Observación

y función de
organelos celulares

Laboratorio de biología.

Profesor de laboratorio: María Lorena Niedmann Lolas.

Ayudantes: Nicolle Fuenzalida.
Fecha: 10 de junio de 2015
Integrantes: María Belén Rebolledo Cifuentes
Catalina Rivera Escobar
Jacqueline Rodríguez Ruiz.
 Introducción
En la célula podemos encontrar diferentes organelos celulares cada uno de
ellos con una función determinada, entre estos encontramos a las mitocondrias
cuya principal función es la producción de ATP mediante el proceso de
respiración, se cree que su origen está dado a partir de bacterias que vivían en
simbiosis dentro de otras células debido a su tamaño y su forma, Gerald
karp(2004), menciona que generalmente se les describe como “plantas en
miniatura generadoras de energía” Ya que extraen energía de materiales
orgánicos y la almacenan en forma de energía eléctrica.
El proceso de respiración es un proceso a través del cual se produce energía
para mantener la actividad celular mediante el consumo de oxígeno y la
producción de dióxido de carbono, este proceso tiene 4 etapas; la primera es
la glucolisis en esta una molécula de glucosa es oxidada y dividida en 2
moléculas de ácido pirúvico esto se realiza en el citosol de la célula; la segunda
etapa el ciclo de Krebs esta se lleva a cabo en la matriz mitocondrial, aquí se
realiza la oxidación de las 2 moléculas de ácido pirúvico hasta producir 2
moléculas de CO2 y electrones; la tercera es la cadena respiratoria y la cuarta
etapa es la fosforilacion oxidativa en estas se utiliza oxígeno para aceptar
electrones y dar origen a la formación de agua y una gradiente de protones
esto permite la formación del nucleótido adenosin-trifosfato o ATP.
Cabe destacar que existe un colorante llamado verde de Janus, el cual cumple
la función de colorear las mitocondrias, este en presencia de oxígeno, se torna
de color azul, y en ausencia de este, el indicador se reduce al color rosa.
También podemos encontrar los peroxisomas vesículas simples rodeadas por
una membrana cuya función principal es la detoxificación celular esto se
produce a través de 2 pasos muy importantes mencionados por Gerald karp
en biología celular y molecular (2004), “En el primer paso, una oxidasa elimina
electrones de varios sustratos, en el segundo paso, la enzima catalasa
convierte en agua el peróxido de hidrogeno producido en el primer paso”.
La catalasa es la enzima presente en mayor cantidad de las proteínas del
peroxisoma, es la encargada de degradar el peróxido de hidrogeno en agua y
oxigeno gaseoso.
Tanto los peroxisomas como la enzima catalasa se encuentra en mayor
proporción en hígado debido a la función que cumple este órgano en nuestro
cuerpo.

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 Hipótesis
La observación de organelos celulares y su función dependerá del ambiente en
que se desarrolla y del tejido o sustancia observada.

Objetivos
 Observar mitocondrias a partir de diferentes estados de crecimiento de
la sustancia que es observada.
 Observar actividad de las mitocondrias.
 Observar peroxisomas a partir de la reacción que se produce frente a
este en los diferentes tejidos.
 Comparar las diferentes reacciones de las actividades del peroxisomas
en los diversos tejidos.

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 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

Experimento 1.

MATERIALES:
• Solución de glucosa al 5%
• Microscopio compuesto
• 24 horas antes de la práctica,
agregar 10 granos de levadura a 5
cc de solución de glucosa al 5% en
temperatura ambiente dejarlo sin
cubrir (ambiente aeróbico).
Transportarla de igual manera.
• Porta y cubre objetos
• Verde de Janus al 0.001 P/V
• Aceite de inmersión
• Agua destilada
• Caja de Petrí (3 por laboratorio)

A. Observación Microscópica de Levaduras:

Colocar sobre un portaobjetos limpio dos gotas de agua y agregar un granito de
levadura. Agitar suavemente la suspensión hasta que la levadura esté repartida
en toda el agua.
Observar en el microscopio: primero con el lente de menor aumento, luego con
aumento mayor y finalmente con objetivo de inmersión.

B. Observación de Mitocondrias:
Colocar en una caja de Petrí 5 gotas de levadura en incubación (imagen 5), y
dejarlo actuar durante 2 minutos, luego en en una segunda caja de petrí
agregar 5 gotas de levadura sin O 2 con unas gotas de verde de Janus (imagen
7), finalmente en una tercera caja de petrí, agregar 5 gotas de levadura en
presencia de O2 con unas gotas de verde de Janus (imagen 6).
Luego de hacer una preparación microscópica y observarla con el objetivo de
inmersión; seleccionar levaduras grandes donde se puedan observar las
mitocondrias y el núcleo de las células.

Experimento 2.

MATERIALES:

• Cápsula petri
• Papa y rábano
• Agua oxigenada
• Trozo de hígado y riñón de
cerdo o ave.
• Dos hojas de afeitar.

 Flavín oxidasa R H2 + 02 R + H2O2

 Catalasa 2H202 2H2O + O2 (gas)

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PROCEDIMIENTO:
Primero que todo, para poder evaluar la velocidad en que se produce la reacción,
considerar una escala entre 0 y 5 (0 = no hay reacción, 1 = muy lento, 5 = muy
rápido).

A. Actividad de la Catalasa de Tejido Vegetal sobre Agua Oxigenada.

1. Hacer un corte fino de rábano (imagen 4) y uno de papa (imagen 3), procurar
que ambas dimensiones sean iguales, Agregue tres gotas de H2O2. Observar lo
que ocurre, y estimar la velocidad de reacción según la escala a considerar (tabla
1).

B. Actividad de la Catalasa de tejidos animales sobre Agua Oxigenada.

1. Hacer un corte fino de tejido hepático (imagen 1) y renal (imagen 2), procurar
que ambas dimensiones sean iguales. Observar lo que ocurre, y estimar la
velocidad de reacción según la escala a considerar (tabla 1).

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 Resultados

Tabla 1: Actividad de la catalasa de tejidos animales y vegetales sobre el agua

oxigenada.
Tejido/escal 0 1 2 3 4 5
a
Papa X
Rábano X

Hígado X
Riñón X

*La tabla indica cuan fuerte fue la reacción de la catalasa frente al agua
oxigenada, por lo que se puede deducir cuál de los tejidos presenta mayor
cantidad de peroxisomas.

Imagen 1: Reacción del tejido Imagen 2: Reacción del tejido

animal perteneciente al hígado animal perteneciente al riñón frente
frente al agua oxigenada. al agua destilada.

Imagen 3: Reacción del tejido Imagen 4: Reacción del tejido

vegetal de la papa frente al agua vegetal del Rábano frente al
oxigenada. agua destilada.
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Imagen 5: Mitocondria de la levadura frente al
microscopio.

Imagen 6: Mitocondria de la levadura en

presencia de oxigeno más verde de Janus,
frente al microscopio.

Imagen 7: Mitocondria de la levadura

en ausencia de oxigeno más verde de
Janus, frente al microscopio.

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 Discusión
Los resultados obtenidos en el laboratorio han sido variados, esto se debe a que
se ha experimentado con diversas soluciones que actúan de manera distinta frente
a una situación. Como se puede observar en las muestras de levadura los
resultados han sido variados, ya que cada muestra de levadura presentaba
características diferentes que la hacían reaccionar de distinta manera frente al
verde de Janus, (en presencia de oxígeno, se torna de un color azul y en ausencia
de este, se torna rosado). En la primera muestra se pueden observar las
mitocondrias de la levadura sin ningún tipo de coloración ya que no está en
presencia del verde de Janus, en la segunda muestra, las mitocondrias se tornan
de un color verdoso, esto se debe a la presencia de oxigeno que tienen estas, ya
que según Nomarski (2012) “Las  mitocondrias son los orgánulos productores de
energía. La célula necesita energía para crecer y multiplicarse, y las mitocondrias
aportan casi toda esta energía realizando las últimas etapas de la descomposición
de las moléculas de los alimentos. Estas etapas finales consisten en el consumo
de oxígeno y la producción de dióxido de carbono, proceso llamado respiración,
por su similitud con la respiración pulmonar.” Y en la tercera muestra las
mitocondrias se tornan de un color rosa, ya que estas están en ausencia de
oxígeno.
En el estudio de los tejidos vegetales y animales, se puede verificar la presencia
de catalasa, una enzima del peroxisoma que según Becker (2006) “es una enzima
esencial para la degradación del peróxido de hidrógeno (H 2O2), en H2O, liberando
oxígeno”. Lo que se puede observar claramente en la muestra de hígado, ya que
cumple la función de desintoxicación del alcohol ingerido, y también en la muestra
de riñón. En la papa no se observa tantas burbujas como en los anteriores ya que
estas no contienen tantos peroxisomas en las células como los tejidos anteriores,
al igual que en el rabano, en donde se puede observar una reacción casi nula
frente al agua oxigenada.

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 Bibliografía
• Nomarski. (2012). Biología Celular. junio 10, 2015, de Química y Biología
Sitio web:
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/cel
ular/programacell.htm
• W. Becker, L. Kleinsmith & J. Hardin. (2006). El mundo de la célula. Madrid
(España): Pearson Addison Wesley. Pág. 388.
• Gerald Karp. (2004). Biologia celular y molecular. México: McGraw-Hill
interamericana. Pág. 198