diferentes vas, el hecho de que se d o exista un dao en el ADN, aun no implica mutacin, pues hay mecanismos de reparacin que corrigen dichos daos y que solo si todos estos mecanismos fallan habr una mutacin propiamente dicha.
La ADN polimerasa puede incorporar bases equivocadas en la replicacin Errores en la replicacin o recombinacin provocan fracturas en el ADN
Por errores en la replicacin del DNA
Por ataques metablicos espontneos
Ataques Nucleofilicos
Dao oxidativo: metabolismo aerbico, radicales superoxido O2, perxido de hidrogeno H 2 O 2 e hidroxilo OH.
Metilaciones descontroladas
Producen Prdida de bases tipo purinas por ruptura espontnea del enlace con el azcar 5000/da/clula humana Deaminacin espontnea de citosinas y adeninas produce uracilo e hipoxantina Molculas con oxgenos reactivos atacan los anillos de las bases nitrogenadas Estos ataques espontneos producen despurinaciones y desaminaciones
Dao por agentes qumicos externos: CARCINGENOS
Grupos electrfilos que reaccionan con O y N Modifican las bases nitrogenadas Pro-carcingenos: su metabolismo en el organismo mediante el citocromo P450 los transforma en carcingenos. Qumicos ambientales como agentes alquilantes y otras sustancias qumicas forman aductos con las bases del ADN: hidrocarburos, productos naturales como las aflatoxinas
Anlogos de bases nitrogenadas
Por agentes fsicos: radiaciones
Radiaciones ionizantes: rayos gamma y rayos X causan rupturas en la doble hlice
Luz UV causa la formacin de los dmeros de timina
La radiacin UV produce dmeros de timina
La luz UV une de forma covalente dos residuos de timina adyacentes en una hebra cadena de DNA, formando ciclobutano Los dmeros de timina producen una distorsin local del DNA Con menos frecuencia se pueden formar otros dmeros de pirimidinas T-T > T-C, C-T > C-C La radiacin UV produce dmeros de timina Fig 5-48 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col. La luz UV une de forma covalente dos residuos de timina adyacentes en una hebra cadena de DNA, formando ciclobutano Con menos frecuencia se pueden formar otros dmeros de pirimidinas T-T > T-C, C-T > C-C Los dmeros de timina producen una distorsin local del DNA UNA MISMA LESIN POR DIFERENTES VIAS
La perdida de una base se puede dar por cidos (agente qumico) por calor (agente fsico) o de manera espontnea. La diferencia fundamental radica en la masividad de cada una de ellas por las diferentes vas.
LESIN DEL DNA CAUSA PRDIDA DE UNA BASE ELIMINACIN DE PURINAS POR CIDOS Y CALOR (EN EL GENOMA HUMANO, HIDRLISIS ESPONTNEA DE 10.000 ENLACES GLUCOSDICOS /DA ) BASE ALTERADA RADIACIONES IONIZANTES, AGENTES ALQUILANTES, ESPECIES REACTIVAS DE OXGENO (ROS: O 2 -. , HO . , H 2 O 2 ) BASE INCORRECTA DESAMINACIN ESPONTNEA (C PASA A U Y A PASA A HIPOXANTINA), ERRORES EN LA REPLICACIN NO CORREGIDOS POR EXO 3-5) DELECIN/INSERCIN AGENTES INTERCALANTES (NARANJA DE ACRIDINA, PROFLAVINA) DMEROS DE PIRIMIDINA RADIACIN UV ROTURA DE LAS CADENAS RADIACIN IONIZANTE, AGENTES QUMICOS (BLEOMICINA) oxidacin hidrlisis metilacin no controlada El tamao de las flechas indica la frecuencia relativa de cada acontecimiento Fig 5-46 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col. Estas alteraciones conducen a la despurinacin o desaminacin de la doble cadena de DNA DAOS DEL DNA Alteraciones espontneas que requieren reparacin del DNA
Despurinacin y Desaminacin Hay que tener muy claro que lesiones como estas no son mutaciones pero que si pueden llegar a serlas.
17 Desaminacin de bases adenina hipoxantina guanina xantina citosina uracilo timina no hay desaminacin 5-metil citosina timina Fig 5-52 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col.
Alquilacin de bases y Despurinacin
La alquilacin de la posicin N7 de un nucletido de purina, hace que su enlace glucosdico sea susceptible a la hidrlisis y lleve a la prdida de la base: Despurinacin.
Alquilacin de bases Agentes alquilantes Puede aparearse con C o T, produciendo transversiones La alquilacin de la posicin N7 de un nucletido de purina, hace que su enlace glucosdico sea susceptible a la hidrlisis y lleve a la prdida de la base: despurinacin 20 Despurinacin y Desaminacin Fig 5-47 .- Biologa Molecular de la Clula 4 ed., Alberts y col. Sitio apurnico Otras desaminaciones (menos frecuentes) A Hipoxantina G Xantina Sitio apurnico
Oxidacin de bases
El metabolismo celular expone el DNA a los efectos perjudiciales de las especies reactivas de oxgeno (ROS: O 2 -, HO., H 2 O 2 ), subproductos naturales del metabolismo oxidativo. Se conocen ms de 100 modificaciones oxidativas diferentes en el ADN. Por Ej.: G puede oxidarse a 8-oxoguanina oxoG puede aparearse con C o con A.
22 Oxidacin de bases El metabolismo celular expone el DNA a los efectos perjudiciales de las especies reactivas de oxgeno (ROS: O 2 - . , HO . , H 2 O 2 ), subproductos naturales del metabolismo oxidativo. Se conocen ms de 100 modificaciones oxidativas diferentes en el DNA. p. Ej.: G puede oxidarse a 8-oxoguanina oxoG puede aparearse con C o con A. Si oxoG se con A se produce una TRANSVERSIN. TRANSVERSIN: mutacin puntual producida por la sustitucin de una purina por una pirimidina o al revs. G C T =A
Los daos causados por diferentes agentes al ADN pueden ser corregidos por sistemas de reparacin, si esto no fuese as se acumularan miles de mutaciones en el ADN. Para esta reparacin existen una serie de mecanismos especficos. SISTEMAS QUE EVITAN LOS ERRORES ANTES DE QUE OCURRAN: Detoxificacin De Los Radicales Superxido: La dismutasa del superxido cataliza la conversin de radicales superxido en perxido de hidrgeno. A su vez, la catalasa convierte el perxido de hidrgeno en agua. Protena Del Gen mutT: Esta enzima impide la incorporacin de 8- oxodG (antes mencionado) al DNA, hidrolizando para ello el trifosfato de la 8-oxodG a la forma monofosfato.
REPARACIN DE LAS LESIONES AL ADN
SISTEMAS DE REPARACIN SIN ERRORES:
Reversin directa de la lesin: Fotoreactivacin: (Ruptura de los dmeros de pirimidinas por accin de una fotoliasa (phr) activada mediante luz visible). Las transferasas de grupos alquilo son otras enzimas implicadas en la reversin directa de lesiones. Eliminan ciertos grupos alquilo aadidos a las posiciones 0 a 6 de la guanina por agentes como NG y EMS.
Escisin de la regin daada seguida de remplazamiento preciso
Vas de reparacin por escisin (escisin + reparacin)
Sistemas enzimticos para reconocer, eliminar y reparar daos inducidos al ADN se han descrito y estudiado bien en bacterias.
- Reparacin de nucletidos aislados por lesin UV: necesita la otra hebra como templado (hasta 30 pb) Intervienen las endonucleasas uvrA ,B ,C y la helicasa uvrD.
Vas de reparacin especfica
- Reparacin mediante nucleasa AP (sitios AP, alquilacin o metilacin) Estas enzimas introducen hendiduras en la cadena mediante la rotura de enlaces fosfodisteres en los sitios AP. Esto promueve un proceso de reparacin por escisin mediado por otras tres enzimas: una exonucleasa, la polimerasa de DNA I y la ligasa de DNA
Reparacin mediante glucosilasas de DNA: Intervienen exoIII (xth), endo IV (nfo) DNA glicosilasa (fpg) y/o DNA glicosilasa I (tag) Existe tambin una glucosilasa que reconoce y escinde hipoxantina, el producto de la desaminacin de la adenina. Otras glucosilasas eliminan bases alquiladas, purinas con anillos abiertos, bases daadas oxidativamente y, en algunos organismos, foto dmeros producidos por la luz UV. Todava se siguen descubriendo nuevas glucosilasas.
Reparacin de errores de replicacin
Reparacin de roturas de doble cadena Unin de extremos no- homlogos
KU desenrrolla los extremos del molde hasta que regiones muy cortas (2-6 pb) puedan aparearse DNA-PK: Protena quinasa dependiente de DNA Protena KU: ATPasa dependiente de DNA con actividad helicasa