Departamento Académico de Cursos Básicos

Curso: Química General

UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

CARRERA(S): Medicina Veterinaria y Zootecnia

PRÁCTICA DE LABORATORIO

CURSO: Química General

PROFESOR(A): Ruiz Sánchez, Maritza Galine

INFORME DE PRÁCTICA

PRÁCTICA N°: 12
TÍTULO: PROPIEDADES QUÍMICAS AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
INTEGRANTES: Silva Cornejo, Angeles Avril – 10117673@cientifica.edu.pe – 100%
Machaca Mamani, Kelly Milagros – 100107879@cientifica.edu.pe – 100%
Reyes Ramos, Mariam Jireh – 100112083@cientifica.edu.pe – 100%

HORARIO DE PRÁCTICA.
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 08/07/22
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 10/07/22

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Curso: Química General

LIMA, PERÚ 2022

Propiedades químicas aminoácidos y proteínas

1. Objetivos

 Dar a conocer las características más importantes de los aminoácidos y

proteínas
 Reconocimientos de aminoácidos
 Determinación de los grupos R e aminoácidos y proteínas
 Mostrar el carácter anfotericina mediante reacciones químicas

2. Resultados
1. Identificación de α – aminoácidos libres: Reacción de ninhidrina

NINHIDRINA OBSERVACIONES
Α-AMINOACIDO Reacción positiva Azul-morado
ALBUMINA Reacción negativa Incoloro
MUESTRA PROBLEMA Reacción negativa Incoloro

EVALUACION
¿Cómo verificó la presencia de α-aminoácidos libres?
Por la coloración a color azul o morado. Los aminoácidos en soluciones acuosas
y calentado con ninhidrina forman una reacción de color morado o azul. De este
modo, la reacción con el ensayo de ninhidrina dio positivo sólo con la glicina,
identificando que tiene un grupo amino libre en posición α.

¿Por qué la albúmina, no tuvo el mismo comportamiento?

Porque es una proteína, y presenta enlaces peptídicos. En el ensayo con
ninhidrina, sólo se reconoce a los aminoácidos libres, y no a las proteínas como
la albúmina

2. Reconocimiento de R anillos aromáticos: Reacción Xantoproteica

XANTOPROTEICA OBSERVACIONES
TIROSINA Reacción positiva Amarillo-pardo
GLICINA Reacción negativa Incoloro
ALBUMINA Reacción positiva Coágulo amarillo
MUESTRA PROBLEMA Reacción positiva Coágulo amarillo

EVALUACION
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¿De qué manera identificó que el aminoácido y la proteína cuenta con

restos bencénicos?
- En los aminoácidos, por la coloración amarillo-pardo.
- En las proteínas, por la formación de un coágulo amarillo.
- Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con el
ácido nítrico formando derivados de color amarillo, por lo cual la reacción
permite reconocer a aminoácidos como la tirosina; y proteínas como la
albúmina y muestra problema.

¿La albúmina tiene restos bencénicos?

Si, porque la reacción fue positiva, y ello se debe a la presencia de grupos
bencénicos. Donde, el ácido nítrico al entrar en contacto con tales grupos
aromáticos; forma derivados nitrados de color amarillo. Asimismo, desnaturalizan
a la proteína por la presencia de ácido, formándose un coágulo amarillo.

¿A qué conclusión llegó con su muestra problema?

Que es una proteína que presenta restos bencénicos, pues al igual que la
albúmina, también dio positivo en la reacción xantopreteica.

3. Reconocimiento de restos fenólicos: Prueba de Millón

MILLON OBSERVACIONES
TIROSINA Reacción positiva Rosa salmón
GLICINA Reacción positiva Rosa salmón
ALBUMINA Reacción positiva Rosa salmón
MUESTRA PROBLEMA Reacción positiva Rosa salmón

EVALUACION
¿Cómo verificó la presencia de restos fenólicos?
Por el cambio de coloración, donde en proteínas la reacción da un coagulo de
color rosa. Mientras que en los aminoácidos la coloración es rosa-guinda. De
este modo, la reacción reconoce todo tipo de anillo aromático o restos fenólicos
que, a diferencia de la xantorpoteica, la prueba del millón es más general,
reaccionando ante silenos toluenos, etc.

¿Si en la prueba xantoproteica dio positiva la reacción, necesariamente la

misma muestra tiene que dar positiva la prueba de Millón?
Si, porque se identificó la presencia de restos bencénicos, los cuales son parte
de los anillos aromáticos que en la prueba de Millón es positivo.

¿Si una muestra da positiva la prueba de Millón, necesariamente tiene que

dar positiva la prueba xantoproteica?
No, porque la prueba del millo reconoce cualquier anillo aromático, por lo que la
prueba xantoproteica puede dar positivo o negativo, dependiendo si la muestra
tiene restos bencénicos u otro tipo de anillo aromático.
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¿A qué conclusión llegó con su muestra problema?

La muestra problema es una proteína con anillos aromáticos, que, con la prueba
de millón, se formó un sobrenadante el cual se dio por la formación de un
coágulo debido a la desnaturalización.

4. Prueba para aminoácidos azufrados

ACETATO DE PLOMO/NaOH OBSERVACIONES

CISTEINA Colocar 8 gotas de NaOH al Al calentar añadir gota de acetato
ú0% de plomo al 10 % cambia de color
GLICINA Colocar 8 gotas de NaOH al Al calentar añadir gota de acetato
ú0% de plomo al 10 % cambia de color
ALBUMINA Colocar 8 gotas de NaOH al Al calentar añadir gota de acetato
ú0% de plomo al 10 % cambia de color
MUESTRA PROBLEMA Colocar 8 gotas de NaOH al Al calentar añadir gota de acetato
ú0% de plomo al 10 % cambia de color

EVALUACION
¿De qué manera verificó la presencia de restos azufrados en aminoácidos y
proteínas?
La presencia de los restos azufrados en aminoácidos y proteínas se presenció
cambios de color en las reacciones.

¿A qué se debe el color marrón-gris característico de esta prueba?

Por la presencia de aminoácidos y proteínas.

¿A qué se debe el color marrón-gris característico de esta prueba?

También por qué se agrego 8 gotas NaOH al 10%

5. Reconocimiento de enlaces peptídicos: Reacción de Biuret

BIURET OBSERVACIONES
CISTEINA Presenta por lo menos Color violeta
3 unidades de
aminoácidos
GLICINA Presenta menos de 3 Color celeste
unidades de
aminoácidos
ALBUMINA Presenta por lo menos Color violeta
3 unidades de
aminoácidos

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MUESTRA PROBLEMA Presenta por lo menos Color violeta

3 unidades de
aminoácidos

EVALUACION
¿En las pruebas realizadas con el reactivo de Biuret, encontró alguna
diferencia con cada una de las muestras ensayadas? ¿Cómo lo diferenció?
Si, las muestras que contienen por lo menos 3 unidades de aminoácidos cambian
a color violeta y la muestras con menos de 3 aminoácidos unidos con enlaces
peptídicos cambian a celeste

¿Su muestra problema tiene enlaces peptídicos?

La muestra problema presenta enlaces peptídicos ya que se torna de color
violeta

6. Desnaturalización de la Albumin

TEMPERATURA (°C)
ALCOHOL ETILICO
ACIDO CLORHIDRICO c.c:
ACIDO NITRICO c.c:
SOL. CONCENTRADA DE NaOH
Datos OBSERVACIONES
Positivo Cambio de color porque es un
agente desnaturalizante
Negativo No cambia de color
Positivo Cambio de color porque es un
agente desnaturalizante
Positivo Cambio de color porque es un
agente desnaturalizante
Positivo Cambio de color porque es un
agente desnaturalizante

7. Precipitación de proteínas mediante cationes y aniones.

Cu2+ [Fe (CN)6] 3-

20 GOTAS DE AGUA No hubo formación Cambia de color
de precipitado, pero
si cambio de color
20 GOTAS DE SOLUCION DE ALBUMINA Solo se evidencia un Cambia a color amarillo
cambio de color
celeste
20 GOTAS DE AGUA MAS 3 GOTAS DE HCl No hubo formación Presenta una coloración
(10%) de precipitado, pero verdosa
si cambio de color
20 GOTAS DE SOL. ALBÚMINA MAS 3 Cambia a color azul Presenta una coloración
GOTAS DE HCl (10%) verdosa

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20 GOTAS DE AGUA MÁS 3 GOTAS DE Hay precipitación del Hay precipitación del
NaOH (10%) agua agua
20 GOTAS DE SOLUCION DE ALBUMINA Se precipita la Color amarillo con 2
MAS 3 GOTAS DE NaOH (10%) proteína y hay fases
cambio de color

EVALUACION
¿En cuál de los tubos precipitó la proteína con: el Cu 2+?
En el tubo 6

¿En tubo precipitó la proteína con el anión ferricianuro?

En el tubo 3

¿Qué ocurrió en el quinto tubo de ensayo?

Ocurre la precipitación del agua

3. Discusión

 La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las

bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis.
 El grupo responsable es el anillo Aromático que presenta el aminoácido.
 La reacción de millón para determinar la presencia de restos fenólicos
(tirosina).

4. Conclusiones

 La reacción xantoproteica nos indica si el aminoácido presenta anillos

aromáticos y si la reacción es positiva presentan un anillo Aromático en su
estructura. La albúmina y la MP presenta aminoácidos aromáticos.
 La muestra problema (5-p) es una albúmina. La cisteína, es un aminoácido
azufrado, la albúmina y la MP presenta aminoácidos azufrados.
 La desnaturalización de la albúmina se da con agentes desnaturaliza tes
como el calor, HCL, HN03 y Na0H.

5. Cuestionario

1. ¿Con cuál de los reactivos empleados en la práctica se utiliza para verificar

la presencia de α-aminoácidos en una hidrólisis de la proteína?
La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las bandas de
separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es
utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos. Reacciona
con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una
coloración que varía de Celeste a lila intenso. Este producto colorido (llamado
purpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por
la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido. Esta
prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos
casos donde no da positiva la prueba de Biuret, da positiva la de ninhidrina, e
indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres de un pH 4 y 8.
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2. ¿Cuál es el grupo responsable de la reacción positiva con la prueba

xantoproteica?
El grupo responsable es el anillo aromático que presenta el aminoácido.
Característico del triptófano que se precipita a partir de sus disoluciones en
acidosulf4rico al añadir sulfato merc4rico. La fenilalanina, al igual que otros
compuestos también presenta un anillo aromático. La tirosina presenta una
intensa absorción y da lugar a una serie de reacciones coloreadas.

La secuencia de aminoácidos de la seroalbúmina contiene un total de 17 puentes

disulfuro, un tiol libre (Cys 34) y un 4nico triptófano (Trp 214). Debido a la
presencia del triptófano la prueba xantoproteica con la seroalbúmina dar positiva

3. ¿Cómo comprobaría que la albúmina de huevo contiene aminoácidos con

restos fenólicos?
La albumina frente al ensayo de Millon reacciona positivo presentando un
coagulo-rosa a diferencia del ensayo de Millon que reconoce a los restos
fenólicos.

4. ¿Cuál o cuáles de los siguientes aminoácidos dan positiva con el reactivo

de Xantoproteica?
a) Triptófano
b) Tirosina, da positivo
c) Histidina
d) Fenilalanina
e) Metionina
f) Glicina, no da positivo

5. ¿Con qué prueba reconocería, los enlaces peptídicos de una proteína?

Con la prueba de Biuret: El nombre de la reacción procede del compuesto
coloreado formado por la condensación de dos moléculas de urea con eliminación
de amoniaco. Esta reacción está dada por aquellas sustancias cuyas moléculas
contienen dos grupos carbanión (-CO. NH) unidos directamente o a través de un
solo átomo de carbono o nitrógeno. El reactivo de Biuret contiene Cu2SO4 en
solución acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH). La reacción se
basa en la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los

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pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces
peptídicos. Esta última reacción provoca un cambio de coloración: Lila o morado

6. Si se tiene una solución neutra de proteína y se le añade algunos mL de

soda al 10%. Indicar si precipita la proteína al añadir unos mL de:
La precipitación con iones se debe a que algunos cationes de metales pesados y
algunos aniones causan la precipitación de la proteína. Los cationes reaccionan
con las proteínas cuando se encuentran en su forma aniónica o básica dando
sales con los iones carboxilato de proteína. Los aniones formaran sales con las
proteínas cuando estas se encuentren en su forma catiónica o acida. Ahora
tenemos una proteína en un medio neutro y se le añade soda
(NaOH).Entonces el medio de la proteína cambia de neutro a básico.

a) Ferricianuro de potasio: (K4[Fe (CN)6] • 3 H2O) No forma precipitado,

porque el ferricianuro para reaccionar necesita de una proteína en su forma
catiónica o acida.
b) Sulfato de cobre (II): (CuSO4) Si forma hay precipitación de la proteína. Por
el sulfato reacciona con la proteína en su forma aniónica o básica.

7. Explique a qué se debe el fenómeno de la desnaturalización de las

proteínas.
Una proteína se desnaturaliza cuando pierde si estructura secundaria, terciaria o
cuaternaria. La desnaturalización es la desorganización de la forma molecular
completa de una proteína. Esta puede presentarse como un desdoblamiento o
desenrolla miento de las hélices o como separación de subunidades. La
efectividad de un agente desnaturalizante depende del tipo de proteína. La
primera teoría sobre desnaturalización razonable fue denunciada por Wu. En esta
teoría se supuso que la desnaturalización consiste en una reorganización de las
cadenas péptidas en la molécula de la proteína debido a la rotura de ciertos
enlaces débiles, mediante agentes de desnaturalización (calor, detergentes,
disolventes orgánicos, ácidos y bases fuertes, radiación UV, solución de urea,
radiación por microondas, etc.); los enlaces débiles mencionados mantendrían
juntas las cadenas.

8. ¿Por qué el ácido nítrico produce una coloración amarilla cuando se pone
en contacto con un pedazo de cabello o piel?
La queratina es una proteína con estructura helicoidal, muy rica en azufre, que
constituye el componente principal de las capas más externas de la epidermis de
los vertebrados y se encuentra en el cabello. El colágeno es un mol cuál proteica
que forma fibras, las fibras colágenas. Estas se encuentran en todos los
animales pluricelulares. Son secretadas por las células del tejido conjuntivo
como los fibroblastos, así como por otros tipos celulares. Es el componente más
abundante de la piel y de los huesos. El ácido nítrico produce una coloración
amarilla debido a la presencia de aminoácidos aromáticos de la queratina y el
colágeno.

9. ¿Cómo separaría Ud. a los aminoácidos contenidos en una mezcla?

Mediante la electroforesis: Las proteínas son moléculas cuya carga neta depende
del contenido de una serie de aminoácidos (fundamentalmente ácido glutámico,
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ácido aspártico, lisina, arginina e histidina) y del grado de ionización de estos al

pH considerado. La separación depende de la densidad de carga de las
moléculas y, así́, cuanto mayor sea la densidad, mayor será́ la velocidad de
migración en un campo eléctrico hacia el polo que determine su carga neta. La
primera etapa del proceso es la aplicación de la muestra. En papel o acetato de
celulosa, esto se puede efectuar de forma puntual (permite el análisis de varias
muestras simultáneamente en pequeñas cantidades) o longitudinalmente (permite
el estudio de una sola muestra, pero en mayor cantidad). La muestra se aplica
disuelta en el tampón de electroforesis, del que está impregnado el soporte y que
se encuentra en los reservorios de la cubeta, y se deposita en una pequeña zona,
lo más estrecha posible, en el centro o en un extremo del soporte (si se conoce
cuál va a ser la dirección de desplazamiento de esta) y de forma perpendicular a
la dirección del campo eléctrico. Conviene evitar la proximidad de los bordes del
papel, ya que allí́ el campo eléctrico no es homogéneo y se distorsionan las
bandas según avanzan. En los geles de agarosa, se perfora el gel con ayuda de
un troquel o una pipeta de diámetro adecuado y se elimina esa porción por
succión. La perforación puede ser cilíndrica o rectangular, dependiendo del
número y cantidad de muestra a analizar y la muestra se deposita en el orificio
practicado sin que llegue a rebosar. En este caso, el tampón esta embebido en el
soporte (agarosa). La electroforesis termina cuando se haya producido la máxima
separación de los componentes de la muestra, pero sin sobrepasar los límites del
soporte.

10. Aplicación de la reacción con la ninhidrina en la cromatografía. Explique.

Todos los aminoácidos que poseen un grupo amino libre reaccionan y forman
dióxido de carbono, amoníaco y un aldehído que contiene un átomo de carbono
menos que el compuesto original. Esta reacción da lugar a la formación de un
producto color azul o purpura (que posteriormente puede ser utilizado para
cuantificar el aminoácido). En el caso de la prolina, que estructuralmente no
posee el grupo amino libre, sino un grupo amino, la coloración final es amarilla. El
amoníaco, la mayoría de los polipéptidos y las proteínas pueden desarrollar
coloración en esta reacción, pero a diferencia de los aminoácidos, no liberan
CO2. Recuerde que la coloración azulada o violeta será́ proporcional a la
concentración del aminoácido. La reacción entre un aminoácido y la ninhidrina es
la siguiente:

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6. Bibliografía
 Holum, John R. Química Orgánica: Curso breve. Ed. LIMUSA. México. 1997.
 - Cueva, J. León. J y Fukusaki., A. Laboratoriod eQuímica Orgánica. Ed. Juam
Gutemerg Lima Perú- 2008
 Mc Murray, John Química Orgánica. Ed. IBEROAMÉRICA. México. 2007
 Morrison, Robert y Boyd, RQuímica Orgánica. Ed. ADDISON- WESLEY
IBEROAMERICANA. EUA. .2006. 57. Solomons, T.W. Química Orgánica. Ed.
LIMUSA. México. 2000.
 Video: Péptidos y sus enlaces con puente disulfuro
https://youtu.be/FYWOEN_8hic
https://www.youtube.com/watch?v=CMN90zWMfxc
https://www.youtube.com/watch?v=V6TV6aeJQQA
https://www.youtube.com/watch?v=GzGMbw5w4Wo
 Video: Parte experimental – aminoácidos / Proteínas
https://www.youtube.com/watch?v=1p0xrmyKGxs


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