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SEMINARIO I
ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
1
Si llamamos “x” a la fracción de C en la biomasa y tenemos en cuenta que
para nuestro m.o. promedio x = 0,465, obtendríamos el mismo valor anterior
haciendo el siguiente cálculo: 12/0,465 = 25,8. Estrictamente hablando, para
conocer la cantidad de biomasa que corresponde a n C-moles de biomasa debemos
conocer su composición elemental y en términos generales el factor de conversión
12
resulta ser: n. g de biomasa.
x
De forma análoga a como lo hicimos con la biomasa, podemos definir 1 C-
mol de sustrato (entiéndase por sustrato fuente de carbono y energía, FCE), 1 C-mol
de fuente de N, etc. Como ejemplo, para la glucosa: C 6H12O6, 1 C-mol de glucosa
estará representado por CH2O y pesará 30 g, y para el etanol, 1 C-mol de etanol
(CH3O0,5) pesará 23 g.
Otro concepto que debemos introducir es el de “grado de reducción” o “grado
de reductancia”, el cual será de gran utilidad en el momento de plantear nuestros
balances de materia y energía.
Tomemos como ejemplo las siguientes reacciones de oxidación:
= 4 + a - 2b - 3c (1)
CH i O j N k
h h h
2
empleados en balances de materia y energía en aquellos casos en que se
desconoce la composición de la biomasa sin temor de incurrir en errores groseros
de cálculo. Otras regularidades observadas en el cultivo de m.o. es que el calor de
reacción por mol de e- transferidos al O2 es relativamente constante para la
oxidación de una amplia variedad de moléculas orgánicas y corresponde a 27
Kcal/mol e- disponibles transferidos al O2.
Estamos ahora en condiciones de plantear una serie de balances de materia
y energía, para lo cual trataremos al cultivo de un m.o. como si fuera una reacción
química simple.
r = velocidad de
1C mol S + a mol fte de N + b O2 reaccion
yx X y p prod + CO2 + w H2 O + q (calor )
C - mol de X
yx C - mol de fte. de C y E lo mismo para yp e yCO2.
Generalizando:
yx + yp + yCO2 1 (2)
s + (-4)b = yx . x + yp . p (3)
4b yx . yp .
1
x p
(4)
s s s
o lo que es lo mismo
++=1 (5)
4b
donde = (fracción de e- disponibles del sustrato transferidos al O2)
s
y .
= x x (fración de e- disp. del s transferidos a la biomasa)
s
y p . p
= (fracción de e- disp. del s transferidos al producto)
s
3
Estos dos balances obedecen directamente al principio de conservación de la
masa y la energía, en el primero de ellos, no puede haber entre los productos más
carbono del que un c-mol de sustrato puede aportar y el en el caso del segundo, los
electrones disponibles del sustrato deben ir obligadamente a los distintos productos.
Si asumimos, como ya se mencionó, que el calor de reacción por mol de e -
disponibles transferidos al oxígeno es constante para un importante n de moléculas
orgánicas, el primer término de la ecuación (4) nos da la fracción de energía del
sustrato que evoluciona como calor. Si llamamos qo a esa constante con qo = 27
Kcal/mol e- disponibles transferidos al O2, el calor generado en la ecuación l’ vendrá
dado por:
4
m.o. para obtener la energía necesaria para llevar adelante sus funciones
metabólicas.
por consiguiente:
x P
SE = S + X .. P.
s s
S E x p
fE = 1 Yx Yp fE : fracc. de FCE destinada a la obtención
S s s
de E.
fE = 1 - yx - yp = y CO 2 (11)
Tomemos: Biomasa = C H a1 O b1 N c1
Sustrato = C H a 2 O b2 N c2
Producto = C H a 3 O b3 N c3
5
Fuente de N = C d 4 H a 4 O b4 N c4
C1
x = 4 + a1 - 2 b1 - 4d 4 a 4 2 b 4
C4
C2
s = 4 + a2 -2 b2 - 4d 4 a 4 2 b 4 "
C4
C3
p = 4 + a3 - 2 b 3 - 4d 4 a 4 2 b 4 "
C4
a4 b C d a b
N 4 2 4 4 4 4 4 2 4
d4 d 4 C4 d 4 d 4 d4
Ejemplo 1:
En un cultivo continuo de Saccharomyces cerevisiae se encontró que por
cada C-mol de biomasa formada se consumieron 4,26 C-moles de glucosa, 0,35
moles de O2 y se formaron 1,92 C-moles de etanol. La fuente de N fue NH3 y la
glucosa; a fuente de C y energía. La composición elemental es CH 1,8O0,56N0,17.
Verifique si el consumo de O2 es correcto.
x = 4,17 p = 6 s = 4 (C2H6O)
1 1,92
yx = = 0,235 yp = = 0,45
4,26 4,26
s - 4b = yx . x + yp . p
mol de O 2
b = (s - (yx . x + yp . p) ) ¼ = 0,079
C - mol de S
mol de O 2
Valor experimental = 0,35
C - mol de biomasa
mol de O 2 b
Verificación: 0,34
C - mol de biomasa y x
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Ejemplo 2:
Un microorganismo crece anaeróbicamente en un medio con glucosa como
fuente de C y energía; NH3 como fuente de N y NO3- como aceptor de electrones. El
yx = 0,6 C-mol/C-mol. El NO3- es reducido por el microorganismo a N2. Cuánto NO3-
será necesario para obtener 3,5 g de biomasa/l?
mol de NO 3 n
será pues 0,49 , por lo tanto se necesitarán:
C - mol de biomasa y x
3,5 g / l
x 0,49 mol de NO 3 / l = 0,066 mol de NO 3 / l
25,8 g / l