GUA DE EJERCICIOS BIO-REACTORES

Fundamentos de Ingeniera Bioqumica

IWQ-250

Profesores: Sergio Almonacid M. y Ricardo Simpson R.

Mayo, 2015
SAM/RS

Estimados alumnos,
Esta gua incluye ejercicios resueltos y ejercicios propuestos (incluyendo sus respuestas). En el
punto I se presentan 12 ejercicios cuya resolucin detallada se entrega al final de estos. Luego, en
el punto II se presentan 34 ejercicios propuestos, varios de ellos de certmenes y controles
anteriores y todos con sus respectivas respuestas.
Agradeceremos todo tipo de observaciones, alcances y recomendaciones y de esta forma
esperamos poder mejorar esta gua para sta y futuras generaciones de ingenieros de procesos,
qumicos y ambientales.
I EJERCICIOS (Resoluciones a continuacin del ejercicio 12)

1. a) El ciclo celular es un conjunto ordenado de sucesos que conducen al crecimiento de la clula

y la divisin en dos clulas hijas.

a) Demuestre, matemticamente, que la fisin celular se puede representar por una cintica de
primer orden (ecuacin 1), teniendo en consideracin que el tiempo de duplicacin celular es
constante a travs del tiempo:





 

(1)

Donde:
x : Concentracin celular (g/L)
t : Tiempo (h)
: Velocidad especfica de crecimiento (h-1)
SAM/RS

b) Qu relacin hay entre el tiempo de duplicacin (o de generacin) tD y la velocidad especfica

de crecimiento, ?

2. Demuestre que para un bio-reactor simple (1 etapa), operado en estado estacionario, se cumple
la siguiente relacin (asumiendo x0 = 0): = D; (donde D es la velocidad de dilucin)

3.- Un bio-reactor continuo de una etapa para la produccin de clulas es operado en estado
estacionario.
a)
Demuestre analticamente que para un bio-reactor de volumen V1 la concentracin
celular, en estado estacionario, es mayor que para un bio-reactor de volumen V2 (donde V1 > V2).
b)
Con la idea de maximizar la produccin de clulas, cmo operara dos bio-reactores
continuos de volumen V, en serie o en paralelo?, justifique su respuesta con un ejemplo
cuantitativo.

4. Estudios realizados en el laboratorio mostraron que el cultivo continuo de Azotobacter

winelandi presenta una velocidad especfica de crecimiento mxima de 0,45 h-1 y un Ks de 28
mg/L. Si se opera un bio-reactor de 50 L, con una velocidad de dilucin de 0,32 h-1, Yx/s = 0,36
g/g y una concentracin de sustrato en la alimentacin de 5 g/l; determinar:
a)
b)

Concentracin celular en estado estacionario.

Concentracin de sustrato limitante en el efluente.

SAM/RS

5.- En un cultivo por lotes alimentados (C.L.A.) se obtuvieron los siguientes resultados:

Tiempo (h)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9

XV (g)
210
277
364
479
631
831
1.095
1.442
1.898
2.500

Las caractersticas de la bacteria cultivada son M = 0.4 h-1, y Ks = 0.01 g/l (para el nutriente
limitante utilizado).
a) Determine el tipo de alimentacin usado sabiendo que SF (concentracin de sustrato en la
alimentacin) es constante.
b) Calcule las condiciones iniciales de concentracin de sustrato y clula si el volumen inicial era
de 140 L.

6. Una nueva cepa de levadura est siendo considerada para la produccin de biomasa. Para
caracterizar la cepa de levadura se realizaron experimentos en un bio-reactor de una etapa. En la
experimentacin se utiliz una concentracin de sustrato en la alimentacin del bio-reactor de
800 [mg/L], operndose con exceso de oxgeno, pH de 5,5 y una temperatura de 35 [C]. Los
resultados obtenidos en la experimentacin se presentan en la siguiente tabla:
D
[1/h]
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7

S
[mg/L]
16,7
33,5
59,4
101
169
298
702

X
[mg/L]
366
407
408
404
371
299
59

a)
Cules son los valores de mx. y Ks?
b)
Encuentre una expresin para la productividad celular DX.
c)
Cul es la velocidad de dilucin (D) que maximiza la productividad celular? Compare el
valor terico con el que se obtiene de la grfica.

SAM/RS

7. Los siguientes datos fueron obtenidos en la oxidacin de pesticidas presentes en agua residual.
Los datos fueron obtenidos mediante una mezcla de microorganismos en una operacin continua
en una laguna de aireacin (tipo quimiostato) donde el pesticida es el reactivo limitante.
D
[1/h]
0,08
0,11
0,24
0,39
0,52
0,70
0,82

[S] (Pesticida)
[mg/L]
15
25
50
100
140
180
240

Si usted tiene un residuo lquido a tratar de 0,5 [m3/s] que contiene 500 [mg/L] de pesticida y
requiere reducir la concentracin del pesticida en un 95%:
a)
Cul debe ser la tasa de dilucin y el volumen de la laguna de aireacin?
b)
Cul es la masa microbiana [Ton] producida por da de operacin? Considere que YX/S es
0,6 [g/g]

8. La tasa de crecimiento especfico para un microorganismo cultivado en un quimiostato,

satisface la siguiente expresin:
=

mS
KS + S +

IK S
KI

De qu tipo de inhibicin se trata?

Para los siguientes valores:
S0 = 10 [g/L]
KS = 1 [g/L]
YX/S = 0,1 [gcel./gsust.]
x0 = 0 [g/L]
KI = 0,01 [g/L]
m = 0,5 [1/h]
a)
Determine x y S como funcin de D para I = 0 [g/L]
b)
Cuando se agrega inhibidor al quimiostato (I = 0,05 [g/L]), determine la concentracin de
sustrato (S) a la salida del sistema y la concentracin de clulas como funcin de D.
c)
Determine la productividad celular en funcin de D.
d)
Analice el efecto del inhibidor en dx/dt.
e)
Cul ser el volumen del reactor, si ste debe procesar un flujo de 570 [L/h] a la mxima
productividad celular?

SAM/RS

9. Los siguientes datos fueron obtenidos para evaluar el efecto de la temperatura en la produccin
fermentativa de cido lctico, mediante el uso de Lactobacillus delbrueckii. De estos datos estime
los parmetros de Arrhenius para el sistema descrito:
T
[C]
40,4
36,8
33,1
30,0
25,1

[1/h]
0,0140
0,0112
0,0074
0,0051
0,0036

10. La bacteria Pseudomona sp. tiene una tasa mxima especfica de crecimiento de 0,4 [1/h],
cuando es cultivada en acetato. La constante de saturacin usando este sustrato es 1,3 [g/L], y el
coeficiente de rendimiento de clulas en acetato es de 0,46 [g cl./g acetato]. Si se opera este
sistema como un quimiostato, con un S0 de 38 [g/L], realice el siguiente anlisis:
a)
b)
c)
d)
e)

Cul es la tasa de dilucin crtica?

Cul es la concentracin de clulas cuando la tasa de dilucin es la mitad de la crtica?
Cul es la concentracin de sustrato cuando la D es un 80% de la crtica?
Cul es la productividad celular a la D en c)?
Encuentre Dpt para la productividad celular, qu porcentaje de Dcrtico es ste?

11. En un quimiostato en que la cintica de crecimiento celular obedece la ecuacin de Monod, el

sustrato residual es independiente de la concentracin de sustrato inicial o de ingreso al
quimiostato (S0). Usted observa que en su quimiostato, un incremento en S0 resulta en un
incremento en la concentracin de salida o residual. Un amigo le sugiere que considere la
ecuacin de Contois en lugar de Monod:
=

mS
K XS X + S

a)
Derive una expresin para S en trminos de D, m, KXS y X para un quimiostato en estado
estacionario.
b)
Derive un expresin para S en funcin de S0, D, KXS, YXS y m.
c)
Si S0 aumenta al doble, en cunto aumenta S?
12. Se tiene un fermentador operando en cultivo por lotes alimentado, donde la tasa especfica de
crecimiento celular se describe mediante la ecuacin de Monod. Se tiene como objetivo
conseguir 600 [Kg] de clulas secas. Se pide para las siguientes condiciones:
Sf = 90 [g/L] constante
KS = 0,055 [g/L]
YX/S = 0,44 [gcel/ gsust]
X0 = 6 [g/L]

SAM/RS

m = 0,46 [1/h]
= 0,33 [1/h] constante
V0 = 10.000 [L]

a)
Obtenga una expresin para el flujo de alimentacin F en el tiempo, en funcin de las
variables anteriores.
b)
Obtenga el tiempo de alimentacin [h].
c)
Obtenga la concentracin de nutriente limitante en el fermentador [g/L].
d)
Calcule el volumen final en el fermentador [L].
e)
Obtenga el valor de F al inicio de la fermentacin (t = 0 [h]).
f)
Obtenga el valor del flujo, F, transcurrido la mitad del tiempo de proceso [L/h].

SAM/RS

RESOLUCIN (ejercicios 1 al 12)

1. a) Unicellular organisms (e.g. bacteria) duplicate in a process called cell division. Each cell
divides into two new cells within a certain time, called generation time (tg). Schematically, we
can represent this division process as depicted in the following Figure:

Therefore, if we have N0 bacteria at time = 0, then after 1 generation (1tg) we will have 2N0
bacteria, and after 2 generations (2tg) we will have 4N0 bacteria, and so on, implying that after
each generation time, the bacterial population is duplicating. Putting this information in a table,
we get:
Time
0
1tg
2tg
3tg

ntg

Bacteria population
N0 = 20N0
2N0 = 21N0
4N0 = 22N0
8N0 = 23N0

N = 2n N 0

In addition, the number of generations (n) is related to time (t) and generation time (tg) as
follows:
n=

t
(for t = 0, n = 0; for t = 1tg, n = 1, and so on)
tg

Then replacing n from Equation in the expression N = 2nN0, we get:

t
tg

N = 2 N0

Now arranging the previous Equation 9.9, we can obtain:

N
ln
N0

t
= ln 2
tg

SAM/RS

By definition, ln2/tg = (specific growth rate), thus the number of bacteria after time t can be
expressed by the exponential equation as follows:
N = N 0 e t

b) tD = (Ln2)/
2. De un balance de clulas se obtiene:
  +  

( )

(2)



Dado que el sistema est en estado estacionario y, adems x0 = 0, entonces:



 +   0

(3)

De la ecuacin (3) se obtiene: = F/V, y por definicin F/V = D, entonces:

=D
3. a) De la expresin:

x = y x / s (S0

DK S
)
max . D

Considerando que D = F/V, entonces:

x = y x / s ( S0

FK S
)
V max . F

Donde es posible apreciar que a mayor V (F = constante), mayor es la concentracin celular, x.

Por lo tanto si V1 > V2, entonces x1 > x2.
b) Es mejor en serie que en paralelo. No olvide desarrollar un ejemplo numrico. Si asumimos
que el flujo de alimentacin es F y se opera en serie la productividad la productividad ser Dx2.
Al operar en paralelo ser Dx1. Se puede demostrar que x2 > x1.
4. a) x = 1,775 g/L; b) S = 68,92 mg/L
5. a) Alimentacin exponencial (note que al graficar XV versus el tiempo se comprueba que es
una funcin exponencial).
b) xo = 1,5 g/L ; So = 0,022 g/L

SAM/RS

6. a) Para el quimiostato, la tasa especfica de crecimiento celular puede ser expresada por la
ecuacin de Monod:
=

m [S ]

(1)

K S + [S ]

Sin embargo, en estado estacionario, el flujo de clulas que salen del quimiostato, tambin
conocido como tasa de dilucin, puesto que se asume mezclado perfecto en el reactor es igual a la
tasa de crecimiento especfica en ste, es decir, D = , por lo que la ecuacin de Monod puede ser
re-escrita como:
D=

m [S ]

(2)

K S + [S ]

A partir de los valores entregados en la tabla, se puede determinar mx y KS mediante regresin

no lineal o por regresin lineal al graficar los inversos de D y [S].

Regresin no lineal:

m = 0,8
h
mg
K S = 102,3

Regresin lineal:

12,00
10,00
8,00
1/D

1 KS 1
1
=
+
D m [S ] m

6,00
4,00

1/D
[h]
10,00
5,00
3,33
2,50
2,00
1,67
1,43

1/[S]
[L/mg]
0,060
0,030
0,017
0,010
0,006
0,003
0,001

2,00
0,00
0,000

0,010

0,020

0,030

0,040

0,050

0,060

0,070

1/[S]

De la ecuacin de la recta se extrae el intercepto y de aqu la velocidad mxima. Luego con la

pendiente y mx se obtiene KS:

1
= 1,25 m = 0,8
h

KS

K
5,00 2,00
mg
= 125,3 = S K S = 100,3

0,030 0,006
0,8
L

b) Se define productividad celular como: DX

SAM/RS

10

Tomando las ecuaciones que describen el comportamiento del quimiostato:

(3)

X = YX /S ( S0 S )
KS D
m D

[S ] =

(reordenando la ecuacin (2))

(4)

Luego, multiplicando la ecuacin (3) por D y reemplazando la ecuacin (4) en sta, se obtiene
una expresin para la productividad celular DX:
X = YX /S (S0 S )
DX = DYX /S ( S0 S )

K D
DX = DYX /S S0 S
m D

(5)

c)
Para obtener la tasa de dilucin terica que maximiza la productividad celular (Dptimo), se
deriva la ecuacin (5) en funcin de D, se iguala a cero y se despeja Dptimo:
d ( DX )
dD

KSD
KS
d
DYX /S S0
= 0 Dptimo = m m

dD

D
S

m
0 + KS

KS
1
= 1,07
Dptimo,1 = m + m
S
+
K
h (se

0
S

KS
1

Dptimo,2 = m m S + K = 0,53 h
0
S

descarta, no puede ser mayor que max.)

Si se observa la grfica que representa el comportamiento del quimiostato:

[S]
[mg/L]
16,7
33,5
59,4
101
169
298
702

[X]
[mg/L]
366
407
408
404
371
299
59

D[X]
[mg/L h]
36,6
81,4
122,4
161,6
185,5
179,4
41,3

900
800
700

Concentracin

D
[1/h]
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7

600

[S]

500

D[X]

400

[X]

300

Dcrit

200

S0

100

Dpt

0
0

0,2

0,4

0,6

0,8

Ahora, Dptimo, se extrae desde la grfica siendo su valor es aproximadamente igual a ~ 0,56 [1/h].
Finalmente, se puede decir que los valores encontrados son casi iguales, siendo la principal causa
de diferencia el error respectivo de valores obtenidos experimentalmente y la grfica de stos.

SAM/RS

11

7.
a) Anlogo al ejercicio 6, se grafica los inversos y se obtiene los parmetros para la relacin
del quimiostato en estado estacionario:
14,00

1 KS 1
1
=
+
D m [S ] m

y = 186,5x + 0,606
R = 0,987

12,00

1/D

10,00
8,00
6,00
4,00

1/D
[h]
12,50
9,09
4,17
2,56
1,92
1,43
1,22

2,00

1/[S]
[L/mg]
0,067
0,040
0,020
0,010
0,007
0,006
0,004

0,00
0,000

0,010

0,020

0,030

0,040

0,050

0,060

0,070

1/[S]

1
= 0,606 m = 1,65

h
KS D

307,8D

=
S =

D
1,65
D
KS
KS
mg

m
= 186,5 =
K S = 307,8

m
1,65
L
1

Se quiere abatir la concentracin en un 95%

(1)

S0 S
mg
= 0,95 S = 25

S0
L

Se reemplaza dicho valor en la ecuacin (1) y se despeja la tasa de dilucin:

S = 25 =

307,8D
1
D = 0,12
1,65 D
h

Finalmente se despeja el volumen a partir de la definicin de tasa de dilucin:

D=

m3
F
F
s 1
V = = 0,5 3600
[h]
V
D
s
h 0,12

V = 15.000 m 3

b) Se determina la masa microbiana utilizando el coeficiente de rendimiento:

mg clulas
mg sustrato
mg clulas
X = Y X / S ( S0 S ) = 0,6
( 500 25 )
= 285

mg
L
L

sustrato

m3
mg

s
L 1
Masamicrobiana = 285 clulas 0,5
3600 24 da 1000 m3 109
L
s

SAM/RS

Tonclulas

mgclulas

12

Ton
Masamicrobiana = 12,3

da

8. Por la forma de la expresin que describe la tasa especfica de crecimiento celular, se deduce
que es una inhibicin del tipo competitiva.
a) Para determinar S en funcin de D, se realiza el balance de clulas para el quimiostato:
Acumula = Entra Sale + Genera
d ( XV )
dt

Dado que x0 = 0 [g/L],

= FX 0 FX + XV

d(X)

dt
d(X)

dt

, pero V = cte

F
( X0 X ) + X = D ( X0 X ) + X
V

= DX + X = X ( D )

Asumiendo estado estacionario d ( X ) = 0 = {

X ( D) = D
dt

(1)

X 0

Si [I] = 0 [g/L], entonces la tasa especfica de crecimiento celular puede ser representada por la
ecuacin de Monod:
=

Pero = D ,
Reordenando, se tiene:

=D=

mS
KS + S

m S

(2)

KS + S

S=

DK S
m D

(3)

Reemplazando los parmetros del enunciado en la ecuacin (3), se obtiene:

S=

D
0,5 D

(4)

Ahora, para determinar X en funcin de D, se realiza el balance de materia para el sustrato:

Acumula = Entra Sale Consume
d ( SV )
dt

SAM/RS

= FS0 FS

d (S )
dt

X
YX / S

, pero V = cte

F
X
X
= D ( S0 S )
( S0 S )
V
YX / S
YX /S

(5)

13

Introduciendo la ecuacin (1) en (5):

d (S )
dt

= D ( S0 S )

DX
YX / S

Asumiendo nuevamente estado estacionario y considerando que:

dX
dS
=
=0
dt
dt

d (S )
dt

= 0 = D ( S0 S )

DX
X
= D

{ ( S0 S )
YX /S D 0
YX /S
X = YX / S ( S0 S ) (6)

Reemplazando los parmetros del enunciado y la ecuacin (4) en la ecuacin (6), se

obtiene:
D

X = 0,1 10
0,5
D

(7)

b) Como se est trabajando en estado estacionario, los balances de materia anteriores son
vlidos. Sin embargo, vara la definicin de la tasa especfica de crecimiento celular
puesto que esta vez existe inhibidor, por lo que la ecuacin (2) se escribe de la siguiente
manera:
=D=

mS
IK
KS + S + S
KI

mS

I
KS 1 + + S
KI

(8)

Reordenando la ecuacin (8) para despejar S:

I
KS 1 + D
KI
S=
m D

(9)

,y reemplazando los parmetros del enunciado en la ecuacin (9) se tiene:

0,05
1 1 +
D
0,01

S=
0,5 D

S=

6D
0,5 D

(10)

Finalmente, sustituyendo la ecuacin (10) y los valores de S0 e YX/S en la ecuacin (6) se

obtiene la expresin para x:

SAM/RS

14

6D

X = 0,110
0,5 D

(11)

c) Se define la productividad celular como:

(12)

DX

Por lo que multiplicando la ecuacin (11) por la tasa de dilucin, se consigue una
expresin para sta:
6D

DX = 0,1D 10
0,5 D

d) Se define la variacin de la concentracin de clulas en el tiempo como:

dX
= X
dt

(13)

Dado que para el quimiostato operando en estado estacionario se cumple que = D , la

ecuacin (13) se transforma en:
dX
= DX
dt

es decir, la variacin de la concentracin de clulas en el tiempo es equivalente a la

productividad celular.
Si se hace una comparacin para dx/dt con y sin inhibidor:
dX
6D

= 0,1D 10
0,5
dt
D

14444244443

dX
D

= 0,1D 10
0,5
dt
D

14444244443

[I ]>0

[I ]=0

Se aprecia que cuando existe inhibidor, ser menor la variacin de clulas en el tiempo
puesto que el coeficiente que acompaa a la tasa de dilucin (6 > 1) es mayor.
e) Si se observa una grfica representativa (nota: valores de los ejes no estn relacionados
con el ejercicio) de productividad celular en funcin de la tasa de dilucin:
250

DX mx

200

DX

150
100
50
0
0

0,1

0,2

0,3

0,4
D

SAM/RS

0,5

0,6

0,7

0,8

Dpt Dcrt

15

se puede concluir que para obtener la productividad mxima se debe operar a la tasa de
dilucin ptima, por lo que se derivar la funcin de productividad e igualar a cero para
obtener su mximo:
6D
0,6D

DX = 0,1D 10
=D

0,5 D
0,5 D

d ( DX )
0,6D 0,6D 2

= 1

2
dD
( 0,5 D )

d ( DX )
dD

= 0 1,6D 2 1,6D + 0,25 = 0

(14)

De la ecuacin (14) se obtienen dos posibles valores para la tasa de dilucin ptima:
D1 = 0,194 [1/ h ]

D2 = 0,806 [1/ h ]

Para establecer cul de estos valores es el adecuado, se determinar la tasa de dilucin

crtica (Dcrt) que es el valor de D cuando la productividad y la concentracin de clulas es
cero. Tambin, Dcrt corresponde a la tasa de dilucin donde la concentracin de sustrato
es la de entrada o inicial (S0):
Dcrt = D S =
0

mS0
IK
KS + S0 + S
KI

0,5 10
0,05 1
1 + 10 +
0,01

1
Dcrt = 0,31
h

Dado que Dpt < Dcrt (vase grfico representativo) Dpt = 0,194 1

h

Finalmente, se despeja el volumen del reactor desde la tasa de dilucin:

D=

F
F
1
L
V = = 570
[h ]
0,194
V
D
h

V = 2938 [L ]

9. La ecuacin de Arrhenius viene descrita por:

= k 0e

Ea
RT

(1)

Por lo que, para determinar sus parmetros, una manera prctica es linealizar los datos
entregados mediante la siguiente expresin, obtenida luego de aplicar logaritmo natural a la
ecuacin (1):
SAM/RS

16

Ln ( ) = Ln ( k0 )

Ea 1
R T

(2)

Se tiene entonces la siguiente grfica:

1/T
[1/K]
0,00319
0,00323
0,00327
0,00330
0,00335

-4,00

Ln()
--4,27
-4,49
-4,91
-5,28
-5,63

0,00315
-4,20

0,00320

0,00325

0,00330

0,00335

0,00340

-4,40
-4,60
-4,80

Ln()

T
[K]
313,6
310,0
306,3
303,2
298,3

-5,00
-5,20

y = -8715,x + 23,55
R = 0,988

-5,40

Ea
Ea
J
R = 8,314 = 8715 Ea = 72457 mol

Finalmente,

Ln ( k ) = 23,5 k = e 23,5 1
0
0
h

-5,60
-5,80
-6,00

1/T

NOTA: Obtenga los parmetros k0 y Ea a travs de una regresin no lineal y compare los
resultados.

10.
a) Como ya se ha demostrado, para un quimiostato operando en estado estacionario, la tasa
de dilucin crtica viene dada por:
D==

S
mS
0,4 38
Dcrtico = m 0 =
KS + S
K S + S0 1,3 + 38
1
Dcrtico = 0,39
h

b) Para determinar la concentracin de clulas, primero se determina la concentracin de

sustrato para la tasa de dilucin especificada y luego este valor se reemplaza en la
definicin de concentracin de clulas a partir del coeficiente de rendimiento.
Dcrtico 0,39
1
=
= 0,19
2
2
h
DK S
0,19 1,3
g
S =
=
= 1,2
m D 0,4 0,19
L

D=

X = YX / S (S0 S ) = 0,46 ( 38 1,2 )

g

X = 17 clulas
L

c) Se calcula la concentracin de sustrato anlogamente a la alternativa anterior:

1
D = 0,8Dcrtico = 0,8 0,39 = 0,31
h

SAM/RS

17

S =

DKS

m D

0,31 1,3
g
= 4,4
0,4 0,31
L

d) Para obtener la productividad celular, se establece la concentracin de clulas y

posteriormente se multiplica este valor por la tasa de dilucin:
g

X = YX /S ( S0 S ) = 0,46 ( 38 4,4 ) = 15,4 clulas

L

DX = 0,31 15,4
g

DX = 4,8 clulas
Lh

e) Como ya se vio, la tasa de dilucin ptima se puede definir como:

KS
1,3
= 0,4 0,4
38 + 1,3
S0 + K S

Dptimo = m m
1
Dptimo = 0,33
h

, y el porcentaje es:
Dptimo
Dcrtico

0,33
100 = 84,6%
0,39

11.
a) Anlogo al procedimiento descrito en el ejercicio 3, para determinar S se realiza un
balance de materia para la concentracin de clulas:
Acumula = Entra Sale + Genera
d ( XV )
dt

Asumiendo que x0 = 0,

= FX 0 FX + XV

d(X)

dt
d(X)

dt

, pero V = cte

F
( X0 X ) + X = D ( X0 X ) + X
V

= DX + X = X ( D )

, y dado que se opera en estado estacionario d ( X ) = 0 = {

X ( D) = D
dt

(1)

X 0

Por lo que, se puede despejar S mediante el reordenamiento de la ecuacin de Contois

combinada con la ecuacin (1):
=D=

SAM/RS

mS
K XS X + S

DK XS X
S=
m D

(2)

18

b) Se desarrolla el balance de materia para el sustrato, para obtener una expresin para X y
as obtener S sin que dependa de x:
Acumula = Entra Sale Consume
d ( SV )
X
, pero V = cte
= FS0 FS
V
dt
YX / S
d (S ) F
X
X

= ( S0 S )
= D ( S0 S )
dt
V
YX / S
YX /S

(3)

Introduciendo la ecuacin (1) en (3):

d (S )
dt

= D ( S0 S )

DX
YX / S

Asumiendo estado estacionario y considerando que:

dX
dS
=
=0
dt
dt

d (S )

DX
X
= 0 = D ( S0 S )
= D

{ ( S0 S )
dt
YX / S D 0
YX /S
X = YX / S ( S0 S )

(4)

Reemplazando la ecuacin (4) en la ecuacin (2):

S =

Sea R = DK XSYX /S ,

S =

DK XSYX /S ( S0 S )

m D

RS0
RS

m D m D

RS0
R
S 1 +
=
m D m D
R

S = S0 m
1 + R

m D

(5)

c) A partir de la ecuacin (5), si se define un nuevo parmetro R como:

R

D
m

R' =
1 + RS

m D

La concentracin de sustrato queda descrita por:

S = S0R '

SAM/RS

19

Donde se aprecia claramente que si S0 se duplica, S tambin lo hace.

t
12. a) F = X 0V0e
YX / S ( Sf S )

b)
c)
d)
e)
f)

t = 7,0 [h]
S = 0,14 [g/L]
V = 23.658 [L]
F(0) = 501 [L/h]
F = 1.584 [L/h] a la mitad del proceso.

SAM/RS

20

II EJERCICIOS PROPUESTOS
1.- Un bio-reactor continuo se opera con un volumen de trabajo de 120 L y un flujo de
alimentacin de 20 L/h. La poblacin bacteriana presenta un tiempo de duplicacin mnimo de
3,15067 h y un Ks de 1 g/L. El rendimiento expresado en g de clulas por g de sustrato se ha
estimado en 0,28. Ensayos preliminares hacen recomendable trabajar a una velocidad de dilucin
igual al 82% del valor crtico*.
* Velocidad de dilucin crtica, D*= MSo/(So + Ks)
So : Concentracin de sustrato en la alimentacin (g/L)
M : Velocidad especfica mxima (h-1)
Recuerde: = Ln2/tD, donde tD es el tiempo de duplicacin.
a)
b)
c)
d)
e)

Cul es la velocidad especfica mxima, M? 0,22 h-1

Cul es la concentracin de sustrato en la alimentacin? 12,136 g/L
Cul es la concentracin de sustrato en la descarga? 3,125 g/L
Cul es la concentracin celular en estado estacionario? 2,523 g/L
Cmo cambian las respuestas b) y c) si el flujo de alimentacin se disminuye a 15 L/h?
2,256 y 1,316 g/L

2.- Formule los balances de clulas y sustrato en estado no estacionario para el esquema que se
presenta en la siguiente figura.

SAM/RS

21

R:

SAM/RS

22

3.- Un bio-reactor del tipo Fed Batch (cultivo por lotes alimentados) se opera de tal forma que la
concentracin de sustrato se mantenga constante durante la operacin (S*= 2 g/L).
Datos:
S0 = 20 (g/L); X0 = 2 (g/L); V0 = 2000 (L); = 0,4 (h-1); YX/S = 0,4 (g/g)
a) Cul es la concentracin de clulas despus de 4 horas de fermentacin? 4,72 g/L
b) Cul es el volumen de fermentacin despus de 4 horas de operacin? 4196,3 L
c) Si se realizara una fermentacin batch (por lotes) con la misma concentracin
inicial, cul sera la concentracin despus de 4 horas de fermentacin? 9,9 g/L
d) Compare sus respuestas a las preguntas formuladas en las letras a) y c) y explique las
diferencias. Parece extrao el resultado, dado que en ambos caso la velocidad
especfica de crecimiento fue 0,4 h-1. La explicacin es que el volumen final en el
C.L.A. es mayor. Se puede comprobar que la masa celular es la misma!,
COMPRUEBELO.
4.- a) Formule los balances de clulas y sustrato en estado estacionario para el esquema que se
presenta en la siguiente figura.
b) Si S0 = 20 (g/L), M = 0,4 (h-1); KS = 0,5 (g/L); D = 0,2 (h-1); YX/S = 0,5 (g/g), entonces calcule
las condiciones de estado estacionario para el primer bio-reactor, es decir: X1, S1, y 1, y deje
expresadas las ecuaciones que permitan calcular X2, S2, y 2
F
S0

II

V, X1, S1

V, X2, S2

F
X2

F
X1

S2

S1

a) Balance de clulas I
Balance de sustrato I

:  +    
 
:      
/

Balance de clulas II
Balance de sustrato II

:   +   


:     

c) x1 = 9,75 g/L; S1 = 0,5 g/L; = 0,2 h-1

,  ,  +    (1)

,  ,  ,  
(2)
!= 0,4S2/(S2+0,5)

SAM/RS

(3)

23

5.- Un bio-reactor continuo de dos etapas se opera con un volumen de trabajo de 10 L (cada etapa) y un
flujo de alimentacin de 4 L/h con una concentracin de sustrato de 22 g/L en la primera etapa. La
poblacin bacteriana presenta una velocidad especfica de crecimiento mxima de 0,6 h-1 y un Ks de 1 g/L.
El rendimiento expresado en gramos de clulas por gramo de sustrato consumido se ha estimado
experimentalmente en 0,5 g clula/g sustrato.
a) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en la descarga de la primera etapa.
b) Calcule la concentracin de clulas y sustrato si se sabe que la velocidad especfica de crecimiento en la
segunda etapa del bio-reactor es igual a: 0,035326447 h-1
c) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en el caso que los dos bio-reactores se disponen en
paralelo. Considere que el flujo de alimentacin a cada bio-reactor es 2 L/h.
d) Compare y comente los resultados obtenidos en b) y c).
R: a) X1 = 10 g/L; S1 = 2 g/L; 1 = 0,4 h-1
b) X2 = 10,97 g/L; S2 = 0,063 g/L
c) X = 10,75 g/L; S = 0,5 g/L
d) El arreglo en serie es ms eficiente que el arreglo en paralelo. Claro que en este ejemplo la
diferencia a favor del arreglo en serie es menor.
6.- Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para la fermentacin se ocupar una
cepa microbiana que tiene las siguientes caractersticas:
mx. = 0,6 h-1
Ks = 8 mg/L
YX/S = 0,5 g. clula/g. sustrato
La concentracin de sustrato se mantendr en 3 g/L durante la operacin del cultivo por lotes alimentado.
Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentacin exponencial y una concentracin de sustrato
constante en la alimentacin e igual a 23 g/L. Para efectos prcticos se puede considerar que = mx. si
> 0,99 mx. El volumen inicial es de 2000 L y la concentracin inicial de clulas es de 2 g/L. Despus de
6 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo de alimentacin. Ud. como jefe de
planta decide que la fermentacin contine en modalidad batch hasta que la concentracin de sustrato (que
es constantemente medida) sea igual a 1 g/L.
a) Cul era la masa celular en el bio-reactor a las 6 horas de operacin? 146.392,94 g
b) Cul era el volumen de fermentacin a las 6 horas de operacin? 16.239,3 L
c) Cul era la concentracin de clulas a las 6 horas de operacin? 9,014 g/L
d) Por cunto tiempo se prolong la fermentacin batch? 0,175 h
e) Cul era la concentracin de clulas al trmino de la fermentacin batch? 10,014 g/L
f) Hasta qu concentracin de sustrato se podra llegar de tal forma que todava las clulas sigan
creciendo a mx.? 0,792 g/L
7.- A un bio-reactor continuo de una etapa se ha acoplado un sedimentador tal como se muestra en la
figura siguiente. La corriente de recirculacin est concentrada en clulas y no contiene sustrato.
Datos:
mx. = 2 h-1, Ks = 1000 ppm, YX/S = 0,5 g. clula/g. sustrato, F = 100 L/h, S2 = 0,5 g/L, V = 100 L, S0 = 3
g/L, X0 = 0, = 1 kg/L

SAM/RS

24

a) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en la descarga del bio-reactor.

b) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en la descarga del sedimentador (S2 y X2)
R:
a) X = 2,5 g/L; S = 0,33 g/L
b) X2 = 1,25 g/L; S2 = 0,5 g/L
8.- Para un sistema de tratamiento de aguas residuales se ha propuesto el siguiente sistema.

SAM/RS

25

a) Formule los balances de clulas y sustrato en el bio-reactor y, tambin balance de clulas en el

sedimentador.
b) S F = 310.000 m3/da; F2 = 6.700 m3/da; V = 68.000 m3; = 0,197; x = 21000 clulas/ml y
x1 = 52 clulas/ml, calcule .
R:

a) Balance de clulas en el bio-reactor: "# ( + ") +  

Balance de sustrato en el bio-reactor:  + " ( + ") //  
Balance de clulas en el sedimentador: 
"    # "#  
b) = 0,55
9.- Un bio-reactor continuo de dos etapas se opera con un volumen de trabajo de 10 L (cada etapa) y un
flujo de alimentacin de 4.5 L/h con una concentracin de sustrato de 20 g/L en la primera etapa. La
poblacin bacteriana presenta una velocidad especfica de crecimiento mxima de 0,5 h-1 y un Ks de 1 g/L.
El rendimiento expresado en gramos de clulas por gramo de sustrato consumido se ha estimado
experimentalmente en 0,4 g clula/g sustrato.
a) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en la descarga de la primera etapa.
b) Calcule la concentracin de clulas y sustrato si se sabe que la velocidad especfica de crecimiento en la
segunda etapa del bio-reactor es igual a: 0,194371 h-1
c) Calcule la concentracin de clulas y sustrato en el caso que los dos bio-reactores se disponen en
paralelo. Considere que el flujo de alimentacin a cada bio-reactor es 2,25 L/h.
d) Compare y comente los resultados obtenidos en b) y c)
R: a) X1 = 4,4 g/L y S1 = 9 g/L
b) X2 = 7,745 g/L y S2 = 0,636 g/L
SAM/RS

26

c) X = 7,673 g/L y S = 0,818 g/L

d) El arreglo en serie es ms eficiente que el arreglo en paralelo. Claro que en este ejemplo la
diferencia a favor del arreglo en serie es menor.
10.- Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para el desarrollo de la
fermentacin se ocupar una cepa microbiana que tiene las siguientes caractersticas fisiolgicas:
mx. = 0,4 h-1

Ks = 5 mg/L
YX/S = 0,4 g. clula/g. sustrato
La concentracin de sustrato se mantendr en 2 g/L durante la operacin del cultivo por lotes alimentado.
Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentacin exponencial y una concentracin de sustrato
constante en la alimentacin e igual a 22 g/L. Para efectos prcticos se puede considerar que = mx. si
> 0,99 mx. El volumen inicial es de 2000 L y la concentracin inicial de clulas es de 2 g/L. Despus de
5 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo de alimentacin. Ud. como jefe de
planta decide que la fermentacin contine en modalidad batch hasta que la concentracin de sustrato (que
es constantemente medida) sea igual a 1 g/L.
a) Cul era la masa celular en el bio-reactor a las 5 horas de operacin?
b) Cul era el volumen de fermentacin a las 5 horas de operacin?
c) Cul era la concentracin de clulas a las 5 horas de operacin?
d) Por cunto tiempo se prolong la fermentacin batch?
e) Cul era la concentracin de clulas al trmino de la fermentacin batch?
f) Hasta qu concentracin de sustrato se podra llegar de tal forma que todava las clulas sigan
creciendo a mx.?

R: a) XV = 29550 g
b) V = 5193,8 L
c) X = 5,7 g/L
d) 0,17 h
e) 6,1 g/L
f) 0,495 g/L

SAM/RS

27

11.- Para realizar una fermentacin industrial se dispone de un sistema de bio-reactores multietapa tal como se muestra en la figura adjunta. En la primera etapa se alimenta un flujo de 32 L/h
y con una concentracin de sustrato de 35 g/L. Entre las dos etapas, se agrega una alimentacin
adicional, con un flujo de 12 L/h y una concentracin de sustrato de 25 g/L.
Determine cules son las condiciones de salida en la segunda etapa (F2, S2, x2 y 2)

F0
S0
x0

F2
S2
x2

F0 S1 x1

Datos:
V = 80 L
M = 0.57 h-1

F1
S01

KS = 0.09 g/L

Yx/S = 0.43 g/g

R: F2 = 44 L/h; S2 = 0,024 g/L; x2 = 13,87 g/L y 2 = 0,119 h-1

12.- De los datos obtenidos en un proceso batch (por lotes), se determin que el crecimiento
viene descrito por el Modelo de Monod, con valores de los parmetros de max = 0.7 h-1 ; Ks = 1.5
g/L y Yx/s = 0,12 g/g. Se desea llevar a cabo el mismo crecimiento a escala industrial en un bioreactor continuo (mezcla perfecta).
a) Suponiendo que la alimentacin es estril (x0 = 0), Cul ser el volumen de fermentador
necesario para tratar un caudal de 300 L/h, con una concentracin de sustrato de 20 g/L si
se desea convertir un 90% del sustrato alimentado? V = 750 L
b) Cul ser la produccin de biomasa? FX = 300*2,16 g/h = 648 g/h
c) Con el fin de aumentar el caudal a tratar, se propone utilizar el mismo reactor con
recirculacin. Mediante un sistema de filtracin, se obtiene una corriente de recirculacin
con una concentracin celular que es cuatro veces la de salida del bio-reactor. Si se desea
obtener la misma conversin global del 90% para el sustrato, trabajando a una relacin de
recirculacin (caudal de recirculacin/caudal de alimentacin) de 0.25, a) Cul ser el
caudal de entrada que podr ser tratado? 1.200 L/h
13.- Se lleva a cabo un cultivo por lotes seguido por un cultivo por lotes alimentados para la
produccin de biomasa, con alimentacin exponencial. El volumen inicial de fermentacin es de
10 L, la concentracin inicial de clulas es de 0.2 g/l, la concentracin inicial de sustrato es 12
g/l, el rendimiento de sustrato es de 0.46 g/g, la velocidad especfica mxima de crecimiento es
0.4 h-1, Ks = 10 mg/l y la concentracin de sustrato en la alimentacin es de 100 g/l.
Calcular:

SAM/RS

28

a)

El tiempo al que se inicia la alimentacin del C.L.A., si en cultivo por lotes alimentados
se desea mantener una concentracin de sustrato de 0.8 g/l. ~ 8,217 h
b) Flujo del cultivo por lotes alimentados. F ~ 0,469e0,4t
c) El tiempo total de fermentacin (batch + C.L.A) y la concentracin celular al momento
de alcanzar un volumen de 20 L. ~ 13, 8528 h (8,217 + 5,635)
14.- Ud. dispone de 2 bio-reactores a nivel de planta piloto con volmenes de 100 y 200 L
respectivamente para la produccin de clulas. El caldo estril a tratar tiene un flujo volumtrico
de 50 L/h con una concentracin de sustrato de 5 g/L. Experimentos a nivel de laboratorio
indican que el micro-organismo tiene una velocidad especfica mxima de 0,8 h-1 y un Ks = 1
g/L. El rendimiento de sustrato (Yx/s) es de 0,5 g/g. Ud. ha decidido operar los bio-reactores en
modo continuo y en serie.
a) Si se desea maximizar la concentracin de clulas en la descarga del segundo bio-reactor,
cul de los dos bio-reactores pondra primero?
b) Si se desea optimizar la operacin con estos dos bio-reactores, qu flujo volumtrico
utilizara?
R: a) Conviene poner primero el reactor de 200 L (x = 2,47 g/L)
15.- En el manuscrito: Production of Ethanol by Fed-Batch Fermentation se presenta el
siguiente balance de clulas:
dx
F
= x x
dt
V

a) Es correcto este balance de clulas?, Justifique con ecuaciones

R: Si, es correcto y se obtiene de combinar el balance global y el de clulas.
Balance Global (asumiendo densidad constante)
F=

dV
dt

(1)

Balance de Clulas

xV =

d ( xV )
dt

xV = x

dV
dx
+V
dt
dt

(2)

(3)

Remplazando (1) en (3)

SAM/RS

29

xV = xF + V

dx
dt

Dividiendo por V y despejando:

F dx
x x =
V dt
16.- En la siguiente tabla se presentan los datos obtenidos en un proceso de fermentacin llevado
a cabo en un bio-reactor continuo de tanque agitado operado en estado estacionario a varias
velocidades de dilucin.
D (h-1)
X (g/l)

0.38
5.96

0.33
5.98

0.29
5.99

0.235
6.00

S (g/l)

0.57

0.33

0.23

0.14

a) Determinar Ks y max.
b) Dada una concentracin de sustrato a la entrada del reactor de 120 g/l y asumiendo una
alimentacin estril, calcular el rendimiento de sustrato.
c) Determinar el caudal de alimentacin que podr ser procesado en un reactor similar de 100 m3
en estado estacionario, si se pretende convertir el 80% de una alimentacin estril que contiene
120 g/l de sustrato.
R: a) Ks = 0,1422 g/L y max = 0,4725 h-1
b) Yx/s ~ 0,05 g/g
c) F = 47 m3/h
17.- Un quimiostato simple de 5 litros de volumen til, presenta algunos problemas de diseo que
ocasionan una agitacin imperfecta. El equipo se va a utilizar para cultivar levadura con max =
0,48 h-1, Ks = 0,072 g/L. El flujo de alimentacin ser de 1,1 L/h, con una concentracin de
nutriente limitante de 6 g/l, y Yx/s de 0,43 g/g. Se supone que un 35% del flujo de alimentacin no
pasa por el fermentador, sino que se une a la corriente de salida y que el resto ingresa al
quimiostato. Determinar Qmax (Dopt.Xopt.), , y S a la salida del fermentador.
R: Qmax ~ 1 g/Lh, = 0,143 h-1, y S ~ 0,03 g/L
18.- En el desarrollo de una tecnologa microbiana para tratar un efluente industrial se requiere de
un quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 l/h. La poblacin presenta
un max. de 0,22 h-1, Ks de 1000 ppm y Yx/s de 0,28 g/g. Los ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a D = 0,82*Dc. Determinar la concentracin de sustrato en la alimentacin
y en la descarga y tambin la concentracin celular en estado estacionario.
R: S0 = 11,94 g/L, S ~ 3,15 g/L y X = 2,46 g/L

SAM/RS

30

19.- Un reactor es operado recirculando la corriente concentrada del separador solido/liquido, de

manera que el producto del sistema es la corriente clara de este separador. El volumen de
operacin del fermentador es de 2,2 m3, el factor de recirculacin es 0,9 y el factor de
concentracin 1,8. Se tiene una concentracin de sustrato inicial de 40 g/L y un Yx/s de 0,29 La
velocidad de dilucin del fermentador es de 0,31 h-1, el microorganismo posee un max =0,62 h-1 y
un Ks = 0,77 g/L. Calcular los valores estacionarios de la concentracin celular en el fermentador
y en la corriente clara, la concentracin de sustrato limitante, la velocidad especifica de
crecimiento, la productividad de clulas del fermentador y la velocidad especifica de crecimiento,
la productividad de clulas del fermentador y la velocidad msica de salida de clulas del
sistema. Este sistema de recirculacin no considera purga.
R: X = 41,3 g/L, X1 = 11,6 g/L (corriente clara), S = 0,13 g/L, = 0,087 h-1, Qx = 3,6 g/Lh,
F1X1 = 7.911 g/h.
20.- Un quimiostato con recirculacin de clulas sin purga opera con un volumen de 12 m3 y una
alimentacin fresca de 6240 L/h con una concentracin de 12 g/L de sustrato limitante y el factor
de recirculacin es 1. En estas condiciones la velocidad de crecimiento de la poblacin es de 0,35
h-1. El microrganismo tiene un max=0,62 h-1, Ks = 0,2 mg/L, y un rendimiento en clulas Yx/s =
0,4 g/g. a) Calcular el factor de concentracin del separador y b) Calcular la concentracin celular
en el fermentador y en el efluente.
R: a) C = 1,29
b) X = 7,13 g/L y Xe = 4,8 g/L
21.- Se quiere instalar un sistema de cultivo por lote alimentado en el cual se obtenga un
crecimiento exponencial a flujo constante y con una concentracin del sustrato limitante
(glucosa) variable con el tiempo.
a) Deduzca las ecuaciones que representan el comportamiento del sistema.
b) Determine el tiempo de alimentacin y la masa de glucosa si el fermentador
inicialmente con 22 m3 de lquido se desea obtener 640 Kg de biomasa seca a un = 0,5 h-1.
c) Volumen final en el fermentador.
Datos:
Xo : 8 g/L
M:: 0,62 h-1
Ks : 0,045 g/L

Yx/s : 0,4
F : 1 m3/h

R: a) Estn en los apuntes; b) 2,582 h y 4,61 kg de glucosa; c) 24,582 m3

22. Las condiciones de operacin con que se lleva a cabo un cultivo por lote alimentado con
alimentacin constante de una determinada bacteria, se sealan a continuacin junto con algunos
de sus principales parmetros:

SAM/RS

31

Vo : 59.983 L
S* : 6 g/L
Xo : 3 g/ L
VF : 80.000 L

M:: 0,26 h-1

Ks : 50 mg/L
Yx/s: 0,5 (limitante)
F : 1.250 L/h

Durante el cultivo se ha tomado una muestra que indica que la concentracin celular en ese
momento es de 15,3 g/L. Podra Ud. Cuntas cuantas horas faltan para el trmino de la
fermentacin?
R: 9,2 h
23.- Un fermentador de tanque agitado de 2000 L opera con un flujo de alimentacin de 540 L/h,
con 35 g/L de nutriente limitante Este tiene dos salidas, una directa y otra a travs de un filtro
absoluto, la primera tiene un flujo igual al 70% del flujo de alimentacin el que pasa a un
separador solido/liquido del que resulta una corriente concentrada 1,8 veces de clulas con un
caudal igual al 30% del caudal de entrada del separador, la que se recircula al fermentador. La
corriente clara se junta con la corriente filtrada y se envan a la prxima seccin de la planta. La
poblacin posee un max.=0,7 h-1, Ks = 4,1 g/L y Yx/s de 0,22 g/g. Calcular la concentracin celular
y de nutrientes en el fermentador.
R: x = 7,445 g/L; S = 1,29 g/L
24.- En un quimiostato de 500 L se cultiva un microorganismo bio-lixiviante que en las
condiciones de operacin presenta un M de 0,17 h-1, un Ks de 1,2 g/L y un rendimiento de
sustrato limitante de 0,019 g/g. Se sabe que a una tasa de dilucin de 0,08 h-1 se obtiene una
concentracin celular de 0,9 g/L. Calcule la concentracin de alimentacin de nutriente limitante,
la productividad mxima en clulas, a que tasa de dilucin se produce sta y con qu
concentracin celular.
R: S0 = 48,435 g/L; DX= 0,1143 g/Lh; D = 0,14357 h-1, X = 0,79643 g/L
25.- Un quimiostato simple de una etapa de 50.000 L de volumen de trabajo es operado con una
alimentacin de 4250 L/h con una concentracin de nutriente limitante de 15 g/L y un
rendimiento de 0,41 g/g. La poblacin microbiana presenta un M de 0,21 h-1 y un Ks de 320
mg/L. Para aumentar la capacidad del sistema a 12.500 L/h se decide instalar a la salida un
separador slido/lquido y una corriente de recirculacin con purga. Se desea mantener la misma
velocidad especfica de crecimiento y que el flujo de purga sea un 10% del flujo de la corriente
clara.
Cules debern ser los valores del factor de concentracin c y el factor de recirculacin , si la
concentracin celular de la corriente clara debe ser un 12% de la concentracin en el
fermentador?
R: c = 2,54; = 0,429

SAM/RS

32

26.- En el desarrollo de una tecnologa microbiana para tratar un efluente industrial se requiere de
un quimiostato de 100 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 l/h. La poblacin presenta
un max. de 0,26 h-1, Ks de 500 ppm y Yx/s de 0,28 g/g. Los ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a D = 0,82*Dc. Determinar la concentracin de sustrato en la alimentacin
y en la descarga y tambin la concentracin celular en estado estacionario.
* Control 2, primer semestre 2014 (Casa Central)
R: S0 = 7,625 g/L, S ~ 1,67 g/L y X ~ 1,67 g/L
27.- Se est analizando y estudiando la realizacin de dos modos de operacin: a) fermentacin en cultivo
por lotes (batch) y b) fermentacin en cultivo continuo. Se dispone de un fermentador de 10.000 L y la
cepa microbiana tiene las siguientes caractersticas: max = 0.7 h-1 ; Ks = 1.5 mg/L y Yx/s = 0,52 g/g. Por
otro lado se dispone de un medio de cultivo que tiene una concentracin de sustrato de 30 g/L. El cultivo
batch se inicia con una concentracin celular de 1 g/L y se detiene cuando la concentracin celular es 14
g/L. Asuma que el tiempo de carga y descarga son iguales a 2 h.
a) Cules seran las condiciones ptimas de operacin del cultivo continuo? Dopt. ~ 0,7 h-1
b) Cul es la productividad mxima del cultivo continuo? PC ~ 10,92 g/L h
c) Cul es la productividad (mxima) del cultivo batch? PB ~ 2 g/L h
d) Compare y discuta las productividades de ambos modos de operacin. Como ha sido comentado en
clases y demostrado a travs de un anlisis general, la productividad del cultivo continuo,
prcticamente siempre, es mayor que la productividad del proceso batch.

* Pregunta de Certamen del 2do semestre 2013.

28.- De los datos obtenidos en un proceso batch (por lotes), se determin que el crecimiento viene descrito
por el Modelo de Monod, con valores de los parmetros de max = 0.8 h-1 ; Ks = 1.5 mg/L y Yx/s = 0,42 g/g.
Se desea llevar a cabo el mismo crecimiento a escala industrial en un bio-reactor continuo (mezcla
perfecta).
a) Suponiendo que la alimentacin es estril (x0 = 0), Cul ser el volumen de fermentador
necesario para tratar un caudal de 500 L/h, con una concentracin de sustrato de 25 g/L si se desea
convertir un 85% del sustrato alimentado? 625 L
b) Cul ser la produccin de biomasa? 4462,5 g/h
c) Con el fin de aumentar el caudal a tratar, se propone utilizar el mismo reactor con recirculacin.
Mediante un sistema de filtracin, se obtienen dos corrientes, un sobrenadante y una corriente de
recirculacin con una concentracin celular que es cuatro veces la de salida del bio-reactor. La
concentracin de sustrato en la alimentacin al filtro y ambas corrientes de descarga del filtro
(sobrenadante y corriente de recirculacin) es la misma. Si se desea que la concentracin sustrato
en la descarga del bio-reactor sea 3,75 g/L, trabajando a una relacin de recirculacin (caudal de
recirculacin/caudal de alimentacin) de 0.25, Cul ser el caudal de entrada que podr ser
tratado? Cul ser la produccin de biomasa en esas condiciones?, F = 2000 L/h, FXs = 17850
g/h
d) Compare y discuta su respuesta en c) con respecto a sus respuestas en a) y b). El flujo a tratar y
la produccin de biomasa aumentaron 4 veces.

SAM/RS

33

29. En un bio-reactor continuo de una etapa se alcanza estado estacionario con una cepa microbiana que
tiene la siguiente cintica de crecimiento:
%

$ '  )*. , donde xmx. y k son constantes.

%& (

Asumiendo que el flujo de alimentacin y descarga sean igual a F (L/h), que volumen del bio-reactor sea
igual a V (L), que la concentracin de sustrato en la alimentacin S0 (g/L) y x0 = 0, entonces:
a) Encuentre expresiones para x y S en estado estacionario en funcin de parmetros conocidos.
x = xmx.- D/k y S = S0 (xmx.- D/k)/yx/s
b) Encuentre una expresin para x en funcin de S. x = yx/s(S0 S)
c) Si se define = k*xmx. demuestre con ecuaciones que > D (recuerde D = F/V). Como x = xmx.- D/k
sustituyendo k*xmx por se obtiene: x = ( - D)/k y como x es mayor que 0, entonces > D
30. En un laboratorio de bioprocesos se ha implementado un sistema de cultivo continuo consistente en 2
quimiostatos operados en serie. Cada quimiostato tiene un volumen de trabajo de 80 L. Se requiere
realizar un ensayo con una bacteria de mx. = 0,57 h-1, con un medio definido limitado por carbono, con Ks
= 0,09 g/L y un Yx/s = 0,43. A la primera etapa se alimenta un flujo de 32 L/h con un S0 = 35 g/L. En la
segunda etapas se incorpora una alimentacin adicional de 12 L/h con una concentracin de nutriente
limitante de 25 g/L.
a) Determinar las condiciones de salida de la primera etapa en estado estacionario. x = 14,96 g/L; S
= 0,2118 g/L, = 0,4 h-1
b) Escriba las ecuaciones necesarias que permitan determinar las condiciones de salida de la segunda
etapa en estado estacionario.
31. Se desea producir un metabolito P mediante una fermentacin continua con un microorganismo
anaerobio facultativo en un sistema quimiostato de 2 etapas. La primera (200 litros de volumen til) se
opera a D = 0,4 h, en condiciones aerobias en las cuales P no se produce. El segundo reactor (300 litros)
se opera sin aireacin y en l se produce un metabolito con Yp/s = 0,44 g/g. Se utiliza un medio limitado
por sacarosa con una concentracin inicial de 15 g/L. En base a las condiciones de cultivo, en la primera
etapa se tiene un M = 0,52 h-1, un Yx/s = 0,5 g/g y Ks = 0,018 g/L. La segunda etapa posee una alimentacin
secundaria de 15 L/h de una solucin de 100 g/L de sacarosa. Se sabe adems que para la segunda etapa
M = 0,3 h-1, Yx/s = 0,25 g/g y Ks = 0,018 g/L.
Determinar la concentracin final del metabolito P. P = 6,964 g/L (x2 = 10,25 g/L, S2 = 0,0124; 2 =
0,122)
32. Utilizando microrganismos se desea reducir la concentracin de un sustrato orgnico del cual se tiene
200 L con una concentracin de 5 g/L. El microrganismo seleccionado tiene una cintica de crecimiento
de primer orden y satisface la ecuacin de Monod con parmetros M = 0,27 h-1, KS = 1 mg/L, yx/s = 0,15
g/g. El problema es determinar bajo qu condiciones de operacin se realizar el proceso (batch o
continuo). Para ello dispone de un reactor de 10 litros de volumen til.
a) Si el proceso se realiza en operacin batch, determine el tiempo necesario para reducir la concentracin
de sustrato a 0,5 g/L en cada batch. Asuma que la concentracin inicial de biomasa es de 0,1 g/L. Cul es
el tiempo total? 7,6 h por cada batch y si se desprecia los tiempos de carga y descarga el tiempo total
sera 152 h.

SAM/RS

34

b) Si el proceso se realiza en operacin de cultivo continuo, determine el tiempo necesario para llevar a
cabo el proceso operando en estado estacionario. F = 2,7 L/h por lo tanto en procesar los 200 L se
necesitan 74,1 h.

* 2do Certamen, primer semestre 2014

33. Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el
mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo propuesto por Monod y que los rendimientos
de sustrato en clulas (yx/s1 = yx/s2 = yx/s) son constantes e iguales para ambas cepas microbianas.
Plantear las ecuaciones que describen el sistema en funcin de los parmetros cinticos (max y Ks), los
rendimientos (yx/s), la concentracin de sustrato en la alimentacin (S0) y la velocidad de dilucin (D).

* 2do Certamen, primer semestre 2014

Balance de clulas (cepa 1)
-.
. -.   0

(1)

Balance de clulas (cepa 2)

-/
/ -/   0
De (1) y (2)

(2)

.  /  0

Balance de Sustrato
1 1

23 43
56/7

28 48
56/7

0

(3)

Como .  /  0
-. + -/  9/: (1 1)

De (3):

(4)

Ecuacin de Monod
=

.  ;<. =>?

(5)

@3

/  ;</ =>?

(6)

@8

Y como .  / , entonces de (5) y (6):

=

;. =>?

@3

 ;/ =>?

(7)

@8

De (7) se calcula S, luego reemplazando en (4) se obtiene -. + -/ .

SAM/RS

35

34. Una levadura es cultivada en un quimiostato simple de 110 litros de volumen de caldo. La levadura es
susceptible a inhibicin de acuerdo a:
1
 B
1
C= 1
CD 
Donde: M = 0,39 h-1; Ks= 0,098 g/L; Ki = 0,5 g/L; yx/s = 0,5 g/g
El fermentador se opera a una velocidad de dilucin de 0,21 h-1, obtenindose una concentracin celular
en estado estacionario de 7 g/L.
a) Calcule el flujo de alimentacin. F = 23,1 L/h
b) Calcule la concentracin de sustrato en la descarga y en la alimentacin. Se presentan dos posibles
estados estacionarios. Cul de ellos ocurrir?, Depender de cmo se realice la puesta en marcha,
es decir, cul es la concentracin de sustrato en la alimentacin. Esto determinar a que estado
estacionario converge. Las posibles soluciones son: a) S01 = 15,22 g/L y S1 = 1,219 g/L, b) S02 = 14,04
g/L y S2 = 0,04 g/L.

* 2do Certamen, primer semestre 2014

35. Encuentre una expresin para la concentracin de clulas y sustrato en la descarga de un bio-reactor
tubular con flujo pistn y recirculacin. El bio-reactor tiene volumen V y el factor de recirculacin es .
La cintica de crecimiento microbiano es de pimer orden.
36. Encuentre una expresin para la concentracin de clulas y sustrato en la descarga de un bio-reactor
tubular con flujo pistn y la cintica de crecimiento microbiano se puede expresar por:
%

%&

F  )*. 
(

Donde k y xmax. son constantes.

37. A Ud. se le encarga determinar el nmero de bio-reactores a disponer en una planta de fermentacin.
El proceso de fermentacin es batch y se le encomienda que su estudio considere algunas simplificaciones
con la idea de tener una respuesta rpida pero que, a su vez, tenga un slido fundamento econmico. Para
ello se le pide que determine el nmero de bio-reactores que minimice la inversin total que en este caso,
para efectos de este anlisis econmico rpido, slo incluir la inversin en bio-reactores y fittings. Tal
como se expres cada fermentador es operado en la modalidad batch, aunque la operacin del conjunto de
bio-reactores debe ser continua. La inversin en fittings y el costo de cada bio-reactor se pueden
expresar por:
Inversin en fittings
G  )/  H
Costo de un Bio-reactor
IJ  ).  <

SAM/RS

36

Donde V es el volumen de un bio-reactor.

Encuentre una expresin para calcular el nmero de bio-reactores que minimice la inversin total y calcule
el nmero de bio-reactores en el caso que a = 0,6; a ~ b y k1 = 2k2.
Recuerde que:
a, b, k1 y k2: Constantes
R: a) K 

LM >M
;
M NL

b)6 (5,75)

38. Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el
mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo propuesto por Monod y que los rendimientos
de sustrato en clulas son yx/s1 = 0,4 g/g; yx/s2 = 0,5 g/g. Encuentre la concentracin de sustrato en la
descarga del bio-reactor y, tambin, una expresin para la concentracin de clulas en el bio-reactor en
funcin de la concentracin de sustrato en la alimentacin (S0) si:
max1 = 0,6 h-1; max2 = 0,4 h-1, Ks1 = 0,05 g/L, Ks2 = 0,01 g/L.


R: S = 0,07 g/L; 1 0,07  ,P3

,Q8

SAM/RS

37