RAB

El sistema regula el contenido de proteínas y lípidos de la membrana plasmática, participa en

la maquinaria de control de calidad intracelular y es necesario para la eliminación eficaz de
orgánulos dañados. Esta red compleja comprende un sistema de membrana endosomal que se
alimenta de los lisosomas, pero también permite el reciclaje de proteínas de membrana y
probablemente de lípidos. Además, la degradación lisosomal proporciona a la célula
macromoléculas para un mayor crecimiento. En esta revisión, nos centramos principalmente
en el papel de las pequeñas Rab GTPasas Rab5 y Rab7 como marcadores de orgánulos e
interactores de múltiples efectores en endosomas y lisosomas y destacamos su papel en la
dinámica de la membrana, en particular la fusión a lo largo de la vía endolisosomal.

El sistema endolisosomal de las células eucariotas

Las células eucariotas aprovechan los compartimentos cerrados por la membrana para separar
las reacciones enzimáticas. Los orgánulos se comunican a través de portadores vesiculares que
se generan en un orgánulo, se desprenden, migran y se fusionan con otro orgánulo. Este
transporte mediado por vesículas es necesario para administrar proteínas y lípidos específicos
a un orgánulo aceptor.

La identidad de los orgánulos se define por un conjunto particular de moléculas presentes en

su superficie.

La mayoría de los orgánulos en el sistema endomembrana (es decir, retículo endoplásmico,

aparato de Golgi, endosomas y lisosomas) portan GTPasas de Rab (en lo sucesivo, Rabs), que
sirven como plataformas de unión para la localización única de la maquinaria de proteínas en
un orgánulo particular. Esta maquinaria funciona, por ejemplo, en el transporte de vesículas,
como las proteínas motoras unidas a Rab, o en el reconocimiento de una vesícula en el
orgánulo aceptor, como las moléculas de unión que interactúan con Rab. Además, los lípidos
de señalización, como los fosfo-nositidos definidos, proporcionan una segunda capa de
identidad y reclutan proteínas específicas de los orgánulos.

La vía endocítica no solo permite que las células tomen material del exterior, sino que también

Funciona como una vía importante de reciclaje de proteínas de membrana, control de calidad
de orgánulos y señalización. Conecta la membrana plasmática con los orgánulos posteriores, el
endosoma y el lisosoma. La endocitosis comienza con la recolección de proteínas de carga en
la membrana plasmática, la formación de una vesícula endocítica y su fisión. Estas vesículas se
fusionan con el endosoma temprano, una estación de clasificación importante para las
proteínas de membrana y probablemente los lípidos, dado que son componentes principales
de la vesícula (Cuadro 1). Una vez que los receptores de la membrana plasmática, como el
receptor LDL, han liberado su carga en el lumen endosomal, se recolectan en portadores
tubulares y se transportan de vuelta a la membrana plasmática, haciéndolos disponibles para
otra ronda de endocitosis. Su carga permanece en el lumen del orgánulo. Las proteínas de
membrana, como los transportadores de iones o aminoácidos, están marcadas con ubiquitina
por ligasas de ubiquitina específicas en la membrana plasmática, se endocitan y se clasifican en
el endosoma en vesículas intraluminales. Estas vesículas intraluminales se acumulan en el
lumen de los endosomas. A través de estos procesos, los endosomas, en consecuencia,
cambian su composición y morfología, y se convierten de un orgánulo tubular en un cuerpo
multivesicular redondo, también denominado endosoma tardío (Cuadro 2). Este endosoma
tardío finalmente se fusiona con el lisosoma, liberando así las vesículas intraluminales en el
lumen del lisosoma. Esto da como resultado la hidrólisis de todas las macromoléculas
administradas en aminoácidos, lípidos y carbohidratos para su uso posterior por parte de la
célula (Cuadro 1 y Figura 1).

Varias vías adicionales se introducen en esta vía endolisosomal. Por ejemplo, autófagosomas o
derivados de Golgi, las vesículas recubiertas de AP-3 también se fusionan con endosomas o
lisosomas.

Los orgánulos deben mantener su composición de lípidos y proteínas por el bien de su

identidad y

Funcionalidad, ya que múltiples eventos de transporte mediado por vesículas unidireccionales

conducirían a una mezcla de contenido organelar y composición lipídica. El equilibrio se logra
en parte por vías de transporte retrógradas entre orgánulos, que compensan el flujo de la
membrana y devuelven las proteínas receptoras a su posición inicial.

Los rabos se consideran marcadores de identidad de membrana y funcionan como

organizadores centrales del transporte mediado por vesículas entre los orgánulos (Figura 2A).
Rabs, una subfamilia de la superfamilia Ras de GTPasas pequeñas, se conserva altamente en
células eucariotas. Las células humanas expresan aproximadamente 70 Rabs diferentes,
mientras que la levadura expresa 11 miembros de esta familia. Rabs puede cambiar entre un
estado activo unido a GTP (Rab-GTP) y una forma inactiva vinculada a PIB (Rab-GDP). Este
interruptor requiere dos proteínas reguladoras, el factor de intercambio de nucleótidos de
guanina (GEF) y la proteína activadora de GTPasa (GAP). Todos los rabos están prenilados en
sus extremos C y se mantienen en forma soluble en el citosol mediante la unión al inhibidor de
la disociación del PIB (GDI).

Para funcionar en las membranas, requieren un FMAM como activador específico de Rab, que
activa el PIB

Liberación y carga del GTP más abundante. Por lo tanto, el intercambio de nucleótidos
mediado por GEF estabiliza el Rab en las membranas. Los FMAM se unen a señales específicas
de orgánulos, como los fosfoinositidos, proteínas de carga u otros Rabs, y, por lo tanto,
desencadenan el reclutamiento local y la activación de su Rab análogo. A pesar de que se han
implicado factores adicionales en el reclutamiento de Rab a membranas, la localización del
FMAM parece estar en el corazón de la correcta localización de Rab.

La unión a GTP estabiliza dos bucles en el dominio Rab GTPasa y permite que Rab reclute
proteínas efectoras específicas a la membrana. Los rabos son enzimas incompletas y dependen
de un GAP específico para desencadenar la hidrólisis de GTP. GDI no puede unirse a los Rabs
unidos a GTP, pero tiene sitios de enlace tanto para el PIB de Rab como para su anclaje lipídico
y, por lo tanto, puede extraer el PIB de Rab de las membranas y ponerlo a disposición para otra
ronda de suministro y activación de membranas. . En esta revisión, nos centramos en la vía
endocítica para proporcionar información sobre cómo se establece y se mantiene la identidad
de los orgánulos y cómo se utilizan los marcadores de identidad para organizar eventos
específicos de fusión y tethering. Si bien no se enfoca en estos, tal comprensión es crítica para
cualquier intervención durante los procesos de infección que abusan del sistema endocítico o
la administración de fármacos o el reemplazo de enzimas a través de la vía endocítica.