4.

METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO
Principio del método:
El método utilizado es el volumétrico; la muestra es digerida con H 2SO4
concentrado, destruyendo toda la materia orgánica, según el método de Kjeldhal,
utilizando CuSO4 como catalizador,
y luego se destila el nitrógeno bajo
la forma de amoniaco por arrastre
de vapor, previa neutralización con
NaOH.
El amoniaco es recibido en una
solución de H2SO4 estandarizada y
se titula finalmente el ácido en
exceso con solución estándar de
NaOH.
MATERIALES
 Balones de kjeldhal
 Tubos de ensayo
 Tubos de digestión
 Gradilla
 Pipetas
 Peras
 Matraz Erlenmeyer
 Vaso precipitado
 Bureta
 Espátula
 Soporte universal
 Pinzas
EQUIPOS
 Balanza analítica
 Micro digestor de Kjeldhal
 Destilador de Kjeldhal
 Scrubber
REACTIVOS
 Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4)
 Ácido sulfúrico (H2SO4 ≃ 0.1N)
 Sulfato de cobre (CuSO4)
 Sulfato de sodio (Na2SO4)
 Agua destilada (H2O)
 Hidróxido de sodio al 45% (NaOH)
 Hidróxido de sodio (NaOH ≃ 0.1N)
 Indicador: Rojo de metilo
MUESTRA
 Coco fresco
DESARROLLO EXPERIMENTAL
Por el método micro kjeldahl, que pasa por tres
etapas:
Digestión:
 Pesar aproximadamente 0.4 g de muestra en un papel, está ya previamente
molida y homogeneizada.
 Trasvasar la muestra a un tubo de digestión.
 Agregar 5 g de una mezcla de catalizador compuesta por Na 2SO4 y CuSO4.
 Añadir 10 ml de H2SO4 concentrado.
 Paralelamente realizar el análisis de un blanco.
 Digerir la muestra en el Micro digestor de Kjeldhal, inicialmente a
temperatura baja y luego a temperatura alta, se la realiza así para que al
hervir la muestra no salpique.
 Cuando la solución de los tubos este de color verde o celeste hay que parar
la digestión que dura aproximadamente de 3-4 horas.
 Reacción:
Proteína + H2SO4 K2SO4:CuSO4 CO2(g) + (NH4)2SO4(ag) + SO2 + H2O(l)

Destilación:
 Enfriar los tubos y enjuagar las paredes salpicadas con agua destilada.
 Colocar los tubos en el destilador.
 Programar la destilación en 7 minutos.
 Recibir el destilado en matraz Erlenmeyer que contiene 5 ml de
H2SO4≃0.1N.
 Reacción:
(NH4)2SO4 + 2 NaOH 2 NH3 + 2 H2O + Na2SO4
2 NH4OH + H2SO4 (NH4)2SO4 + 2 H2O
Titulación:
 Titular los destilados con NaOH ≃ 0.1N en la bureta.
 Utilizar como indicador el rojo de metilo aproximadamente 5 gotas, esta
añadir al matraz Erlenmeyer que contiene el ácido que en exceso de la
destilación.
 Titular hasta viraje amarillo.
 Medir el volumen gastado de NaOH para realizar los cálculos necesarios.
 Reacción:
H2SO4 + NaOH Na2SO4 + H2O