METODOS VOLUMETRICOS INDIRECTOS

METODO DE KJELDAHL

Frecuentemente se acude a métodos volumétricos indirectos cuando la determinación cuantitativa de algunas especies
no se puede lograr utilizando directamente una solución patrón para ello o porque es más sencillo dejar que una sustancia
reaccione con una cantidad medida de un reactivo dado y valorar a continuación el exceso del mismo con una solución
patrón, que constituye una Retrovaloración.

Precisamente una de las aplicaciones de más importancia de este tipo de mediciones es la determinación de proteínas,
por lo exacto y confiable.

En 1883 el investigador danés Johann Kjeldahl desarrolló el proceso básico del conocido método actual de análisis de

proteínas por el método Kjeldahl, más propiamente, para analizar nitrógeno orgánico.

Este método se basa en la determinación de nitrógeno y se aplica a gran variedad de compuestos orgánicos, como son
cárnicos, leche en polvo y derivados, cereales secos, harinas y alimentos en general de origen animal y vegetal. Así
mismo se aplica para determinación del nitrógeno en fertilizantes y otros productos que lo contienen.

En esta técnica se digieren las proteínas y otros componentes orgánicos de los alimentos en una mezcla con ácido
sulfúrico en presencia de catalizadores. El nitrógeno se descompone con la formación de amoniaco, el cual se fija en el
H2SO4 en forma de ion amonio [ NH4]2HSO4. En esta etapa, llamada DIGESTIÓN se produce la oxidación de la materia
orgánica en CO2 y H2O, reduciéndose el H2SO4 a SO2

La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente en una solución de ácido Clorhídrico o de
Acido Sulfúrico. El exceso de Acido se titula con Hidróxido de Sodio estándar.

Este método ha sufrido varias modificaciones. Así, Kjeldahl usó originalmente permanganato de potasio para llevar a cabo

el proceso de oxidación, sin embargo, los resultados no fueron satisfactorios, de manera que este reactivo se descartó.

Una Ilustración del proceso nos lo brinda la expresión:

DIGESTIÓN:

C, H, N orgánico catalizador CO2 + H2O + NH+4

H2SO4 hirviendo

Para acelerar el proceso de digestión con H2SO4 se han propuesto distintas modificaciones. Los catalizadores propuestos
son mercurio, cobre selenio o combinaciones de estos

En la modificación de Gunning no se utilizan catalizadores, sino que se agrega sulfato de sodio o de potasio, para
aumentar el punto de ebullición del H2SO4 (338°C) y así aumentar la temperatura de digestión. En el caso que se usen
como catalizadores mercurio y cobre, deben precipitarse.

El abundante desprendimiento de SO2 y SO3 durante la Digestión exige realizar esta operación en cabina de extracción. La
Digestión se realiza hasta que la masa reaccionante sea completamente incolora o ligeramente amarilla y que no
contenga partículas en suspensión

NEUTRALIZACION Y DESTILACION:
El SO2 que se forma en la digestión es un reductor fuerte capaz de reducir al nitrógeno en su mínimo estado de oxidación
(-3).

Después de terminada la digestión y el nitrógeno se halle reducido a NH+4, entonces se hace básica la solución con la
adición de NaOH al 35%, con lo que se libera el amoniaco (NH3) gaseoso:

(NH4)HSO4 + 2 NaOH ═ 2NH3 + Na2SO4+ 2H2O

El amoniaco (NH3) se destila hasta que haya pasado unas 2/3 partes del volumen de solución, lo cual asegura la
volatilización completa del amoniaco.

Para evitar la proyección del liquido se añaden trocitos de plato poroso o perlas de vidrio y para impedir el arrastre de
gotas alcalinas al refrigerante se emplea un trampa de vapor (alargadera de Kjeldahl) adecuada.

El extremo inferior del refrigerante se introduce en un erlenmeyer conteniendo acido clorhídrico o acido sulfúrico, medidos
exactamente con una pipeta aforada. El terminal inferior debe quedar muy por debajo de la superficie del acido receptor,
en el cual burbujeara el amoniaco y antes de llegar a la superficie del acido reaccionara en su integridad:

NH3 + HCl NH4Cl ó NH3 +H2SO4 →NH4HSO4

Terminadas las destilación y colección del NH3 en el acido del erlenmeyer receptor, no debe retirarse la fuente de
calentamiento sin antes haber retirado el erlenmeyer con su contenido a fin de evitar que se produzca un vacio y
absorción del contenido del receptor, lo cual podría causar la explosión del mismo.

TITULACION:

Finalmente el acido que no reacciono con el NH3 se titula con solución valorada de NaOH usando un indicador de
transición acida para que permita la titulación del HCl sin que comience la del NH+4 . El verde de bromocresol (intervalo de
transición de 3.8 a 5.4) y el rojo de metilo (4.8 a 6.0) satisfacen esta necesidad.

Las bases orgánicas nitrogenadas (aminas primarias, secundarias y terciarias RNH2, R2NH, R3N) se pueden considerar
como compuestos en que el nitrógeno está ya en su estado inferior de oxidación, por lo que, generalmente, en estos
compuestos, el N pasa a NH+4 con facilidad en el proceso de digestión.

Los azocompuestos RN=NR y la hidracina H2N – NH2, requieren un tratamiento preliminar antes de la digestión, que
consiste en su reducción con formaldehido, cloruro estannoso o zinc metálico y HCl.

Los nitratos inorgánicos se convierten en NH3 mediante calentamiento de la muestra con H2SO4 y utilizando el catalizador
de Wardá (Al, Cu, Zn). El NH3 se destila y se prosigue el análisis. Naturalmente no es preciso digerirse sales amoniacales;
puede comenzarse directamente su determinación por la etapa de destilación.

A continuación se ilustra el montaje de un moderno y automatico equipo de Kjeldahl y un equipo sencillo tradicional:

Unidad Moderna de Digestion Unidad Moderna de Neutralizacion y Destilacion