Unidad 3:

Estequiometría del crecimiento microbiano y

formación de productos
En el biorreactor se produce la conversión de los
sustratos para obtener biomasa y productos de
interés industrial

Sustratos Biorreactor o
fermentador

✓ Biomasa

✓ Productos
A pesar de que existen miles de reacciones intracelulares, el
crecimiento microbiano puede describirse como si fuera una
reacción química común.
En una reacción química común se tienen sustratos y productos:

Ej. aA +bB → c C + d D + calor

Sustratos Productos

En dicha reacción se debe estudiar: Estequiometría

(cuanto vale a, b, c. d)
El estudio de la “estequiometría del crecimiento microbiano”
permitirá:

1. Formular adecuadamente un medio de cultivo.

2. Calcular rendimientos.

3. Realizar balances de materia y energía.

Permitirá determinar:
▪ Que cantidad de sustrato se necesita para producir x
gramos de biomasa (o de algún producto).
▪ Cuanto oxígeno se debe suministrar.
▪ Cuanto calor se produce en el proceso, etc.
4
Para el crecimiento microbiano se requiere un medio de cultivo que
contenga:
➢ Fuente de carbono y energía (FCE ej azúcares).
➢ Fuente de nitrógeno (amoníaco, nitrato).
Componentes ➢ Oxígeno.
de un medio
➢ Sales: Fósoforo (PO43-), azufre (SO4=,), potasio,
de cultivo
(nutrientes) magnesio, calcio, hierro.
➢ Micronutrientes (Co, Cu, Mn, Zn, etc.).
➢ Factores de crecimiento: Vitaminas.

Los que serán los sustratos

de la reacción

✓ Células (biomasa) - x
Productos de la ✓ Algún producto - p
reacción ✓ CO2
✓ H 2O
Ecuación del crecimiento microbiano: Modelo de caja negra
Considerando únicamente aquellos componentes del medio de cultivo que se
encuentran en mayor cantidad y se consumen en forma notoria, se puede
escribir el siguiente esquema del crecimiento microbiano:

rx Biomasa
FCE rs
Esquema del Producto
crecimiento celular rN Cel. rp
según el modelo de Fte de N CO2 + H2O
caja negra.
O2
Q

En base a este modelo, el crecimiento microbiano aerobio se puede

representar mediante la siguiente reacción química:

FCE + FN + O2 → biomasa + producto + CO2 + H2O + calor

En esta ecuación no se incluyen compuestos como las vitaminas y minerales, los que
se consumen en tan pequeñas cantidades que su contribución a la estequiometría es
despreciable.
FCE + a FN + b O2 → biomasa + producto + CO2 + H2O + calor

Para escribir la ecuación de crecimiento microbiano es necesario

escribir los sustratos y productos en base a su formula molecular.
Ej. Para la FCE, productos, etc, se conoce la formula molecular:

Pero cual es la formula molecular para la biomasa……?

 Por lo tanto se
Se ha encontrado que la composición elemental de puede definir un
distintos microorganismos es semejante y que esta no “microorganismo
se modifica mayormente durante el cultivo. promedio”, cuya
composición es:

Fórmula centesimal de
la biomasa standard
(microorganismo
promedio):
Tomado de Principles of Fermentation Technology (Stanbury P. F. y C3,87H6,94 O1,93N0,775
col.)
1. Concepto de C-mol

Fórmula centecimal:
Fórmula mínima de un microorganismo
C3,87H6,94 O1,93N0,775 - promedio:
C H1,79 O0,5 N0,2

C-mol de biomasa: cantidad de biomasa (g) que contiene 1 átomo gramo de

carbono

El peso molecular de 1 C-mol de 12 + 1,79 + 16  0,5 + 14  0,2

= 25,8 g
biomasa será = 0,95

1 C-mol de biomasa = 25,8 g

Esta formula mínima representa el 95 % p/p de la biomasa (no incluye el 5 %

de sales.
C-mol de cualquier sustancia
De la misma manera se puede definir un C-mol de la FCE (sustrato) , del
producto, etc.

(g/c-mol)

1 C-mol: cantidad de esa sustancia que contiene un átomo gramo de

carbono (12 g de carbono).
2. Ecuación de crecimiento microbiano generalizada

Ecuación de crecimiento, basada en 1 C-mol de la FCE (sustrato): CHa1Ob1Nc1

con NH3 (o sal de amonio) como fuente de nitrógeno.
1 C-mol S (FCE) + a FN + b O2 → yx/s biomasa + yp/s P + yco2/s CO2 + w H2O

CHa1Ob1Nc1 + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w H2O + q

Los coeficientes estequiométricos de la ecuación están referidos a 1 C-mol de sustrato

(FCE):

a = moles de la FN consumida/C-mol de FCE.

b = moles de O2 consumido/C-mol de FCE.

yx/s = C-moles de biomasa formada/C-mol de FCE (Rendimiento de biomasa).

yp/s = C-moles de producto formado/C-mol de FCE (Rendim. de producto).

yCO2/s = moles de CO2 formado/C-mol de de FCE.

q = Kcal/c-mol de FCE (energia que se libera por cada C-mol de FCE).

Para calcular los coeficientes se deben medir todas las variables del cultivo: biomasa
(x), sustrato (s), consumo de oxígeno y producción de CO2, producto (p).
Cálculo de los coeficientes estequiométricos:
Rendimiento de biomasa
Dan una medida de la
yx/s = x/s = (xf – xo)/(so – sf) (c-molx/c-mols). eficacia de conversión del
sustrato en biomasa y
Yx/s = x/s = (Xf – Xo)/(So – Sf) (gx/gs). productos.

Siendo:
x0 = biomasa inicial (c-mol/L) - xf = biomasa final (c-mol/L)
s0 = sustrato inicial (c-mol/L) - sf = sustrato final (c-mol/L)
Xo , Xf = biomasa inicial y final (g/L) - So, Sf = substrato inicial y final (g/L)

Rendimiento de producto
yp/s = p/s = (pf – po)/(so – sf) (c-molx/c-mols).

Yp/s = P/S = (Pf – Po)/(So – Sf) (gx/gs).

Siendo:
p0, pf, = producto inicial y final (c-mol/L).
s0, sf = sustrato inicial y final (c-mol/L)

Son los rendimientos experimentales: se definen como la relación entre la

biomasa o producto obtenido (x o p) y el sustrato consumido (FCE).
 Cálculo de b

Como se calculan los moles de O2 consumidos en el cultivo?:

a. Se mide la composición de los gases a la salida del reactor a ≠ tiempos.

Tiempo O2 sal. CO2 sal.

(h) (%) (%)
0 20,84 0,13
1 20,78 0,19
2 20,63 0,29
3 20,46 0,52
4 20,22 0,62
5 19,99 0,96

b. Se calcula ro2 (velocidad de consumo de O2) con la siguiente ecuación:

F  0,79 T0  (%O2 )s (%O2 )e 

r02 = −   60   − 
Vmediio T  22,4 100 − (%O )
2 s − (%CO )
2 s 0,79 
(molo2/l.h)
 Producción de CO2 y consumo de
c. Se representa ro2 en función del tiempo del cultivo 0,05

0,04

O 2 (mmol/l.h)
0,03

Tiempo O2 sal. CO2 sal. rO2 rCO2 0,02

(h) (%) (%) (mmol/l.h) (mmol/l.h) 0,01

0 20,84 0,13 3,5 3,2 0

0 2 4 6 8 10

1 20,78 0,19 4,9 4,7 Tiempo (h)

2 20,63 0,29 9,0 7,2

Velocidad de consumo de O2 (rO2 ) y
3 20,46 0,52 12,9 13.0 velocidad de formación de CO2 (rCO2).
Símbolos: rO2 (▲) y rCO2 (■).
4 20,22 0,62 19,9 15,6
5 19,99 0,96 25,1 24,4

Los moles de O2 consumido durante el cultivo se calculan como la integral

de la velocidad de consumo de O2 (ro2) en función del tiempo según:

=  rO 2  dt
tf
moles O2 consumidos
t0

Moles O2 b
consumido (molo2/C-molFCE)

0,187 0,555
 De la misma manera se calcula yCO2/s

Midiendo la composición de los gases a la salida del reactor, se puede

calcular rCO2 por medio de la siguiente ecuación:

F  0,79 T0  (%CO2 )s (%CO2 )e 

rC 02 =−   60   − 
Vmediio T  22,4 100 − (% O2 )s
− (%CO2 )s
0,79 

Los moles de CO2 producidos durante el cultivo se calculan como la integral

de la velocidad de producción de CO2 (rCo2) en función del tiempo según:

CO2 total yco2/s

=  rCO2  dt
tf
moles CO2 total
producido t0 (moles) (molco2/C-molFCE)
0,182 0,543
4. Grado de reducción

Grado de reducción (): es el Nro de electrones que se transfieren desde 1 C-

mol del compuesto que se oxida, al oxígeno (indica el Nro de electrones
disponibles que tiene 1 C-mol de un determinado compuesto).

En la Tabla se observa el valor del  para la oxidación de 1 C-mol de distintos

compuestos orgánicos a CO2 y H2O y el calor de cada reacción.

Combustión de 1 C-mol de diferentes compuestos en condiciones estándar y pH 7 (adaptado

de J.A.Roels).

Comp. Reacción  q (Kcal/C-mol) q0 = q/

Metano CH4 + 2 O2 → CO2 + 2 H2O 8 213,4 26,7

Etanol CH3O0,5 + 3/2 O2 → CO2 + 3/2 H2O 6 163,8 27,3

Glucosa CH2O + O2 → CO2 + H2O 4 111,0 28

Ac.fórmico CH2O2 + ½ O2 → CO2 + H2O 2 61,0 30,5

Cálculo de 
Para calcular el  de 1 C-mol de un determinado compuesto, planteamos la ec.
de oxidación del compuesto a CO2, H2O.
Si el compuesto tiene nitrógeno, hay que especificar a que se lo oxida al N:
para ello ponemos del lado derecho de la ec. la fuente de Nitrógeno que se usó
en el medio de cultivo (Ej decimos que lo oxidamos a NH3 si esa es la FN que
pusimos en el medio de cultivo).

Siendo:
CHaObNc + n O2 → g CO2 + w H2O + k NH3 n = moles de oxígeno necesarios
=0 =0 para oxidar 1 C-mol del
=0
compuesto.

El valor de  será: Se multiplica por 4 porque cada

NH3 = 4 n
molécula de O2 capta 4
electrones.
Indica que este es el nivel de
referencia elegido para el nitrógeno.

Debe quedar claro que el CO2, H2O no tienen electrones disponibles por lo
tanto el  = 0 , lo mismo para el NH3 porque se eligió como referencia.
Para evitar tener que plantear la ecuación de oxidacion anterior
cada vez que se necesite calcular el valor del GR de un compuesto,
se obtuvo la siguiente ecuación del  de cualquier compuesto
(CHaObNc ) que se oxida a CO2, H2O y NH3:

NH3 = 4 n = 4 + a - 2 b – 3 c mol de e- /C-mol

Siendo: a, b y c los àtomos de H, O y N, respectivamente de la formula

de 1 C-mol del compuesto: CHaObNc.

Esta ecuación es muy útil porque permite calcular el GR de un

compuesto a partir de su fórmula molecular de 1 C-mol, sin
necesidad de plantear la ecuación de oxidación.

¿Como se obtiene esta ecuaciòn del  ?

 ¿Como se obtiene la ecuaciòn del  ?

A partir de la ecuación de oxidación:

CHaObNc + n O2 → g CO2 + w H2O + k NH3

Planteando los balances

elementales:

Haciendo los reemplazos correspondientes y despejando 4 n (del b. de

Oxig.), se obtiene la ecuación del  de cualquier compuesto (CHaObNc ) en
función de su formula molecular de 1 C-mol.

NH3 = 4 n = 4 + a - 2 b – 3 c CHaObNc

Si en lugar de NH3 tenemos otra fuente de nitrógeno, entonces la ecuación

cambia y se debe plantear una nueva ecuación de oxidación con esta otra
FN como referencia.
Ejémplo:

Calcular el grado de reducción para biomasa (considerando NH3 como

referencia para el nitrógeno).

Sabiendo la formula de la biomassa:

CH1,8O0,5N 0,2

Aplicando la ecuación de grado de reducción:

NH3 = 4 n = 4 + a - 2 b – 3 c CHaObNc

Siendo: a = 1,8 - b = 0,5 - c = 0,2

NH3x = 4,19 mol de e- /C-mol

Si se realiza el cociente entre el calor de combustión de diferentes compuestos
(q) y el  se obtiene un valor (q0) que es aproximadamente constante:

q0 = q/ = 27,5 Kcal/mol de e- = constante.

Es decir que el “calor de reacción por mol de e-” (q0) es constante para
la oxidación de una gran cantidad de compuestos.

Esto implica que  es una medida de la energía q =  . q0

contenida en un compuesto.
Kcal/C-mols)
 5. Balances de materia y energía

5.1. Balance de materia en la ecuación de crecimiento

A pesar de su complejidad, el crecimiento microbiano obedece a ley de

conservación de la materia. Todos los C, H, O, N, consumidos durante el
crecimiento se incorporan a las nuevas células o se liberan como productos.

CHa1Ob1 + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w

H2O + q

Balance de carbono:
Los rendimientos deben estar
1 = yx/s + yp/s + yco2/s (ec.1) en unidades de C-moles para
que se pueda aplicar este
balance.
Balance de nitrógeno:
a = yx/s . 0,2 + yp/s . C2 (ec.2)
Ej. Balance de carbono en un proceso aerobio:

CHa1Ob1 + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yco2/s CO2 + w H2O + q

yco2/s relacionada con la fracción del azúcar

1 = yx/s + yco2/s que se oxidó.
yp/s = 0 (no se forma producto).

Cuando las células se multiplican, una parte de la FCE se transforma en

biomasa y otra parte es oxidada a CO2 y H2O, para generar energía (ATP).

Ej. Balance de carbono en un proceso anaerobio:

CHa1Ob1 + a NH3 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w H2O + q

yco2/s relacionada con la fracción del

1 = yx/s + yp/s + yco2/s azúcar que se oxidó.
yp/s = producto que se forma por la
reducción del azúcar.
Ej. Fermentación alcohólica, durante el catabolismo, una parte del azúcar se oxida a
CO2 y la otra se reduce a etanol.
5.2. Balance de grado de reducción

El número de electrones disponibles se conservan durante el metabolismo.

Aplicando este principio a la ecuación de crecimiento microbiano, se obtiene:

CHa1Ob1 + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w

H2O + q

nº de electrones a la izquierda = nº de electrones a la derecha

s + a NH3 - 4 . b = x . yx/s + p . yp/s

Debe recordarse que para H2O, CO2 y NH3 (referencia del N), el  = 0.
Además el  del O2 es - 4.

Despejado y dividiendo por s

4b  
+ y x
+ p
y =1
 
s s
x/s
s
p/s
Si multiplicamos y dividimos ambos miembros por q0 se obtiene que ε, η y
ξ representan la fracción de energía (de la FCE) transferida al oxígeno, a la
biomasa y al producto respectivamente.

+
4b
+
 p
=1
y x
y
  s s
x/s
 s
p/s

ε + η + ξ = 1

Fracción de Fracción de energía (de

energía (de la FCE) Fracción de energía (de la FCE) retenida en el
transferida al O2. la FCE) retenida en la producto.
biomasa.

Eficiencia energética (η): fracción de energía del sustrato que

queda acumulada en biomasa.
 Las ecuaciones de balance de carbono y grado de reducción permiten
comprobar la consistencia de los datos experimentales y verificar si las
determinaciones han sido correctas.

En un cultivo microbiano, tanto el balance de carbono como el de grado de

reducción tienen que dar 1.

Medidas realizadas en el laboratorio se deben encontrar dentro de los

intervalos:

0,94 ≤ yx/s + yp/s + yco2/s ≤ 1,06

0,93 ≤ ε + η + ξ ≤ 1,07

Si hay un producto y no se lo está midiendo

los dos balances darán valores < 1.
Ejemplo:
Se cultivó la levadura Candida utilis en un medio conteniendo glucosa,
SO4(NH4)2 y sales. La concentración inicial del microrganismo fue de 0,53 g/l
(X0) y la glucosa agregada al medio de 15,2 g/l (S0). Al cabo de 9,5 h se
consumió totalmente la glucosa (Sf = 0) y la biomasa alcanzó un valor de 6,07
g/l (Xf). El O2 total consumido fue de 0,123 mol/l y el CO2 producido fue de
0,179 mol/l. Se formó algún producto?.

Solución
CH2O + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yco2/s CO2 + w H2O

1ro) Pasar todo a C-mol Glucosa CH2O 30 gs/C-mols

Biomasa CH1,79O0,5N0,2 25,8 gx/C-molx

2do) Calcular yx/s, yCO2/s , b

Los rendimientos deben

estar en unidades de C-
moles para que se pueda
aplicar la ec. de balance
de C.

3ro) Aplicar balance de carbono, considerando yp/s = 0

1 = yx/s + yp/s + yco2/s

La suma de ambos rendimientos es menor a 1, significa que se formó un

producto. El rendimiento del producto será:
Yp/s = 1 - yx/s – yCO2/s = 1 – 0,41 – 0,354 = 0,236 cmolp/cmols
4to) Corroborar aplicando el balance de grado de reducción

❖ Calcular el grado de reducción para biomasa y glucosa.

Recordando la ecuación generalizada: NH3 = 4 n = 4 + a - 2 b – 3 c CHaObNc

1 C-mol de biomasa: CH1,8O0,5N 0,2 NH3x = 4 + 1,8 – 2 . 0,5 – 3. 0,2 = 4,19

1 C-mol de Glucosa: CH2O s = 4 + 2 – 2 . 1 = 4

❖ Aplicar la ec. del balance de  (recordar que todos los rendimientos deben
estar expresados en C-moles para poder aplicar la ecuación):

4b  
+ y x
+ p
y =1
 
s s
x/s

s
p/s

La suma nuevamente es menor a 1, por lo tanto se corrobora que se formo

un producto. Y se calcula el valor de p = 5,43.
6. Rendimientos máximos teóricos

De los balances de C y del  surgen los “rendimientos máximos

teóricos”. Permitirán predecir cual es el máximo rendimiento posible
en cualquier procesos industrial.

Como se obtienen esos rendimientos máximos teóricos?:

Determinación del máximo rendimiento para la producción de biomasa.

✓ Del balance de Carbono, se puede considerar que toda la FCE se usa

solo para formar biomasa. Es decir que no se forma producto, ni CO2 .
Por lo tanto :
1 = yx/s + yp/s + yco2/s

yx/smt = 1

“Máximo rendimiento para biomasa”

✓ Del balance de  , se puede considerar que todos los e- de la FCE
van a parar a la biomasa.
Por lo tanto del balance de GR:

4b  
+ y x
+ p
y =1
 s s
x/s
 s
p/s

yx/smt = s/x

“Máximo rendimiento para biomasa”

Surgen así dos rendimientos máximos teóricos

Cuál de los dos es válido?? mt yx/smt = s/x

yx/s =1

De los dos rendimientos se usará aquel que sea menor, según el valor
del grado de reducción de la FCE (s).

a) Cuando:
s < x  yx/smt = s/x

b) Cuando:
s > x  yx/smt = 1

Esta es una idealización, para que la reacción ocurra, se requiere energía,

por lo tanto hay que considerar que un parte de la FCE se utilizará para la
producción de energía. En la práctica se tiene entonces un rendimiento del
60 % para la producción de biomasa.

yx/sreal = 0,6. yx/smt

Ejemplo:
Determinar el rendimiento máximo teórico para la producción de biomasa, a
partir de glucosa (FCE) y sulfato de amonio (FN), en un proceso aerobio:

CH2O + a NH3 + b O2 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yco2/s CO2 + w H2O

NH3s = 4 NH3x = 4,19
4b  
+ y x
+ p
y =1
 
s s
x/s

s
p/s

Como s < x  yx/smt = s/x (Suposición: sin

obtención de energía).

yx/smt = s/x = 4 / 4,19 = 0,95 c-molx/c-mols

Rendimiento real: se multiplica por 0,6 para considerar que una parte de la
FCE se utiliza para obtener energía, en un proceso aerobio.

yx/sreal = yx/smt . 0,6 = 0,57 c-molx/c-mols

Ningún microorganismo puede dar un

yx/s real = 0,50 gx/gs rendimiento superior a este.
Ejemplo:

Determinar el rendimiento máximo teórico para la producción de etanol, a

partir de glucosa (FCE) y sulfato de amonio (FN), en un proceso anaerobio:

CH2O + a NH3 → yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CH3O0,5 + yco2/s CO2 + w H2O

NH3 s = 4 NH3p = 6

Como s < p  yp/smt = s/p 4b 

+ y x
+ p
y =1
  s s
x/s

s
p/s

(Suposición: sin
yp/smt = s/p = 4/6 = 0,66 c-molp/c-mols formación de biomasa).

Glucosa (C6H12O6): CH2O - PM: 30 gs/c-mols

Etanol (C2H6O): CH3O0,5 - PM: 23 gp/C-molp

yp/smt = 0,506 gp/gs

Para la obtención de energia, una parte de la glucosa es oxidada CO2

y otra es reducida a etanol.
7. Calor producido en un cultivo microbiano

Las células utilizan la energía química de manera bastante eficiente pero, es

inevitable el desprendimiento de calor.

CHa2Ob2Nc2 + a NH3 + b O2 → yx/s biom. + yp/s prod. + yco2/s CO2 + HR

HR = calor producido por cada c-mol de FCE consumida (asociado al metabolismo
celular).

El principio de conservación de la energía es aplicable a bioprocesos.

Realizando un balance de entalpía en la ecuación de crecimiento microbiano:

Hs = yx/s Hx + yp/s Hp + HR

Despejando HR = Hs - yx/s Hx - yp/s Hp (ec. 1)

Se pueden sacar de Tablas los valores de entalpía (H). O se pueden calcular recordando
que el contenido energético de los compuestos orgánicos está relacionado con su GR:

Hs = qs = s q0 - Hx = qx = x q0 - Hp = qp = p q0

Reemplazando HR = s q0 - yx/s x q0 - yp/s p q0 (ec. 2)

en la ec. 1
A partir del balance de grado de reducción 
4b 
+ y x
+ p
y =1
 s s
x/s

s
p/s

Despejando 4 b y multiplicando
ambos miembros por qo:
4 b q0 = s q0 - yx/s x q0 - yp/s p q0

HR
Por analogía con la ec. 2 4 b q0 = HR

ΔHR (Kcal/C-mols) = 4. b (mol de e-./C-mols) * qo (Kcal/mol de e-)

En cultivos aerobios, la cantidad de energía desprendida durante la reacción

(HR) se puede calcular conociendo el valor de b.

En cultivos anaerobios: El calor de reacción (HR) se calcula mediante el

balance de entalpía:

HR = Hs - yx/s Hx - yp/s Hp

Bibliografía

Bjorn, K.; Colin, R. 2009. Biotecnología. Editorial Acribia, Zaragoza, España. Capítulo 3.

Crueger, W.; Crueger A. Biotecnología: Manual de microbiología industrial. Editorial Acribia, 1993.

Doran, P. M. Principios de Ingeniería de los Bioprocesos. Editorial Acribia S.A. Zaragosa, España, 1995
(Traducido 1998). Capítulo 4 y Capítulo 11.

Ertola R. J.; Yantorno O.; Mignone C. Microbiología Industrial. Organización de los Estados
Americanos (OEA). Washington DC., 1994.

Murray Moo - Young . Comprehensive Biotechnology . The Principles , Applications and

Regulations of Biotechnology in Industry , Agriculture and Medicine . Pergamon Press .New York , 1983 .

Pirt J. Principles of Microbe and Cell Cultivation. Blackwell Scientific Publications, 1975.

Scraag, A. Biotecnología para ingenieros: Sistemas biológicos en procesos tecnológicos. Noriega Editores,
1996. Capítulo 10

Voguet, C; Cavalitto, S.; Mignone, C. Apuntes Curso de Posgrado: Aspectos Tecnológicos del Cultivo de
Microorganismos y Células Eucariotas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones
Industriales (CINDEFI), 2005.

Apuntes de cátedra.