Estequiometría y Cinética Microbiana - Parte 2 - 2022 - Formato

Estequiometría y
cinética
microbiana
Parte 2: Cinética
Daniel Ferrari
dferrari@fing.edu.uy
IIQ – Dpto. Bioingeniería Ingeniería Bioquímica 2022-03-08 1
Temario
3.0 Cinética del crecimiento microbiano y de la formación de producto
3.1 Requisitos para el crecimiento microbiano
3.2 Cuantificación del crecimiento
3.3 Parámetros cinéticos
3.3.1 Velocidades volumétricas
3.3.2 Velocidades específicas
3.3.3 Tiempo y grado de duplicación
3.3.4 Productividad volumétrica
3.3.5 Edad del cultivo
3.4 Fases de crecimiento en cultivo por lotes (batch)
3.5 Cinética de la utilización de substrato y de la formación de producto
3.6 Modelos cinéticos
3.6.1 Modelos cinéticos para el crecimiento
3.6.2 Modelos cinéticos para la formación de producto
3.7 Modelado de un cultivo por lotes (batch) simple
3.8 Cinética del decaimiento microbiano
3.9 Relación entre el crecimiento microbiano y el ambiente
Objetivo del tema
◼ Describir crecimiento microbiano en función del tiempo de cultivo

◼ Presentar principales parámetros cinéticos
◼ Presentar diferentes modelos cinéticos para su uso en el diseño y
optimización de bioprocesos.

3.1 Requisitos para el crecimiento microbiano
Los requisitos para el crecimiento microbiano son:

◼ Inóculo viable
◼ Fuente de energía
◼ Medio de cultivo con los nutrientes necesarios
◼ Ausencia de inhibidores
◼ Condiciones ambientales apropiadas.

3.2 Cuantificación del crecimiento
◼ El estudio cuantitativo de la cinética microbiana requiere contar con métodos
confiables y sencillos para medir el crecimiento de poblaciones.
◼ Las medidas más usadas de la cantidad de microorganismos son el número

de células y la masa celular en base seca (biomasa). Esta última es la más
usada desde el punto de vista “ingenieril”.
◼ No existe necesariamente una relación proporcional entre la biomasa y el

número de células. Esta relación es más compleja para los microorganismos
que crecen formando agregados o ramificaciones (cultivos miceliales).
◼ En el caso de cultivos miceliales (hongos, actinomicetos), los

microorganismos pueden desarrollarse en forma difusa en toda la masa de
líquido o en forma discreta adoptando la forma esférica (pellets).

Cuantificación del crecimiento: viabilidad y actividad celular
◼ La biomasa y el número de células que interesan determinar son los

correspondientes a los microorganismos activos, aquellos que realmente
participan en el bioproceso.
◼ No todos los microorganismos vivos o medidos como viables están realmente
activos.
◼ La actividad microbiana se mide por la velocidad para realizar la
transformación de interés por cantidad de microorganismos presentes en el
sistema considerado (velocidades específicas).
◼ La biomasa que debiera usarse en las ecuaciones que describen y cuantifican
procesos microbianos es la “biomasa activa”. En la práctica, se mide la masa
celular total y paralelamente se hacen de medidas de viabilidad o actividad
celular.

Cuantificación del crecimiento
Lista parcial métodos para cuantificar el crecimiento microbiano
◼ Recuento de colonias crecidas en placa

◼ NMP
◼ Medida de peso seco por gravimetría
◼ Nefelometría
◼ Turbidimetría
◼ Citometría de flujo
◼ Correlación entre microorganismos y el nivel de un componente celular
(nitrógeno, proteína, clorofila, ADN, ATP, etc.)
◼ Correlación entre microorganismos y una actividad metabólica
(consumo de substrato, formación de producto, formación de CO2,
consumo de O2, emisión de luz, etc.)

3.3 Parámetros cinéticos
Los parámetros definidos en esta sección se refieren básicamente a

cultivos en medio líquido “homogéneos”
◼ Velocidades volumétricas
◼ Velocidades específicas
◼ Tiempo y grado de duplicación
◼ Productividad volumétrica
◼ Edad del cultivo.

3.3.1 Velocidades volumétricas
Se define como el cambio de un componente por unidad de volumen y de
tiempo.
cambio en componente i
ri = (17)
tiempo x v olumen
En términos de concentraciones, se pueden expresar:
− dS
rS = (18)
dt
dP (19)
rP =
dt
dX
rX = (20)
dt
rS: velocidad volumétrica de consumo de substrato
rX: velocidad volumétrica de crecimiento microbiano
rP: velocidad volumétrica de formación de producto
3.3.2 Velocidades específicas
Se denominan también actividades o cocientes metabólicos
cambio en el componente i
V elocidad específica i =
biomasa x tiempo
En términos de concentraciones:
−dS
Velocidad específica de consumo de substrato: qS = (21)
Xdt
−dP
Velocidad específica de formación de producto: qP = (22)
Xdt
dX
Velocidad específica de crecimiento: μ= (23)
X dt
A partir de la ecuación 23,  se puede expresar también como:
d lnX
μ = (24)
dt
Velocidad específica de crecimiento para diferentes organismos

Organismo /célula Temperatura (°C)
(h-1)
Escherichia coli 40 2
Aspergillus niger 30 0,35
Saccharomyces cerevisiae 30 0,17 – 0,35
Célula HeLa 37 0,015 – 0,023
Katoh & Yoshida, Biochemical Engineering, p. 48, 2009.

Perfiles X vs tiempo
◼ La pendiente de la curva ln X vs t es .
◼ Para cultivos microbianos sin limitaciones en la disponibilidad de
substrato,  es generalmente constante y corresponde al valor máximo
(m) para las condiciones existentes.
◼ El cultivo bajo dichas condiciones sigue una cinética de primer orden.
Sigue el comportamiento cinético de una reacción autocatalítica.
◼ El período durante en el cual el crecimiento tiene lugar con  constante
se denomina fase exponencial o logarítmica, según se describa el
crecimiento en base a X o al ln X. Si  es constante, a partir de la
ecuación 23 se tiene:
X
ln =μt (25)
X0
μt
X = X0 e (26)

Wang et al p. 86
X
ln =μt
X0
μt
X = X0 e
Prescott, Harley and Klein, Microbiology 5th ed 2002.
3.3.3 Tiempo y grado de duplicación
◼ Se denomina tiempo de duplicación (td) el intervalo de tiempo que insume
duplicar la biomasa. A partir de la ecuación 25 o 26 con X = 2X0 y t = td, se
tiene:
ln 2
td = (27)
μ
 El grado de duplicación es el número de veces (n) que se duplica una

población microbiana en un tiempo dado. Se denomina también número de
generaciones.
X
= 2n (28)
X0

Valores típicos de tiempo de duplicación (td)
Tipo de organismo td (h)
Bacterias 0,3 – 2,0
Levaduras 1,0 – 4,0
Hongos filamentosos 2,0 – 4,0
Microalgas 18 – 35
Células animales (in vitro) 20 - 40

3.3.4 Productividad volumétrica
Es un parámetro cinético que se utiliza para evaluar un proceso desde el punto de
vista industrial.
masa producida
P roductividad volumétric a = (29)
tiempo x volumen
QX: productividad volumétrica de biomasa
QP: productividad volumétrica de producto
ΔX
QX = (30)
Δt
ΔP
QP = (31)
Δt
◼ En caso de tratamiento biológico de efluentes se puede definir una

productividad volumétrica de remoción de substrato (QS).
3.3.5 Edad del cultivo
Intervalo de tiempo que transcurre entre la inoculación y un tiempo dado,
generalmente cuando el cultivo se interrumpe para usarlo como inóculo u
otra aplicación.

3.4 Fases de crecimiento en cultivo por lotes (batch)
Fase
I Lag o de retardo
II Aceleración
Exponencial
III (logarítmica), de
producción
IV Desaceleración
V Estacionaria
VI Decaimiento o muerte

Fases de crecimiento
ln X
X Variaciones de X, ln X,  y rX con el tiempo
rX

3.5 Cinética de la utilización de substrato y de la formación de producto
◼ La formación de producto y el crecimiento están relacionados con la

utilización (consumo) de nutrientes. En esta sección se establecerán las
relaciones entre ellos, mediante ecuaciones de balance de materiales.
◼ En base a la ecuación 4, se tiene:
dS d S G d SM d SP (32)
− =− − −
dt dt dt dt
Se define velocidad específica de consumo de substrato para

mantenimiento celular “m” como:
consumo de substrato para mantenimie nto

m = (33)
biom asa x tiem po
− d SM
En términos de concentraciones se expresa: m= (34)
Xdt
Cinética de la utilización de substrato
Valores de velocidad específica de consumo de glucosa para

mantenimiento (m)
Organismo m (g/gh)
Lactobacillus casei 0,135
Aerobacter cloacae 0,094
Saccharomyces cerevisiae 0,036
Penicillium chrysogenum 0,022
Candida utilis 0,170
Azobacter vinelandii 0,15
Klebsiella aerogenes 0,04
Pirt (1975), p. 69
Cinética de la utilización de substrato
Valores típicos de velocidad específica de consumo de

substrato para mantenimiento (m) y de oxígeno (mO)
m mO
Organismo Substrato
(g/gh) (g/gh)
Glucosa 0,054 0,054
Aerobacter aerogenes Glicerol 0,076 0,109
Citrato 0,058 0,048
Escherichia coli Glucosa 0,054 0,016
Saccharomyces cerevisiae Glucosa 0,018 0,0192
Penicillium chrysogenum Glucosa 0,022 0,024
Roels & Kossen, 1978
Relaciones entre velocidades y coeficientes
◼ Se puede establecer relaciones entre las velocidades específicas y los
coeficientes estequiométricos que facilitan el modelado de biorreactores
◼ Para un sistema cerrado, se puede obtener dichas relaciones
introduciendo los parámetros cinéticos y los coeficientes de rendimiento
en la ecuación 32.

dS μX
− = (35)
dt YX/S
dS μX q X
− = + mX + P (36)
dt YG YP
μ
qS = (37)
YX/S
μ q
qS = + m + P (38)
YG YP
1 1 m Y 1
= + + P/S (39)
YX/S YG μ YX/S YP

◼ Definiendo YP/X como el coeficiente de rendimiento de producto por

cantidad de biomasa producida, se tiene:
dP YP/S
YP/X = = (40)
dX YX/S
1 1 m YP/X
= + + (41)
YX/S YG μ YP
◼ Para la formación de producto:

dP Y (42)
= q P X = YP/S q S X = P/S μ X = YP/X μ X
dt YX/S
q P = YP /S q S (43)
q P = Y P /X μ (44)
◼ Cuando no hay formación de producto, qp = 0 y las ecuaciones 36, 38 y

39 se pueden expresar:
dS μX
− = + mX (45)
dt YG
μ
qS = + m (46)
YG
1 1 m
= + (47)
YX/S YG μ
 Si los consumos de substrato para mantenimiento celular y formación

de producto son despreciables:
m → 0, qP → 0, entonces YX/S → YG .
Relaciones entre crecimiento y formación de producto
La relación cinética entre crecimiento formación de producto depende del
metabolismo microbiano (ver apartado 2.5):
a) Formación de producto asociada al crecimiento (clase 1)
b) Formación de producto parcialmente asociada al crecimiento, cinética mixta
(clase 2, situación intermedia entre 1 y 3)
c) Formación de producto no asociada al crecimiento (clase 3).
Clase 1 Clase 2 Clase 3
Wang et al p. 79

Relaciones entre crecimiento y formación de producto
Clase 1 Clase 2 Clase 3
Wang et al. p. 79

Relaciones entre crecimiento y formación de producto - Ejemplos
Bailey & Ollis, 2nd. Ed. pp. 422 – 423.

Relaciones entre crecimiento y formación de producto - Ejemplos
Producción de proteasa por Bacillus subtilis IIQDB32
AP: actividad proteolítica
Loperena, Belobrajdic, Ferrari, Varela, Vázquez & Siñeriz (1999)

3.6 Modelos cinéticos
◼ Permiten predecir comportamientos y simular el efecto de variar las
condiciones de operación dentro de su rango de validez.
◼ La formulación de un modelo puede ser experimental, teórica o mixta.
◼ Los modelos varían de complejidad según la representación usada para
describir la población celular:
◼ En general, el modelo debe ser lo más sencillo posible, incluyendo solo
los fenómenos necesarios para explicar el comportamiento
experimental observado.

Modelos cinéticos
Diferentes representaciones usadas de la población celular para la

construcción del modelo cinético
No estructurado Las células se describen como un todo homogéneo.

Componentes
celulares Las células se describen por el tipo y contenido de sus
Estructurado
componentes.
Las células son todas iguales entre sí y se representan
No segregado
Población por valores medios de sus propiedades.
celular Las células son heterogéneas entre sí, se representan
Segregado
por propiedades de clases de células.
La composición de las células es constante durante el
Balanceado
Composición crecimiento (“comportamiento estacionario”).
celular La composición de las células varía durante el
No balanceado
crecimiento (“comportamiento transitorio”).

Modelos cinéticos
Diferentes modelos según representación de la población celular

No estructurado Estructurado
Situación más idealizada
No segregado La población celular se
La población celular se describe por la
describe como un único composición promedio
componente soluto de sus múltiples
Célula promedio y componentes
crecimiento balanceado
Célula promedio
Segregado
La población celular se La población se describe

describe como células por el contenido de
heterogéneas individuales múltiples componentes
de un único componente célula por célula.
Crecimiento balanceado Situación real

Modelos cinéticos
◼ Modelos más simples idealizan a la población celular como:
◼ No estructurada
◼ No segregada
◼ Estado de crecimiento balanceado: la composición celular media no se
afecta por el crecimiento (proliferación)
◼ Representan comportamiento promedio de las poblaciones de células a
través de la cuantificación de propiedades del cultivo (tales como X, S, P,
, qS, qP).

3.6.1 Modelos cinéticos para el crecimiento
◼ El modelo cinético más difundido es el propuesto por Jacques Monod
(1942).
◼ Establece una relación funcional entre  y la concentración de un único
nutriente esencial “limitante”.
◼ Es un modelo sencillo de dos parámetros.
◼ Se aplica básicamente para el cultivo de un microorganismo que crece
formando células aisladas (separadas) sobre un substrato simple y
cuando no hay inhibidores del crecimiento.
◼ Modelo flexible, ha mostrado predecir adecuadamente el crecimiento de
cultivos que no cumplen totalmente los requisitos anteriores.
◼ Si bien se basa en la forma de las isotermas de adsorción de Langmuir y
en la cinética enzimática de Michaelis & Menten, es un modelo de base
esencialmente empírica.
El modelo de Monod
μ S
μ = m (48)
S+K
S
m: es la velocidad específica de crecimiento máxima.
KS: constante de saturación, también llamada constante del modelo de Monod.
◼  = m/2 para S = KS
◼ Generalmente S >> KS y   m, ( es constante).
◼ El modelo de Monod se aplica básicamente para el entorno de la fase de
crecimiento exponencial.

El modelo de Monod
◼ Existen modificaciones del modelo de Monod para extender su

aplicación a otros casos: inhibición, crecimiento diáuxico (varios
substratos), substratos complejos, cultivos mixtos, etc.
◼ Un cultivo microbiano está en estado estacionario si las velocidades
específicas son constantes.
◼ Un reactor en el cual se lleva a cabo un cultivo microbiano está en
estado estacionario si las velocidades volumétricas globales son
constantes.

El modelo de Monod
µm (h-1)
µ (h-1)
0,5 µm
KS S (mg/L)
El modelo de Monod
X (g/L)
S (g/L)
 (h-1)
S = KS
Tiempo (h) S (g/L)

El modelo de Monod
Bailey & Ollis, 2nd ed p. 385.

El modelo de Monod
Valores de la constante de saturación (KS) del modelo cinético de Monod
Substrato Organismo (género) KS (mg/L)

Glucosa Escherichia 0,07 – 2,0
Glucosa Aspergillus 5,0
Glucosa Saccharomyces 25
Lactosa Escherichia 20
Glicerol Candida 4,5
Oxígeno Candida 0,04 – 0,5
Metanol Pseudomonas 0.7
Fosfato Escherichia 1,6
Mg2+ Klebsiella 0,6
Triptofano Escherichia 0,0005 – 0,001
Arginina Aspergillus 0,5
Otros modelos cinéticos
- S/KS
◼ Modelo de Tessier (49)
◼ Modelo de Mosser
(50)
◼ Modelo de Contois
(51)
◼ Modelo logístico (52)
siendo X∞ la máxima concentración de biomasa alcanzable bajo

las condiciones ambientales existentes.

Modelo cinético para crecimiento - Ejemplo
Tessier
Monod
µ (h-1)
μm = 0.9 per h
K = 0.7 g/L
S (g/L)

Mosser
µ (h-1)
μm = 0.9 per h
KS = 0.7 g/L
S (g/L)

Modelos cinéticos para inhibición por substrato o producto
◼ Modelo para inhibición del crecimiento por alta concentración de substrato

(Modelo de Andrews o Haldane).
μ S
μ = m
(53)
S2
K + S +
S K
I

Modelo cinético para inhibición por substrato - Ejemplo
Loperena, Saravia, Murro, Ferrari & Lareo (2006). Bioresource Technology 97 2160–2165.
Modelos cinéticos para inhibición por substrato o producto
◼ Modelo para inhibición del crecimiento por alta concentración de producto.
μ S
μ = m
f (54)
S+K P
S
fP puede tener diferentes expresiones y puede usarse también para
corregir la ecuación 53 cuando existen ambos tipos de inhibición: por
substrato y por producto.
a
 P 
fP 
= 1 − 
 Pm  (55)
KP
fP = (56)
KP + P
fP = e −K P P (57)

Producción de ácido
hialurónico por Streptococcus
zooepidemicus
Comparación de modelos
cinéticos de crecimiento
microbiano
Dan & Shoparwe (2010)

3.6.2 Modelos cinéticos para la formación de producto
◼ Formación de producto asociado al crecimiento (fermentaciones de
clase 1, metabolitos primarios).
qP = α μ (58)
α es un coeficiente cinético y en particular se demuestra
que α = YP/X (ver ecuaciones 40 y 44).
◼ Formación de producto parcialmente asociada al crecimiento

(fermentaciones de clase 2, cinética mixta).
Modelo de Leudeking & Piret (1959) de dos parámetros, α y β.
qP = α μ + β (59)
◼ Formación de producto no asociada al crecimiento (fermentaciones de

clase 3, metabolitos secundarios).
qP = β (60)
3.7 Modelado de un cultivo por lotes (batch) simple
Suponemos el cultivo por lotes simple limitado solamente por un substrato y que
sigue el modelo cinético de Monod.
dX (61)
= μX
dt
X − X0
De la ecuación 3 se tiene: S = S0 − (62)
YX / S
Introduciendo en la ecuación 61, las ecuaciones 48 y 62:
dX μm (S Y + X − X)
=
0 X/S 0
X (63)
dt (K Y + S Y + X − X)
S X/S 0 X/S 0
(K S YX/S + S 0 YX/S + X 0 − X) (64)

 
X t
d X = μm d t
X
0
(S 0 YX/S + X 0 − X) X 0

Modelado de un cultivo por lotes (batch) simple
(K S YX/S + S 0 YX/S + X 0 )  X  K S YX/S  S 0 YX/S + X 0 − X 

ln  − ln   = μm t (65)
S 0 YX/S + X 0 X  S Y  
 0  0 X/S + X 0  S 0 YX/S 
◼ La ecuación da una curva X vs t de forma sigmoidea (s alargada) para el cultivo

microbiano por lotes.
◼ Para para t → , X → YX/S S0 + X0 = X∞ (ver ecuación 52).
◼ Para condiciones KS << S, la ecuación se puede simplificar y aproximar por la
ecuación 25, ln(X/X0) =  t, donde  = m.
◼ Las ecuaciones 25 y 65 permiten estimar el tiempo de fermentación.

3.8 Cinética del decaimiento microbiano
◼ El decaimiento microbiano generalmente es significativo al fin de la fase
exponencial, cuando existe agotamiento de nutrientes.
◼ Puede darse también cuando existen condiciones adversas (cambios en
las condiciones operativas, acumulación de sustancias inhibidoras, etc.)
◼ El decaimiento microbiano expresado en términos de biomasa puede

presentar dos aspectos:
◼ Muerte y lisis celular
◼ Las células consumen su propio material celular de reserva
(autoconsumo) y se denomina metabolismo endógeno.
◼ Ambos se describen usualmente como ecuaciones cinéticas de primer

orden.

Cinética del decaimiento microbiano
dX
= μX − k d X (66)
dt
◼ kd se denomina velocidad específica de decaimiento microbiano.

◼ Si el proceso es la muerte celular, kd se denomina velocidad específica
de muerte.
◼ Si el proceso es el consumo endógeno de biomasa kd se denomina
coeficiente endógeno y se denota usualmente ke.
◼ Generalmente, bajo condiciones activas de crecimiento celular, kd es
despreciable, kd << .

Modelo cinético - Ejemplo
Producción de butanol mediante fermentación ABE de jugos de sorgo dulce y caña de

azúcar por Clostridium acetobutylicum
Rochón E., Ferrari M.D. & Lareo C. (2017) Biomass and Bioenergy 98, 153-160.
3.8 Relación entre el crecimiento microbiano y el ambiente
◼ El resultado exitoso de un bioproceso implica optimizar el “binomio”

microorganismo - ambiente.
◼ Los factores ambientales inciden en la cinética y por lo tanto en los parámetros
cinéticos.
◼ Los principales factores ambientales son:
◼ Características del medio de cultivo
◼ Tipo de nutrientes (fuente de carbono, fuente de nitrógeno)
◼ Solubilidad de los nutrientes
◼ Concentración de nutrientes
◼ Presencia de inhibidores, tóxicos
◼ Clase de medio (complejo, definido, mínimo, líquido, sólido)
◼ pH
◼ Temperatura
◼ Concentración de oxígeno disuelto
◼ Otros: actividad de agua, agitación, etc.
Relación entre el crecimiento microbiano y el ambiente
Velocidad específica de crecimiento de Escherichia coli sobre diferentes

tipos de medios de cultivo
Medio de cultivo  (h-1)
Glucosa y caldo nutriente 1,2
Glucosa y sales minerales 0,82
Acetato y sales minerales 0,52
Succinato y sales minerales 0,14
Wang et al. p. 85.

Relación entre el crecimiento microbiano y el ambiente
Variación de la velocidad de crecimiento con la temperatura
Hipertermófilos
Termófilos
Velocidad de crecimiento
Mesófilos
Psicrótrofos
Psicrófilos
Temperatura (°C)
Relación con la temperatura
◼ Tanto el aumento de la velocidad como su declinación se pueden

describir por una relación tipo Arrhenius.
◼ Para la porción ascendente, se expresa:
− Ea
μ = Ae RT (67)
Ea: Energía de activación

R: constante universal de los gases
T: temperatura absoluta

Relación con la temperatura
Energía de activación para diferentes organismos
Temperatura Ea
Organismo
(°C) (kcal/mol)
Aspergillus nidulans 20 – 37 14,0
Escherichia coli 23 – 37 13,1
Pseudomoda psicrofílica 2 – 12 23,8
Klebsiella aerogenes 20 – 40 14,23
Pirt p. 140

Resumen
◼ Durante el crecimiento en cultivo bacth, la población de células exhiben diferentes
fases: retardo (lag), exponencial, estacionario, decaimiento. Es necesario identificar en
cual de ellas predomina la formación del producto de interés de modo de establecer
condiciones para favorecerla.
◼ Las variables cinéticas más usadas son las velocidades específicas: crecimiento
celular, formación de producto, consumo total de substrato, consumo de substrato
para mantenimiento celular y decaimiento celular.
◼ Existen diferentes modelos para la cinética del crecimiento celular según el grado de
estructura y segregación de la biomasa.
◼ El modelo cinético más usado para crecimiento de biomasa no estructurada ni
segregada es el de Monod, de dos parámetros. Este modelo puede ser modificado para
considerar inhibición por substrato, producto u otro inhibidor.
◼ Para la formación de productos, se dispone de modelos cinéticos asociados al
crecimiento celular, no asociados al crecimiento celular y mixtos.
◼ La velocidad de crecimiento de un microorganismo depende del medio de cultivo
usado y las condiciones ambientales usada (temperatura, pH, etc.).

Para pensar
◼ ¿Cuáles son los valores típicos de  para diferentes microorganismos: bacterias, hongos, levaduras,
microalgas calculados a partir de td?
◼ Para responder cualitativamente. 1) Grafica X vs t para el cultivo por lotes de una bacteria en condiciones
ideales. 2) Grafica luego para las siguientes situaciones: a) hay inhibición por alta concentración de
substrato, b) hay inhibición por alta concentración de producto, c) existe en el medio de cultivo un
inhibidor químico, 3) Grafica P vs t, suponiendo que la formación de producto está asociada al
crecimiento, para las mismas situaciones.
◼ Contestar verdadero o falso. Justifica la respuesta.
◼ En la fase lag no pasa nada.

◼ La velocidad específica de crecimiento aumenta exponencialmente durante la fase exponencial.
◼ El modelo de Monod solo puede describir el crecimiento en cultivos por lotes (batch).
◼ El tiempo requerido para producir biomasa en un cultivo por lotes (batch) se puede predecir solo
experimentalmente.

Para seguir pensando
◼ En un biorreactor donde se lleva a cabo un cultivo bacteriano se duplica el volumen de medio pero se
mantiene constante la concentración celular y el resto de las condiciones operativas:
◼ ¿Cómo se afectan QX,  y la productividad total de biomasa (kg/h)?

◼ Idem pero se mantiene el mismo volumen pero se duplica la concentración de biomasa.
◼ Se desea producir 100 kg de lisina por día y la QP del fermentador es 0,8 g/Lh, cuál sería el volumen
mínimo necesario?
◼ Un cultivo de levaduras crece desde 19 g/L a 54 g/L en 7 horas. Durante este período se consumieron 81 g
de glicerol por litro de medio de fermentación. Estimar la velocidad específica promedio de crecimiento y
el coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo de glicerol.
◼ Desde el punto de vista de la economía de un bioproceso: ¿cuál o cuáles son las fases del crecimiento
microbiano más importantes? ¿Qué se debería considerar para saber qué fase o fases aprovechar o tratar
de que tengan una ocurrencia mínima?

◼ Describe el modelo cinético que mejor se aplica para la producción de estreptomicina presentado en la
figura.
Prescott, Harley and Klein, Microbiology, 5th ed., 2002

◼ Deduce una ecuación para X en función de t para una bacteria cuyo crecimiento sigue el modelo logístico
(ecuación 52).
◼ Verificar con los datos experimentales disponibles la curva X vs t obtenida.
k = 0,5 h-1
X0 = 1 g/L
X∞ = 20 g/L
25
20
X (g/L)
15
10
0
0 5 10 15 20 25
Tiempo, h

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Estequiometría y

◼ Describir crecimiento microbiano en función del tiempo de cultivo

IIQ – Dpto. Bioingeniería Ingeniería Bioquímica 2022-03-08 3

Los requisitos para el crecimiento microbiano son:

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◼ Las medidas más usadas de la cantidad de microorganismos son el número

◼ No existe necesariamente una relación proporcional entre la biomasa y el

◼ En el caso de cultivos miceliales (hongos, actinomicetos), los

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◼ La biomasa y el número de células que interesan determinar son los

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Lista parcial métodos para cuantificar el crecimiento microbiano

◼ Recuento de colonias crecidas en placa

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Los parámetros definidos en esta sección se refieren básicamente a

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Se denominan también actividades o cocientes metabólicos

Katoh & Yoshida, Biochemical Engineering, p. 48, 2009.

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 El grado de duplicación es el número de veces (n) que se duplica una

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Tipo de organismo td (h)

Bacterias 0,3 – 2,0

Levaduras 1,0 – 4,0

Hongos filamentosos 2,0 – 4,0

Células animales (in vitro) 20 - 40

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◼ En caso de tratamiento biológico de efluentes se puede definir una

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X Variaciones de X, ln X,  y rX con el tiempo

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◼ La formación de producto y el crecimiento están relacionados con la

Se define velocidad específica de consumo de substrato para

consumo de substrato para mantenimie nto

Valores de velocidad específica de consumo de glucosa para

Valores típicos de velocidad específica de consumo de

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◼ Definiendo YP/X como el coeficiente de rendimiento de producto por

◼ Para la formación de producto:

◼ Cuando no hay formación de producto, qp = 0 y las ecuaciones 36, 38 y

 Si los consumos de substrato para mantenimiento celular y formación

Clase 1 Clase 2 Clase 3

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Clase 1 Clase 2 Clase 3

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Bailey & Ollis, 2nd. Ed. pp. 422 – 423.

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Producción de proteasa por Bacillus subtilis IIQDB32

AP: actividad proteolítica

Loperena, Belobrajdic, Ferrari, Varela, Vázquez & Siñeriz (1999)

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Diferentes representaciones usadas de la población celular para la

No estructurado Las células se describen como un todo homogéneo.

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Diferentes modelos según representación de la población celular

La población celular se La población se describe

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◼ Modelos más simples idealizan a la población celular como:

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