UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALURGIA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

ASIGNATURA: ANÁLISIS INSTRUMENTAL QU-342

PRÁCTICA DE LABORATORIO N°1

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ÁCIDO CARMÍNICO

EN MUESTRAS DE “COCHINILLA” (Dactylopius coccus Costa)

I. OBJETIVOS

 Determinar el contenido de ácido carmínico en muestras de “cochinilla” y carmín por

espectrofotometría
 Conocer el funcionamiento, manejo y mantenimiento del espectrofotómetro.

Figura 1. Insectos “Cochinilla” (Dactylopius coccus Costa)

Ácido Carmínico1

El ácido carmínico se obtiene de la cochinilla por extracción acuosa. De la solución

acuosa, el ácido carmínico es precipitado como un complejo metálico. El complejo es
separado y dispersado en agua o alcohol y luego tratado para liberar el ácido carmínico,
y posteriormente filtrar y concentrar para la cristalización del ácido carmínico. Para la
cristalización del ácido carmínico se tienen los métodos de: Schútzemberger, de
Schunck-Marchlewski, el Japonés, de Gibaja-Montes y el de Forgios-1
1:
Gibaja, Segundo, 1998, Pigmentos Naturales (Quinónicos), Universidad Nacional Mayor de San Marcos,
Fondo Editorial, Perú.
 Figura 2. Estructura química del ácido carmínico

Carmin de “cochinilla”

Es la laca alumínica-cálcica del ácido carmínico complejado con proteína de color rojo,
que se prepara tratando el extracto acuoso de la cochinilla con sales de aluminio y calcio.

El ácido carmínico como sustancia pura es cristalino, de color rojo brillante fuertemente
estable a la luz, calor y oxidación.
El ácido carmínico forma fácilmente complejos con metales hidrolizables (calcio y
aluminio) a la que se denomina carmin

Figura 3. Morfología ventral de la “cochinilla” hembra adulta

1. Boca 2. Antenna 3. Pico o próbosis

4. Patas 5. Canales o poros de respiración 6. Poros de respiración
7. Huevecillos 8. Segmentos abdominals 9. Poro genital
 Cochinilla
(insecto deshidratado)
↓
Selección y Clasificación
↓
Molienda
↓
Solvente ─► Extracción
(grasas y ceras)
↓
Extracción
(de colorante)
↓
Complejante ─► Formación del Complejo
Colorante
↓
Separación del Colorante
↓
Lavado
↓
Secado
↓
Molienda
↓
Envasado

Figura 4. Diagrama genérico para obtención de carmín de “cochinilla”

II. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. PROCEDIMIENTO INSTRUMENTAL DEL ESPECTROFOTÓMETRO

 Conectar el instrumento a la línea de tensión de 220 V, encender y dejar estabilizar

por 15 minutos, aproximadamente.
 Seleccionar el modo de medición a realizar (absorbancia)
 Seleccionar y ajustar el valor de la longitud de onda a 495 nm.
 Calibrar el equipo con una solución “blanco” o “referencia” (diluir 0,75 mL de solución
de HCl 2N a 25 mL) colocando en una cubeta de cuarzo y ajustar la absorbancia a
cero (0).

2. DETERMINACIÓN DE ÁCIDO CARMÍNICO EN MUESTRA DE COCHINILLA

PRINCIPIO

El método analítico está basado en la comparación de los valores de absorbancia de la

muestra con la absorbancia de un estándar de ácido carmínico de concentración
conocida y determinada a las mismas condiciones de operación (longitud de onda,
recorrido óptico y otros factores).
 PROCEDIMIENTO

 Pesar 0,05 g de muestra de insecto “cochinilla” deshidratada y reducida en tamaño

(molida) y colocar en un vaso de precipitado de 100 mL y agregar 15 mL de solución de
HCl 2N.
 Cubrir (tapar) el vaso de precipitado con una luna de reloj y llevar a ebullición por
aproximadamente 15 minutos, hasta que la extracción se haya completado. Enfriar la
mezcla hasta temperatura ambiente.
 Trasvasar la mezcla resultante a una fiola de 500 mL y enrazar con agua destilada y
homogenizar.
 Filtrar con papel de porosidad fina y eliminar los primeros 100 mL del filtrado.
 Separar dos fracciones de aproximadamente 30 mL del filtrado y destinar para la
determinación de la absorbancia.
 Leer la absorbancia de cada fracción de filtrado a 495 nm de longitud de onda, en una
celda de cuarzo de 1 cm de ancho (recorrido óptico).
 Retirar la celda, lavar con cuidado y secar.

III. CÁLCULOS

C(m) = C(e) x [A(m)/A(e)]

Donde:

C(m): Concentración de ácido carmínico en la muestra utilizada

C(e): Concentración de ácido carmínico estándar: 100 ppm
A(m): Absorbancia de la muestra
A(e): Absorbancia de la solución de ácido carmínico estándar: 1,39 a 495 nm de
longitud de onda.

Porcentaje de ácido carmínico = (mAC /mm) x 100

mAC: Masa de ácido carmínico estándar utilizada, (gramos)

mm: Masa de ácido carmínico en la muestra utilizada, (gramos)

¿CÁLCULAR EL PORCENTAJE DE ÁCIDO CARMÍNICO EN LAS FRACCIONES DE

FILTRADO DE LA SOLUCIÓN PROBLEMA Y OBTENER EL PROMEDIO?

Se pesó 0,1 gramo de muestra de insecto “cochinilla” deshidratada y reducida en tamaño

(molida) y se colocó en un frasco Erlenmeyer de 100 mL de capacidad, al cual se añadió 15 mL
de solución de HCl 2N.

Se cubrió el frasco Erlenmeyer con una luna de reloj y se sometió a ebullición por
aproximadamente 20 minutos, hasta que la extracción se haya completado. Se dejó enfriar la
mezcla hasta temperatura ambiente.

Luego, la mezcla resultante se trasvasó a una fiola de 1000 mL de capacidad, se enrazó con
agua destilada y se homogenizó. Se filtró con papel de porosidad fina y eliminaron los primeros
100 mL de filtrado.
Se separaron tres fracciones de filtrado de aproximadamente 30 mL y se destinaron para la
medición de la absorbancia.

La lectura de absorbancia para cada fracción de filtrado se efectuó a 495 nm de longitud de

onda, en una celda de cuarzo de 1 cm de recorrido óptico (ancho de la celda).

CÁLCULOS

Datos:

Absorbancia del estándar (As) = 1,39

Concentración de Ácido carmínico en el estándar (Cs) = 100 ppm
Longitud de onda (ƛ) = 495 nm
Masa de muestra de cochinilla (mi) = 0,1 gramo
V = 1L (muestra digerida y diluida a 1L con agua destilada)
Lectura de absorbancia de las tres porciones de filtrado:

A1 = 0,262
A2 = 0,259
A3 = 0,268

Valor promedio de absorbancia = 0,263

Ley de Beer: A = abc

As = abCs → ab = As/Cs (1)

Am = abCm → ab = Am/Cm (2)

Igualando (1) y (2):

𝐴𝑠 𝐴𝑚 𝐴𝑚 𝑚𝑔 0,263 𝑚𝑔
= → 𝐶𝑚 = 𝐶𝑠 × = 100 × = 18,921
𝐶𝑠 𝐶𝑚 𝐴𝑠 𝐿 1,39 𝐿

Porcentaje, [% P]:

𝟏𝟖, 𝟗𝟐𝟏 𝒎𝒈
𝒎𝑨𝑪 = × 𝟏𝑳 = 𝟏𝟖, 𝟗𝟐𝟏 𝒎𝒈
𝐋

𝒎𝑨𝑪 𝟎, 𝟎𝟏𝟖𝟗𝟐𝟏𝒈
%𝑷 = × 𝟏𝟎𝟎 = × 𝟏𝟎𝟎 = 𝟏𝟖. 𝟗𝟐
𝒎𝒊 𝟎, 𝟏𝒈
 CUESTIONARIO 1

1. Formular la estructura molecular del ácido carmínico y del carmín. Mencionar sus
aplicaciones industriales

2. Señalar las propiedades físicas y químicas del ácido carmínico.

3. ¿Qué ventajas y desventajas presenta el método de análisis utilizado? Justifique su

respuesta.

4. ¿Qué otros métodos de análisis, conoce, para cuantificar el ácido carmínico en

muestras de “cochinilla”? Detalle los procedimientos y fundamentos.

5. Si una muestra de 0.120 gramos de “cochinilla” pulverizada fue sometida a

digestión con 30 mL de solución de HCl 2N, y la mezcla digerida se trasladó a una
fiola de 500 mL de capacidad y luego se enrasó con agua destilada. La lectura de la
absorbancia medida a la longitud de onda de 495 nm fue de 0.344. ¿Calcular el
porcentaje de ácido carmínico en la muestra de “cochinilla”?
Considere la absorbancia de la solución de ácido carmínico de 100% de pureza
(estándar) igual a 1.39 a la longitud de onda de 495 nm.

6. Describir el proceso de obtención de carmín expuesto en el diagrama.

Figura 5. Diagrama de flujo del proceso de obtención de carmín

Ing°. Jorge García Blásquez M.

Ing°Tarcila Alcarraz Alfaro
2021