INFORME DE PRÁCTICA

RECUPERACION, EVALUACION Y MANIPULACION DE LOS

OVOCITOS

I. INTRODUCCION:
las hembras bovinas adultas pueden tener patrones de 2 a 3 ondas foliculares
por ciclo estral. La primera onda folicular ocurre el dia(0) de la evolución, la
segunda ocurre el dia 9 o 10 con dos ondas y el 8 o 9 para ciclo de 3 ondas , y la
tercera onda ocurre en el dia 15 o 16.

La maduración del ovocito es un fenómeno complejo durante el cual el ovocito

avanza del diploteno profase I a metafase II (maduración nuclear). La
transición del estado de diploteno a la metafase es denominado “diacinesis”.

La maduración del ovocito también involucra transformaciones a nivel del

citoplasma que prepara a la célula para soportar la fecundación y el desarrollo
embrionario temprano (maduración citoplasmática). Los procesos involucrados
en la maduración ovocitaria nuclear y citoplasmática, es la clave para
desarrollar programas de producción in vitro de embriones.

II. OBJETIVOS:
 Capacitar al alumno en la obtención de ovocitos de ovarios de matadero
 Determinar la calidad de ovocitos en el proceso de fecundación in vitro.

III. MATERIALES:
- Guantes quirurgicos
- Ovarios (vaca y cerdo)
- Solución fisiológica
- Jeringa de 5ml y agujas de 18x1
- 1 Vaso precipitado
- Placas Petri
- Pipeta pasteur
IV. METODOS:
Los ovarios obtenidos del matadero son trasladados en un recipiente
isotérmico al laboratorio. El tiempo trascurrido entre el sacrificio del animal y la
llegada al laboratorio debe ser menos de 6 a 8 horas.

Una vez que están en el laboratorio los ovarios serán lavados 2 a 3 veces con la
solución fisiológica de 0,9 % de Nacl a 35 c° y conservados en la misma
solución.
Cada alumno deberá colocarse los guantes quirúrgicos con la cual sujetara el
ovario secándola previamente con papel tolla, y con la otra mano libre sujetara
la jeringa y procederá a aspirar el contenido de los folículos (los cocs complejo
ovocito-cumulos), el contenido folicular colectado con la jeringa será vertida en
la placa Petri y diluida con solución fisiológica, con el fin d visualizarlos bajo un
estereoscopio entre 20 y 40x.

V. REVISION BIBLIOGRÁFICA:
Según loos y col en 1989 la morfología de los ovocitos se
clasifica en 4 categorias:
1. Rodeado por 3 capas de célula del cumulus con citoplasma homogéneo,
eventualmente granulado.
2. Ovocitos rodeados con 3 capas de célula del cumulus y citoplasma
generealmente homogéneo.
3. ovocitos denudados y citoplasma con apariencia irregular con zonas oscuras.
4. ovocitos con cumulus expandido y/o citoplasma irregular.

Foliculogénesis y ovogénesis:
Foliculogénesis.- es el proceso de crecimiento que experimenta el folículo
desde el momento que deja la población de reserva, constituida por folículos
primordiales hasta su ovulación o atresia.
Los folículos se clasifican en:

a) Folículos primordiales:
En el bovino son activados aproximadamente al día 140 de la
gestación. Los ovocitos tienen un tamaño de 30 um y esta
rodeado de células de la granulosa cuboidales Los ovocitos de
folículos primordiales y primarios no se observan diferencias de
tamaño.
 b) Folículos preantrales (folículos primarios y secundarios)
Aparecen al día 210 de gestación en la bovino, cuando las células
foliculares están en plena división mitótica. Los folículos secundarios
contienen aproximadamente 2 capas de células y el ovocito mide entre 50
a 60 um de diámetro.

c) Foliculos antrales y preovulatorios.

Los folículos terciarios o antrales son caracterizados por la presencia de
cavidad conocida como antro. El antro es una cavidad llena de fluido
folicular. El antro es detectado cuando el folículo tiene entre 0,12 y
0,28mm.

Los primeros folículos antrales aparecen alrededor de día 230 de gestación en el

bovino, estos presentan una extenso número de células que se unen por uniones
gap para transferir nutrientes y señales de regulación en el ovocito y la célula de la
granulosa.

Desde el punto de vista biológico, el establecimiento de la fecundación in vitro es

una alternativa valiosa para la investigación de los mecanismos celulares y
moleculares involucrados en las interacciones gaméticas, fecundación y desarrollo
embrionario temprano.

Es bien conocido que los cigotos pueden ser co-cultivados in vitro con células
oviductales o en el medio previamente condicionado por estas células
desarrollando hasta un 30% a blastocistos, no obstante, la capacidad de
implantación de los mismos es variable luego de la transferencia en vacas
receptoras.

VI. RESULTADOS:
En el camal de la cuidad de yurimaguas fuimos a sacar ovarios de vaca y cerdo,
luego llevamos al laboratorio de la UNAAA donde se realizó la práctica.
 El ovario de la vaca tiene forma redonda y de la cerda la forma de uvas
maseteado.
El primer paso es lavar con suero fisiológico para que salga toda la sangre,
luego secarlo con papel.
Segundo paso sustraer el líquido folicular, una vez sustraído se le pone en la
placa Petri y se le añade tres gotas de suero, y pasa al estereoscopio y se pudo
ver un ovocito de la vaca.
 Para hacer la fertilización de en vitro se hace de 6 a 8 horas.

VII. CONCLUCIONES:
en esta práctica aprendí a como manipular los ovarios y a
extraer el líquido del folículo para luego observar en el
estereoscopio y así conocí los ovocitos de vaca y cerda.

VIII. BIBLIOGRAFIA:
tarwi.lamolina.edu.pe/~emellisho/Reproduccion.../Practica%202-eval-ovocitos.pdf
https://encolombia.com/veterinaria/publi/acovez/ac241/acovez24_recoleccion4/

IX. CUESTIONARIO:

Desarrollar los siguientes ítems.

a) Sistemas de clasificación de ovocitos:

Rpta: se clasifica en foliculogenesis y ovogenesis.

 Foliculo primordiales
 Foliculo preantrales(primario y secundario)
 Foliculo antrales y preovulatorios (primario, secundario, terciario)

b)Reanudación de la meiosis

Rpta:A mediada por su unión a los receptores presentes en las

células del cúmulus, pues al madurar ovocitos denudados en presencia o
ausenciade EGF,no se observaron diferencias en los porcentajes de reanudación
de la meiosis ni en la formación de PNM.
c) Crecimiento folicular en hembras prepuberes y gestantes

se describe en animales postpuberales, emerge simultáneamente un grupo de

pequeños folículos en crecimiento, seguido por el mayor crecimiento de un
folículo dominante (fase de crecimiento) y regresión de los subordinados; el
folículo dominante se mantiene durante una fase estática en su mayor tamaño,
para luego entrar en atresia y producirse la emergencia de una nueva onda
folicular.

d)Diferencias entre folículo primario, secundario y terciario

 Primario.-Esta rodeado de células de la granulosa cuboidales y

no se observan diferencias de tamaño.
 Secundario.-las células foliculares están en plena división mitótica y
contienen dos capas de célula.
 Terciario.-Se caracterizan por la presencia de cavidad conocida como
antro. El antro es una cavidad llena de fluido folicular

IX.-ANEXO