los 2 ml de H₂SO4 concentrado, posteriormente se agitó
suavemente y se dejó reposar unos minutos para poder observar y anotar los
resultados a continuación.
2.1. ¿Qué tipo de reacción ocurre en esta prueba?
2.2. ¿Cuál es el fundamento teórico de la prueba de Hopkins-Cole?
Esta prueba es específica para la identificación de triptófano libre o presente en
proteínas. Este reactivo es una disolución de ácido glioxílico en agua, aunque el
ácido acético glacial expuesto a la luz contiene también ácido glioxílico y se puede
emplear en la prueba. Cuando una solución de triptófano o de proteína se trata
con el reactivo de Hopkins-Cole y luego se adiciona ácido sulfúrico, en la zona de
interfase se genera un anillo purpura o rojo violeta resultante de la condensación
del grupo carbonilo del ácido glioxílico y al anillo indol del triptófano.
2.3. Plantee el mecanismo de reacción general que ocurre en esta
prueba.

2.4. Investigue los posibles resultados de esta prueba para cada una de
las soluciones que se emplean.
Solución Resultado
Albumina al 2% Negativo
Caseína al 2% Negativo
Tirosina al 2% Negativo
Triptofano al 2% Positivo
Arginina al 2% Negativo
Cistina al 2% Negativo
Metionina al 2% Negativo
Prolina al 2% Negativo
Acido glutámico al 2% Negativo
Acido aspártico al 2% Negativo
Serina al 2% Negativo
Fenilalanina al 2% Negativo
 2.5. Explique el porqué de los resultados negativos de algunas
soluciones en esta prueba.
Un resultado negativo de esta prueba se da en los casos de las soluciones de
proteínas que no contienen triptófano, debido a que la prueba está hecha para
indicar la presencia de este aminoácido en cualquier solución. Además, el anillo
violeta que indica que la prueba es positiva se da gracias a la condensación del
grupo carbonilo del ácido glioxílico del reactivo junto al anillo indol que se
encuentra presente en la estructura del triptófano.
https://www.redalyc.org/pdf/4435/443543737009.pdf
3. Prueba o Reacción de Sakaguchi.
En varios tubos de ensayo se colocaron 4 gotas de de NaOH 2,5 mol/l y 1 ml
de cada solución a identificar, a cada tubo también se le añadió unas gotas de a-
naftol y 1 ml de la solución de NaClO. Se observó, anotó e interpretaron los
siguientes resultados.
3.1. ¿Qué tipo de reacción ocurre en esta prueba?
3.2. ¿Cuál es el fundamento teórico de la prueba de Sakaguchi?
Es un reactivo utilizado para identificar proteínas y más específicamente al
grupo guanidino presente en la arginina, aminoácido presente en casi todas las
proteínas. El reactivo de Sakaguchi contiene α-naftol disuelto en etanol e
hipoclorito de sodio, en medio alcalino proporcionado por NaOH. La aparición de
un color rojo es indicativa para la reacción positiva y se debe a la presencia del
grupo guanidino.
El desarrollo del color se altera o se previene por completo por la presencia de
amino, histidina o triptófano.
3.3. Plantee el mecanismo de reacción general que ocurre en esta
prueba.

3.4. Investigue los posibles resultados de esta prueba para cada una de
las soluciones que se emplean.
Solución Resultado
Albumina al 2% Negativo
Caseína al 2% Negativo
Tirosina al 2% Negativo
Triptofano al 2% Negativo
Arginina al 2% Positivo
Cistina al 2% Negativo
Metionina al 2% Negativo
Prolina al 2% Negativo
 Acido glutámico al 2% Negativo
Acido aspártico al 2% Negativo
Serina al 2% Negativo
Fenilalanina al 2% Negativo

3.5 Explique el porqué de los resultados negativos de algunas

soluciones en esta prueba.
Este reactivo es usado para poder identificar proteínas, ya que casi todas
contienen al aminoácido arginina, y la reacción positiva es dada por el grupo
guanidina presente en la arginina, por lo tanto si otro aminoácido no contiene este
grupo sería la razón de porqué daría un resultado negativo.
4. Prueba para aminoácidos azufrados.
En varios tubos de ensayo se añadió 1 ml de cada solución en estudio, y 2 ml
de 2 ml de NaOH 2,5 mol/l, se hirvió por un minuto y se procedió a añadir 5 gotas
de acetato de plomo, nuevamente se hirvió por otro minuto y se observó para
anotar los resultados siguientes.
4.1. ¿Qué tipo de reacción ocurre en esta prueba?
4.2. ¿Cuál es el fundamento teórico de esta prueba?
El reconocimiento de aminoácidos azufrados se pone de manifiesto mediante
la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo, esta reacción se
desarrolla en medio básico y en presencia de acetato de plomo, lo cual permite la
formación de sulfuro de plomo
El fundamento de esta reacción lo encontramos en que el acetato de plomo al
10% se puede utilizar para la identificación de aminoácidos azufrados como
Metionina, Cisteína y Cistina, donde el azufre presente en sus estructuras
reacciona para formar precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o
negro en medio alcalino proporcionado por NaOH al 10%. Se debe calentar en
baño de maría a ebullición por 5 min. La formación de un precipitado gris oscuro o
negro es prueba positiva para aminoácidos azufrados.
 En la segunda imagen se puede observar algunos aminoácidos, como cistina y
metionina que en su composición tienen azufre, por lo tanto pueden reaccionar en
esta prueba.
4.3. ¿Por qué es necesario hervir las soluciones?
4.4. Plantee el mecanismo de reacción general que ocurre en esta
prueba.
4.5. Investigue los posibles resultados de esta prueba para cada una de
las soluciones que se emplean.
Solución Resultado
Albumina al 2% Negativo
Caseína al 2% Negativo
Tirosina al 2% Negativo
Triptofano al 2% Negativo
Arginina al 2% Negativo
Cistina al 2% Positivo
Metionina al 2% Positivo
Prolina al 2% Negativo
Acido glutámico al 2% Negativo
Acido aspártico al 2% Negativo
Serina al 2% Negativo
Fenilalanina al 2% Negativo
 4.6. Explique el porqué de los resultados negativos de algunas
soluciones en esta prueba.
Esta prueba está hecha para poder reconocer aminoácidos que cuentan con
azufre en su composición, por lo tanto una solución que tiene aminoácidos sin
presencia de azufre dará un resultado negativo ya que no podrá reaccionar con el
acetato de plomo, quedando así una solución incolora ya que el sulfuro de plomo
con un color gris o negro característico no se formará.
https://prezi.com/nxgacyg61vg8/reconocimiento-de-aminoacidos-azufrados-en-
las-proteinas/?fallback=1