Introducción

El ADN está expuesto constantemente a agentes físicos, químicos o biológicos que pueden
originar mutaciones y alterar la información genética del individuo. Las modificaciones en
el ADN pueden surgir por moléculas o mecanismos endógenos del metabolismo celular,
errores en el proceso de la replicación del ADN, ciertas infecciones virales e incluso por
factores ambientales como la luz ultravioleta, agentes químicos o la radiación ionizante.
Estos factores interfieren en procesos como la transcripción y la replicación, e inclusive
pueden provocar un descontrol en la división celular.

Tipos de daño en el ADN

Las lesiones en el ADN pueden ocurrir espontáneamente o pueden estar causadas por la
exposición a agentes mutagénicos. La desaminación, la depurinización y el daño oxidativo de las
bases nitrogenadas son algunos de los daños que se producen en el ADN de forma ESPONTANEA ¡.

La desaminación: consiste en la pérdida de grupos amino. En condiciones normales la

desaminación de la citosina produce uracilo, base nitrogenada que no forma parte del ADN; esta
base se aparea preferentemente con la adenina en lugar de hacerlo con la guanina, produciendo
así la conversión de un par de GC en un par de AT.

La depurinización: consiste en la eliminación del enlace N-glucosídico entre la base nitrogenada

y el azúcar, con la consiguiente pérdida de un residuo de adenina o guanina. Como consecuencia
aparecen sitios apurínicos en el ADN que conducen a un daño genético importante, ya que
durante la replicación estos sitios no pueden unir una base complementaria a la purina original
perdiéndose un nucleótido en la cadena de ADN recién sintetizada.

 En todos los seres vivos el metabolismo normal aerobio produce especies reactivas de oxígeno
como los radicales superóxidos (O2), peróxido de hidrógeno (H2O2) y radicales hidroxilos,
moléculas que causan daños oxidativos en el ADN

 Las principales alteraciones que originan estos radicales libres son la formación de una 8-oxo
guanosina y el glicol de timina que bloquean la replicación del ADN si no se reparan.
Agentes alquilantes: Añaden grupos alquilo (etilo o metilo) a las bases nitrogenadas y alteran su
patrón de apareamiento bloqueando la replicación. Uno de los sitios más propensos a la
alquilación es el oxígeno del carbono 6 de la guanina formándose O6-metilguanina, que se aparea
de modo incorrecto con la timina, provocando transiciones de un par de bases GC por un par AT.

Agentes intercalantes: Son compuestos que se intercalan entre los nucleótidos del ADN y
producen adiciones de un solo par de nucleótidos. Entre los componentes químicos intercalantes
se encuentran la proflavina, la acridina y el etidio. Cuando estas adiciones se producen en un gen,
puede producirse consecuencias importantes en la traducción de su ARNm, ya que altera la
secuencia codificadora en su marco de lectura correcto.

Análogos de bases: Son compuestos químicos con estructura similar a la de las bases
nitrogenadas normales y se pueden incorporar al ADN en lugar de éstas. Debido a que los
análogos de bases presentan diferencias estructurales con las bases convencionales, se aparean
de forma incorrecta, lo que provoca errores frecuentes en el proceso de replicación.

 El 5-bromouracilo (5BrU) es análogo de la timina que contiene un bromo en el carbono 5. En

su forma cetónica, el 5BrU forma un par de base con la adenina, mientras que en su forma
enólica lo hace con la guanina. Si se incorpora la forma cetónica del bromouracilo, se produce
una transición AT-GC y si se incorpora la forma enólica se produce una transición GC-AT

Energía ionizante: La exposición del ADN a la luz ultravioleta (UV) produce dímeros de
pirimidinas, sobre todo de timinas, cuando hay dos timinas consecutivas en la misma cadena de
ADN. La luz UV produce que se formen enlaces covalentes entre dos pirimidinas contiguas, lo que
interfiere con la unión normal de las bases nitrogenadas con la cadena complementaria. La
radiación UV induce también transiciones GC–AT, transversiones, mutaciones con cambio de
marco de lectura, duplicaciones y delecciones

 La radiación ionizante produce daño directo en las bases nitrogenadas del ADN e induce la
generación de especies reactivas de oxígeno. Además, produce roturas del enlace N-
glucosídico que conducen a la formación de sitios apurínicos, así como rompimientos en la
doble cadena del ADN, responsables de efectos letales en la célula. Estas lesiones ocasionan
cambios permanentes en el ADN que pueden alterar la secuencia codificadora o reguladora de
un gen e impedir el uso del ADN como plantilla para la replicación y transcripción.
 Sistemas de reparación del ADN

Para minimizar el daño del material genético el organismo dispone de diversos sistemas de
reparación que se activan dependiendo del tipo de daño provocado en el genoma. Estos
mecanismos de reparación se pueden clasificar en cuatro categorías: reparación directa,
reparación por escisión, reparación de emparejamientos erróneos (apareamientos incorrectos) y
reparación de roturas de doble cadena.

Reparación directa: La reparación directa involucra sistemas que eliminan directamente el daño
en el ADN inmediatamente después de producidos. Este tipo de reparación no es muy común, ya
que hay algunos daños en el ADN irreversibles. La fotorreactivación es el mecanismo de
organismos procariotes mediante la enzima fotoliasa para reconocer los dímeros de pirimidinas
producidos por la luz UV.

 Otro tipo de enzimas que participan en este sistema de reparación son las alquiltransferasas,
enzimas que eliminan los grupos alquilos de la guanina y restauran la estructura original, sin
la necesidad de alterar el esqueleto del ADN.

Sistemas de reparación por escisión

Reparación por escisión de bases: El sistema de reparación por escisión de bases (base excision
repair, BER) elimina del genoma las bases dañadas que se producen por alquilación, radiación
ionizante, oxidación y desaminación.

En este sistema intervienen las enzimas denominadas ADN glucosilasas, de las cuales existen por
lo menos ocho tipos distintos específicos para cada lesión. La reparación se realiza hidrolizando
el enlace glucosídico entre la base nitrogenada y el azúcar, con lo que se elimina la base dañada.

Esta rotura genera sitios apurínicos o apirimidínicos reconocidos por una AP endonucleasa 1
(APE1) que rompe el enlace fosfodiéster adyacente. Posteriormente, la ADN polimerasa β
adiciona los nucleótidos para rellenar el hueco generado empleando la cadena que no está dañada
como molde.
Reparación por escisión de nucleótidos: El sistema de reparación por escisión de nucleótidos
(nucleotide excision repair, NER) reconoce cualquier lesión que provoque una distorsión
importante en la doble cadena del ADN.

1. Implica en primer lugar el reconocimiento del daño en la secuencia del ADN;

2. posteriormente, una endonucleasa hidroliza los enlaces fosfodiéster a cada lado y varios
pares de bases de distancia de la lesión, y se elimina el fragmento de ADN de cadena
sencilla que presenta la lesión.

3. El hueco que se genera por la rotura se rellena con ayuda de la ADN polimerasa I y, por
último, la ligasa sella la cadena que se sintetiza.

4. Defectos en las proteínas de este sistema provocan el síndrome xeroderma pigmentosa

(XP)

5. En Escherichia coli esta reparación la llevan a cabo cuatro proteínas: UvrA, UvrB, UvrC y
UvrD (UV resistant).

6. UvrA y UvrB se unen para formar un complejo que se encarga de reconocer las
distorsiones en la cadena de ADN.

7. Una vez que localizan el daño, UvrA se disocia del complejo; UvrB separa la doble cadena
de ADN

8. a continuación, UvrC se une a UvrB, y el complejo corta a siete nucleótidos de

 distancia en dirección 5´ y cuatro en dirección 3’
del sitio de la lesión. Posteriormente, UvrD, una
helicasa, ayuda a liberar el fragmento y, por
acción de la ADN polimerasa I y la ligasa, se
rellena el hueco generado con el corte

Sistema 8-oxo guanina

La radiación UV, la radiación ionizante y algunos
agentes químicos pueden provocar que las
bases del ADN se oxiden. Una base muy
susceptible de oxidación por especies reactivas
de oxígeno (ROS) es la guanina, que como
consecuencia se transforma en 8-oxo guanina
(GO) u 8-hidroxiguanina, que en lugar de unirse
a la citosina se unirá a una adenina y producirá
un par erróneo G-A.

En humanos, una enzima llamada ADN OGG1 reconoce a la adenina unida con la GO, elimina la
base incorrecta (adenina) y la sustituye por la citosina correcta (fi gura 9-6). Las enzimas
participantes en este sistema en procariotes son mutM y mutY (metil-directed mismatch repair).

Sistema de reparación de los

apareamientos erróneos
Este sistema se basa en la reparación de las bases mal apareadas y la corrección de los bucles que
se producen en la cadena de ADN como consecuencia del deslizamiento de la polimerasa durante
la replicación. El ejemplo E. coli, en el que participan tres proteínas: MutS, MutL y MutH.
Sistema SOS: Este sistema responde a la acumulación de ADN de cadena sencilla cuando el
proceso de replicación se bloquea. Está integrado por más de 40 genes, que son activados por la
proteína RecA en procariotes.

En ausencia de daño, los genes SOS (save our soul) se encuentran unidos a su represor LexA. El
ADN de cadena sencilla es una señal de activación para la proteína RecA que se une al ADN de
cadena sencilla (ADNss) e interactúa con el represor LexA, lo que facilita su autoproteólisis; esto
induce la transcripción de los genes que contienen la caja SOS.

Reparación de roturas de doble cadena

Reparación por recombinación homóloga: Es un sistema de reparación preciso que actúa
durante la fase S del ciclo celular. Durante el proceso de replicación, este sistema se induce por la
necesidad de tener una copia de ADN correcta que sirva como molde para restaurar la
información perdida en la cadena dañada.

Unión de extremos no homólogos: Este sistema es uno de los que pueden participar cuando se
producen roturas en la doble cadena de ADN. El componente principal de este sistema es la
proteína de cinasa dependiente de ADN (ADN-PKcs), que consta de tres subunidades: KU70, KU80
y la subunidad catalítica ADNPKcs.