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PRUEBAS GENERALES PARA AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

Nombres E-mail
Chávez Barrera Anyi Sofia Anyisofia1698@unicauca.edu.co
Camayo Camayo Tania Liset tanial@unicauca.edu.co
Bioquímica General, Biología, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la
Educación, Universidad del Cauca
Fecha de realización de la práctica: 06/04/2017
Fecha de entrega de informe: 21/04/2017

1. RESUMEN
Las proteinas son biopolímeros, formados por un gran número de monómeros,
denominados aminoácidos que se encuentran unidos por enlaces peptídicos y además
de contener los grupos funcionales amino y carboxilo, presentan un grupo R situado
sobre el carbono alfa; cada uno de los aminoácidos se caracterizan por las propiedades
fisicoquímicas especificas del grupo R por lo cual se realizan pruebas para reconocer la
presencia de aminoácidos o proteinas en una muestra, utilizando la reacción
xantoproteica, Hopkins-cole y Ehrlich, además de pruebas realizadas con Biuret y
Ninhidrina; observando cambios significativos de color en las muestras, y formación de
un anillo en la prueba de Hopkins-cole, concluyendo que las proteinas tienen diferentes
métodos de identificación según su estructura o composición.

2. RESULTADOS

En las prácticas realizadas se obtuvieron los siguientes resultados, mostrando en cada

una de las reacciones cambios significativos de color; donde se pudo determinar si las
muestras reaccionaban de manera positiva o negativa.

Reacción xantoproteica

Pruebas generales para carbohidratos

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Clara de huevo
Fenilalanina Triptófano Asparagina Leche de soya
Figura 1.

Blanco Gelatina Urea Histidina Glicina

Figura 2.

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 Prueba de Biuret

Clara de huevo Fenilalanina Triptofano Asparagina Leche de soya

Figura 3. Figura 4.

Glicina Histidina Urea Gelatina Blanco

Figura 5.

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 Prueba con Ninhidrina

Triptofano Asparagina
Figura 6. Figura 7.

Clara de huevo Gelatina Soya Blanco

Figura 8. Figura 9.

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 Reacción de Hopkins-cole

Fenilalanina Triptófano Soya Clara de huevo

Figura 10.
 Reacción de Ehrlich

Figura 11.
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3. ANALISIS DE RESULTADOS
Las proteinas son las moléculas orgánicas más abundantes en las células, son
componentes esenciales en los seres vivos y llevan a cabo una diversidad de funciones
como la regulación metabólica, el transporte, la defensa y la catálisis. Las proteinas se
encuentran formadas por un gran número de monómeros conocidos como aminoácidos,
los cuales se unen mediante enlaces peptídicos que se forman por la condensación del
α-COOH de un aminoácido y el α-NH2 de otro, la formula básica de los aminoácidos es
la misma para todos lo α- aminoácidos diferenciándose por la naturaleza y el tamaño
del grupo R. Para reconocer la presencia de aminoácidos o proteinas se realizó
pruebas generales de identificación en diferentes muestras, llevando acabo la reacción
xantoproteica, Hopkins-cole y Ehrlich, además de realizar la prueba de Biuret y
Ninhidrina.
La reacción xantoproteica se efectuó para diez muestras diferentes: clara de huevo,
leche de soya, asparagina, triptófano, fenilalanina, glicina, histidina, urea, gelatina y
muestra en blanco, agregándole a cada una 0,5 mL de HNO3, las cuales se calentaron
a baño maría y luego de enfriar cada muestras se le añadió 2 gotas de solución de
NaOH, los resultados obtenidos muestran cambios de color en dos soluciones, entre
ellas el triptófano tomando una coloración amarilla y la fenilalanina un color anaranjado
(figura 1), señalando un resultado positivo para ambas muestras, debido a que estos
aminoácidos presentan grupos aromáticos a diferencia de las 8 muestras restantes.
En la prueba de Biuret, realizada para la identificación de enlaces peptídicos se utilizó
las muestras anteriormente mencionadas agregándole a cada una 0.5 mL de NaOH y
una gota de CuSO4 al 5% observando un cambio de color en algunas soluciones
especialmente en la leche de soya, la clara de huevo, la histidina y la gelatina
compuestos que presentan dos o más enlaces peptídicos, además de la presencia de
proteinas tomando entonces una coloración morada (figura 4-5), dando un resultado
positivo solo para 4 de las 10 muestras utilizadas. Sin embargo la prueba no es
absolutamente específica para los enlaces peptídicos, ya que cualquier compuesto que
contenga dos grupos carbonilos unidos por un átomo de nitrógeno o de carbono da un
resultado positivo.2 En cuanto a la prueba de Ninhidrina, empleada básicamente para la
identificación de α-L-aminoácidos, se obtuvo diversos resultados presentando en las

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muestras colores como morado para el triptófano (figura 6), leche de soya, clara de
huevo y gelatina (figura 8); rojizo para la fenilalanina; y un color café para la glicina,
histidina y asparagina (figura 7), sin embargo para la urea la reacción produjo un
resultado incoloro. En esta reacción intervienen dos moléculas de Ninhidrina por cada
molécula de aminoácido, produciendo el color purpura independientemente de la
estructura del aminoácido original, pues la cadena lateral de los aminoácidos se pierde
en forma de aldehído; por lo cual esta prueba es positiva para todos los grupos libres,
ya sea en aminoácidos, péptidos o proteínas, es importante mencionar que en aquellos
casos en donde no da positiva la prueba de Biuret pero si positiva la prueba de
Ninhidrina, indicaría que no hay proteinas, pero si aminoácidos libres.
La prueba de Hopkins- cole es utilizada, para identificar el triptófano y las proteínas que
lo contienen. La positividad se reconoce por la aparición de un anillo color violeta-rojizo,
este anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-aminoácidos libres o
haciendo parte de péptidos y proteínas se puede reconocer mediante la reacción con el
ácido glioxílico a pH ácido, puesto que forma complejos de coloración violeta o amarillo
violeta, permitiendo así identificar al triptófano. La formación del anillo en las muestras
utilizadas, se produjo solamente en la clara de huevo, en la leche de soya y en el
triptófano; indicando así la presencia de este aminoácido, el cual es esencial en la dieta
del ser humano; ya que al ser absorbido por el cuerpo, este lo cambia para convertirse,
en una hormona llamada serotonina, encargada de transmitir señales entre las células
nerviosas. (Figura 10).
La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los
aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de
Sodio por formación de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así
detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando péptidos y proteínas3.
Con respecto a esto; en reacción de Ehrlich utilizando clara de huevo, histidina, urea y
leche de soya se observó una coloración mucho más fuerte, contrario a las demás
muestras donde se obtuvo un color amarillo claro; infiriendo así la presencia de histidina
y tirosina (aminoacidos esenciales y no esenciales respectivamente, muy importantes
para el organismo) en las soluciones de coloraciones fuertes.

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4. CONCLUSIONES
 Los aminoácidos son moléculas orgánicas importantes y componentes
esenciales en los seres vivos, compuestas por cadenas de aminoácidos los
cuales presentan un grupo R diferenciándolos unos de otros, de acuerdo con la
composición y estructura de las proteinas.
 La tirosina es un aminoácido no esenciales; sin embargo uno de los precursores
de su síntesis es otro aminoácidos esencial llamado fenilalanina, el cual como
debe ser aportado por la dieta se pude encontrar en alimentos como lácteos,
carnes y pescados, así mismo, también se encuentra en la clara de huevo y en
la leche de soya por lo que la reacción de Ehrlich es positiva para estas
sustancias.
 La histidina un aminoácido considerado esencial, el cual es necesario obtenerlo
a partir de los alimentos, que pueden ser de origen animal (leche y derivados
lácteos, huevos, carnes y pescado) o bien sea de origen vegetal (cereales,
verduras y hortalizas, semillas y frutos secos); nos comprueba los resultados
obtenidos en la prueba de Ehrlich para la clara de huevo, la histidina, la leche de
soya y la urea ya que estos tendrán presente en su composición la histidina.
 En las pruebas de aminoácidos y proteinas realizadas para diferentes muestras
se obtiene resultados significativos, en donde la mayoría de las proteinas que
presentan un resultado positivo, muestran un cambio de coloración
representativo pudiendo identificar visiblemente los cambios que produce dicha
reacción.

5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
5.1 ¿Cuál es la reacción entre un α-aminoácido y la Ninhidrina?

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En reacción de Ninhidrina, empleada básicamente para la identificación de α-L-

aminoácidos, intervienen dos moléculas de Ninhidrina por cada molécula de
aminoácido, en donde se produce un color purpura independientemente de la estructura
del aminoácido original, pues la cadena lateral de los aminoácidos se pierde en forma
de aldehído; por lo cual esta prueba es positiva para todos los grupos libres, ya sea en
aminoácidos, péptidos o proteínas.

5.2 ¿Cuál es la reacción con el reactivo de Biuret?

En la reacción de Biuret el sulfato alcalino reacciona con compuestos que contienen
dos o más enlaces peptídicos dando un complejo de coloración violeta. La intensidad
del color obtenido es un medida del número de enlaces peptídicos presentes en la
proteína.2 Esto se puede evidenciar en la práctica realizada, donde 4 de las 10
muestras presentaron un color violeta o morado, aunque unas con más intensidad que
otras, por ejemplo la clara de huevo presenta por lo menos dos o más enlaces
peptídicos, en la cual se puede observar un color violeta bastante intenso. (Figura 3)

5.3 ¿Qué proteinas dan positiva la prueba de Hopkins-cole?

Las proteínas que dan positivo para la prueba de Hopkins-cole es el triptófano con un
anillo muy característico, leche de soya con un color amarillento transparente, grumos y
con poca formación del anillo y la clara de huevo con un color blanquecino
transparente, al igual que la leche de soya presento grumos y con poca formación del
anillo.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
(1). Lehninger, A.L. En BIOQUÍMICA las bases moleculares de la estructura y funcion
celular. Ed Omega S.A, Segunda edición, Barcelon, 1982.
(2).Plummer, D.T. en Bioquímica práctica. Ed. Graw-Hill Latinoamericana, segunda

edición, Bogotá, 1981.

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(3). Ensayo para reconocimento de aminoácidos. Disponible en:

http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_9

_aminoacidos.pdf , fecha de visita: 15/04/2017

(4). Aminoácidos. Disponible en: https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-

mol/pdfs/26aminoacidos.pdf, fecha de visita: 15/04/2017

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