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Preparación de reportes de Informe de laboratorios

Informe 3. Laboratorio de Instrumentación Médica


“Colorímetro. Sensores Resistivos”
Nicoll Caicedo Gonzalez
e-mail: u5600031@unimilitar.edu.co
TatianaRojas Grimaldos
e-mail: u5600083@unimilitar.edu.co

completa que el espectro original, al tiempo que permite


RESUMEN: En el presente informe se describe los eliminar las interferencias en las medidas, causadas por
resultados obtenidos para el diseño de un equipo de la presencia en el medio de la matriz biológica, de
espectrofotometría, para el funcionamiento de este excipientes, disolventes.[4]
equipo se realizó el acondicionamiento de un sensor
resistivo el cual mide la intensidad de luz que recibe, Para evidenciar esto, en la presente práctica se realiza un
posteriormente la señal es adquirida a través de la DAQ equipo de espectrofotometría, con los principios básicos
al software LabVIEW, en donde se procesa y se identifica de colorimetría, evidenciando la intensidad de la luz y la
el tipo de muestra, adicionalmente se observa la representación gráfica de las concentraciones de la
concentración de la muestra. muestra.
PALABRAS CLAVE: Colorimetría, DAQ, espectrometría, 2 MARCO TEORICO
fotoresistencia, LabVIEW.

2.1 COLORIMETRIA.
1 INTRODUCCIÓN
La colorimetría es la ciencia encarga de la cuantificación
del color, midiendo la longitud de onda en la que puede
La aparición del espectrofotómetro creado por Arnold ser percibido un color en específico al ojo humano; para
Beckman en 1941 revolucionó el mundo de la biociencia. determinar a qué longitud de onda exacta se observa el
La cotidianidad actual de este instrumento ha conducido color deseado se necesita como referencia la curva
al desconocimiento de los alcances de su tecnología.[1] espectral del color[4]. Las funciones de la colorimetría se
La espectrofotometría es una técnica que mide la basan en determinar el valor numérico de un color,
interacción de moléculas con la radiación realizar una comparación entre colores en función de sus
electromagnética; La espectrofotometría de absorción es valores numéricos y determinar la intensidad y los
usualmente usada con moléculas disueltas en un matices del color estudiado.[5]
solvente transparente. La absorbancia de un soluto
depende linealmente de la concentración y por
consiguiente la espectrofotometría de absorción es ideal 2.2 ESPECTROMETRIA.
para hacer mediciones cuantitativas. [2]
La luz se puede explicar como un conjunto de radiaciones La espectrofotometría es una técnica empleada cuando
que se mueven por todo el espacio. Aquellas detectables se requieren mediciones cuantitativas y análisis de
por nuestro ojo corresponden a la luz visible, pero la espectros de luz específicos. Debido a que existen
mayoría son invisibles para nosotros. Estas radiaciones diferentes tipos de luz y a que las herramientas y técnicas
se pueden describir como partículas y como ondas. La usadas para medir y cuantificarlas son diferentes, existen
descripción como onda se basa en que la luz consta de herramientas específicas que deben ser utilizadas según
campos eléctricos y magnéticos que oscilan el tipo de espectro de luz que necesita ser medido.[6]
sinusoidalmente y en forma perpendicular a la dirección Como resultado, hay también diferentes tipos de
de traslación por el espacio. [2] espectrofotómetros con funciones específicas que
Es frecuente y casi habitual, que los fármacos coexistan brindan diferentes usos y tipos de análisis. Dentro de los
en medios químicos y biológicos, por lo tanto, es diferentes tipos de espectrofotometría, existen dos
incuestionable la utilidad de Espectrofotometría de métodos principales que se utilizan:
derivada para la investigación farmacéutica y toxicológica • La espectrofotometría de absorción:
en cualquiera de sus áreas de aplicación para contribuir Corresponde a la absorción de radiaciones y espectros
al desarrollo de mejores medicamentos, tratamientos más de luz específicos. Se compara la intensidad de un haz
eficaces de intoxicaciones y la prevención de reacciones de luz medida antes y después de la interacción con una
indeseables.[3] muestra. Observe figura 1.
Esta técnica es obtenida por diferenciación de espectros • El rango visible de espectrofotometría
ultravioleta y visible permite una medición muy exacta de ultravioleta: Abarca la reflectancia de espectros
la longitud de onda de máxima absorbancia y una
perfecta resolución de los espectros, suministrando una
información de la sustancia analizada mucho más

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.

específicos de un material. Cada uno de estos métodos radiante que incide sobre la disolución es Po y P la
de análisis tiene usos y herramientas específicas.[6] potencia radiante que sale, entonces:[2]

2.3 ESTRUCTURA DE UN
ESPECTOFOTOMETRO.

Figura 2. Representación gráfica ley de Lambert-Beer.[2]

La ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuación


1:
A=*C*I *E (1)
Figura 1. Diagrama de espectrofotómetro. Donde:
A= Absorbida
Cuando una luz blanca incide sobre una determinada E =Coeficiente de absortividad (m-1 cm-1)que indica la
sustancia (líquido o gas), ésta va a atravesarla. Después, cantidad de luz absorbida por dicha sustancia cuando se
pasa a través de una ranura y el haz resultante pasa, a su encuentra en disolución.
vez, a través de un prisma que lo va a descomponer. Se C = Concentración de la especie absorbente (moles/litro).
observa entonces el espectro de absorción de la I = Paso óptico de la muestra absorbente (cm).[2]
sustancia en cuestión. Las rayas o bandas negras
observadas se localizan en las gamas de longitudes de
onda que fueron absorbidas. 2.5 PATOLOGIAS

La localización de las rayas correspondientes a Por medio de la espectrometría se realizan pruebas que
longitudes de onda específicos es característica de un pueden ayudar a contribuir en el área de la medicina,
determinado elemento químico. El espectro de absorción teniendo en cuenta su concentración de proteínas, ácidos
nos indica entonces la porción de la radiación nucleicos, enzimas, entre otros.
electromagnética incidente (en este caso, de la luz visible)
que fue absorbida, siendo así posible identificar la 2.5.1 DIABETES
composición de una sustancia. [6]
La diabetes es una enfermedad crónica que se
desencadena cuando el páncreas no produce suficiente,
o cuando el organismo no puede utilizar con eficacia la
2.4 LEY DE LAMBERT BEER insulina que produce.[7]

La cantidad de radiación electromagnética absorbida por La diabetes es un importante problema de salud pública
un analito se puede relacionar cuantitativamente con la y una de las cuatro enfermedades no transmisibles (ENT)
concentración de dichas sustancias en solución. La seleccionadas por los dirigentes mundiales para intervenir
transmitancia (T) se define como la fracción de radiación con carácter prioritario. [7]
incidente transmitida por la disolución. Si la potencia
La hiperglucemia crónica de la diabetes se asocia con
daño a largo plazo en diferentes órganos, especialmente
en los ojos, riñones, nervios, corazón y vasos
sanguíneos. [7]

Se puede detectar por medio de una muestra de orina


para detectar el nivel de glucosa. [8]

2.5.2 ANEMIA.

La anemia se produce por la falta de glóbulos rojos o la


presencia de glóbulos rojos disfuncionales en el cuerpo,
lo que provoca una reducción del flujo de oxígeno hacia
los órganos, en relación con un valor establecido como

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.

adecuado por la Organización Mundial de la Salud según detectar la presencia de la bacteria shigela o sus toxinas.
edad y sexo. [9] [13]

Aunque muchas partes del cuerpo ayudan a producir 2.5.5 DERRAME PLEURAL.
glóbulos rojos, la mayor parte del trabajo se hace en la
médula ósea. Esta es el tejido blando en el centro de los Los derrames pleurales son acumulaciones de líquido
huesos que ayuda a la formación de las células dentro del espacio pleural. Tienen múltiples causas y en
sanguíneas. [9] general se clasifican como trasudados o exudados. [14]
La hemoglobina es la proteína que transporta el oxígeno La detección es por examen físico y radiografía de tórax;
dentro de los glóbulos rojos. Esta les da su color. Las para determinar la causa, a menudo se requieren la
personas con anemia no tienen suficiente hemoglobina. toracocentesis y el análisis del líquido pleural. [14]
[9]

2.5.3 ESCLEROSIS MÚLTIPLE. 3 DIAGRAMA


La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad
autoinmunitaria que afecta el cerebro y la médula espinal Para realizar el equipo de espectrometría se debió tener
(sistema nervioso central). [10] en cuenta el diseño para la detección de color y el diseño
para la gráfica de concentración.
La EM es causada por el daño a la vaina de mielina. Esta
vaina es la cubierta protectora que rodea las neuronas. 3.1 DISEÑO PARA DETECCIÒN DE
Cuando está cubierta de los nervios se daña, los impulsos COLOR
nerviosos disminuyen o se detienen. [10]
Como primer parámetro se diseñó un compartimiento de
El daño al nervio es causado por inflamación. La cartón el cual fue forrado en papel vinipel de color negro,
inflamación ocurre cuando las células inmunitarias del posteriormente se perforo un hueco en cada lado lateral
propio cuerpo atacan el sistema nervioso. Esto puede de la caja, en la perforación 1 está ubicada la
ocurrir a lo largo de cualquier zona del cerebro, el nervio fotorresistencia y en la 2 va conectado tres leds de chorro
óptico o la médula espinal. [10] envueltos en aluminio para un mejor rayo de luz como se
ilustra en la figura 3, y en medio de estos esta la probeta
Para diagnosticar esta enfermedad se realiza una sostenida por un soporte para que no se ladee y bloquee
muestra de líquido cefalorraquídeo, extraído mediante el ruido de la luz ambiente como se muestra en la figura
una punción lumbar, con el fin de detectar los niveles de 4. Finalmente se etiquetan los respectivos colores para
ciertas proteínas del sistema inmunológico y la presencia identificar las enfermedades a diagnosticar como se
de anticuerpos llamados “bandas oligoclonales”. Estas muestra en la figura 3.
bandas indican una respuesta inmune en el sistema
nervioso central y se encuentran en el fluido
cerebroespinal del 90% al 95% de las personas con
Esclerosis Múltiple. [11]

2.5.4 SHIGELLA.

La shigelosis es una infección intestinal aguda causada


por microorganismos gramnegativo especies de Shigella.
Sus síntomas son fiebre, náuseas, vómitos, tenesmo y
diarrea, que suele ser sanguinolenta. [12]
Su principal reservorio es el intestino del ser humano. En
países desarrollados, el modo de transmisión más
frecuente es de persona a persona. Se considera el
entero patógeno bacteriano más transmisible por esta vía.
[13]
Para diagnosticar esta enfermedad, implica extraer una
muestra de las heces para analizarlas en un laboratorio y

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.

Figura 4. Diseño interior del comportamiento del


espectrómetro.

Al tener el diseño del espectrómetro se procede a


realizar 3 fases, como se muestra en el diagrama de
bloques de la figura 5.

Figura 3. Comportamiento del espectrómetro.

El diagnostico simulado de las enfermedades Figura 5. Diagrama de bloques.


seleccionadas en el presente laboratorio fueron elegidas
relacionando su color y tipo de patología, como se explica • Fuente de luz.
a continuación.
Se realizó un pequeño circuito, conformada por 3 leds
La enfermedad de color rojo es la anemia donde se enrollados en papel aluminio y ubicados dentro de la caja
diagnostica al tener deficiencia de hemoglobina en la negra, conectados a 3 resistencias.
sangre; la verde es la shigella, la cual es diagnosticada al
detectar la bacteria shigela en una muestra de heces, la • Circuito divisor de voltaje.
de color amarillo es la esclerosis múltiple que es
diagnosticada si se encuentran glándulas oligoclonales Se compone de 4 elementos como se muestra en la figura
de una recolección de líquido cefalorraquídeo; la azul 5. En donde el número 1 de la figura 5, es la fuente de
será derrame pleura, analizando el líquido pleural y el entrada que en este caso es alimentado por la DAQ con
blanco será la diabetes si se detecta alto nivel de glucosa 5V, el 2 es la fotorresistencia que a mayor exposición de
en la orina. intensidad de luz menor es su resistencia, el 3 es el cable
que va conectado a la DAQ para adquirir los datos de la
muestra al software de LabVIEW y el 4 es la tierra del
circuito.

Este circuito tiene la finalidad de medir el voltaje que va


disminuyendo o aumentando, dependiendo de la
muestra.

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.

• Anemia.

Figura 5. Circuito divisor de voltaje.

• Adquisición de datos. Figura 7. Equipo de espectrómetro con muestra roja.


Para esta fase se desarrolló un programa en LabVIEW,
en donde se adquiere los datos por medio de la DAQ y se
grafica para visualizar el voltaje como se ve en la figura 6.

Figura 8. Estructura de caso de anemia en LabVIEW con


un intervalo de 1,7 a 1,9V.

Figura 6. Conexión de los diagramas de la DAQ con el


graficador de voltaje vs tiempo.

Posteriormente se realiza un análisis de medición de


concentración de cada muestra para identificar su voltaje,
y finalmente se realiza estructuras lógicas para
diagnosticar en tiempo real que muestra está en el
equipo. Esto se podrá evidenciar a continuación: Figura 9. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de
anemia, led rojo prendido.

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.

• Shigella. • Esclerosis múltiple.

Figura 10. Equipo de espectrómetro con muestra verde.


Figura 13. Equipo de espectrómetro con muestra amarilla.

Figura 11. Estructura de caso de Shigella en LabVIEW


con un intervalo de 1,5 a 1,7V.

Figura 14. Estructura de caso de esclerosis múltiple en


LabVIEW con un intervalo de 3,1 a 3,3V.

Figura 12. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de


shigella, led verde prendido.

Figura 15. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de


esclerosis múltiple, led naranja prendido.

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.

• Diabetes.

• Derrame pleural.

Figura 19. Equipo de espectrómetro con muestra de


agua.

Figura 16. Equipo de espectrómetro con muestra azul.

Figura 20. Estructura de caso de diabetes en LabVIEW


con un intervalo de 3,6 a 3,9V.

Figura 17. Estructura de caso de derrame pleural en


LabVIEW con un intervalo de 1 a 1,3V.

Figura 21. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de


diabetes, led blanco prendido.

Figura 18. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de


derrame pleural, led azul prendido.

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.

• Ambiente.

Figura 22. Estructura de caso de anemia en Labview con


un intervalo de 3,4 a 3,5V.
Figura 25. Programación de bloques en LabVIEW para
grafica la concentración en función del tiempo.

Lo que va a hacer este programa, es que al activar el


switch grafica el voltaje que le está entrando a la DAQ,
mientras que si está apagado graficara el último dato
adquirido de manera constante.

En la figura 26, se puede visualizar en la gráfica derecha


un cambio de voltaje que queda constante por un tiempo,
ese lapso es en el que se desactiva el switch mientras se
agregar más solución a la muestra, adicionalmente se
puede observar que en el último segmento graficado se
encuentra en el mismo voltaje que el de la gráfica del lado
izquierdo.
Figura 23. Interfaz gráfica
del voltaje en ambiente, led morado prendido.

Lo expuesto anteriormente podría entenderse mejor


mediante el diagrama de flujo de la figura 24. (Se
encuentra en anexos)

3.2 DIAGRAMA PARA LA GRAFICA DE


CONCENTRACIÒN DE LA MEZCLA VS Figura 26. Graficas de voltaje vs tiempo y concentración
TIEMPO. vs tiempo de la muestra de anemia. (roja)

Para graficar la concentración en función del tiempo,


se idealizo como primer parámetro un controlador el 4 CONCLUSION
cual va conectado junto con una gráfica de tipo A través de la configuración de un sensor resistivo se
Waveform charts, esta grafica va trazando en función logró desarrollar un sistema en la herramienta LabVIEW
del tiempo los cambios de una variable como lo es el para la medición de la intensidad de la luz, en donde se
voltaje, el cual se interpretará como la concentración sensa y registra las condiciones de cambio de color, que
de la muestra. representa una la enfermedad en particular, tal como se
Sin embargo, se presenta un problema y es que mencionó en la referencia y adicionalmente, por medio de
mientras se deposita más solución en la muestra, el la interfaz gráfica se determinó el cambio de
voltaje variara de forma no favorecedora para analizar concentración que se propuso para cada enfermedad.
la concentración en función del tiempo.
Para solucionar esto, se creó una estructura lógica que Se comprobó por medio de la interfaz el voltaje de cada
va conectada con un switch, en la cual se introduce pigmentación y por medio de un intervalo de voltaje se
dentro de esta estructura una variable local del control determinaba que enfermedad se presentaba, esto
como se visualiza en la figura 25. también se conoce como el tema de espectrofotometría
por lo que esta se basa en medir cuanta luz absorbe una
sustancia química, para este laboratorio se evidencia en
los tintes de las distintas enfermedades, adicionalmente
se evidencia la importancia de realizar un buen
controlador para el tiempo, ya que en nuestro caso se

8
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.

presentaron inconveniente en arrojar valores no [11] G. d. a. d. e. multiple, «EL DIAGNÓSTICO DE LA


favorables para analizar la concentración. ESCLEROSIS MÚLTIPLE,» Fundacion GAEM MS
Research, 18 12 2017. [En línea]. Available:
Finalmente podemos destacar el sistema de swith ya que https://fundaciongaem.org/diagnostico-de-la-esclerosis-
gracias a este se logró comparar la gráfica en el cambio multiple/. [Último acceso: 02 04 2020].
de voltaje cuando esta es constante y cuando presenta
variaciones en la concentración, adicionalmente es [12] J.-I. A. Ana González-Torralbaa, «Shigelosis, la
importante tener en cuenta que unas de las patologías importancia de la higiene en la prevención,» El sevier, vol.
que se escogió es el derrame pleural, pero en esta caso 33, nº 3, pp. 1-3, 2015.
no se desea identificas tal patología, si no realizar el
análisis del líquido (sangre) que se encuentra dentro de [13] M. Clinic, «Mayo clinic,» Foundation for Medical
los pulmones y de esta manera determinar la Education and Research., 05 12 2018. [En línea].
concentración que existe. Available: https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-
conditions/shigella/diagnosis-treatment/drc-20377533.
5 REFERENCIAS [Último acceso: 02 04 2020].

[1] J. L. L. S. Iván Arenas Sosa, [14] L. G. T. Rendon, «Derrame Pleural,» La clínica y el


«ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN.,» Instituto laboratorio, vol. 15, nº 72, pp. 1-2, 2008.
de Biotecnología, México., 2004.
[15] C. Plus, «Derrame Pleural,» Diario Medico, 05 06
[2] J. A. B. R. Nieves Abril Díaz, « Espectrofometría: 2019. [En línea]. Available:
Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de https://cuidateplus.marca.com/enfermedades/respiratoria
biomoléculas,» Departamento de Bioquímica y Biología s/derrame-pleural.html. [Último acceso: 02 04 2020].
Molecular, Córdoba., 2016.

[3]R. Farhat, «La aplicación de la espectrofotometría de


derivada al análisis de benzodiazepinas en medios
químicos, biológicos y formas farmacéuticas diversas,»
Universidad de Granada , España, 2002.

[4] E. S.A., «El análisis de color: colorimetría y


colorímetro,» QuimiNet, México, 2019.

[5]Universidad Autónoma De Barcelona,


"Espectrofotometría UV-vis Servei d'Anàlisi Química",
Sct.uab.cat, 2016. [Online].Available:
http://sct.uab.cat/saq/es/content/espectrofotometria-uv-
vis.[Accessed: 30- Mar- 2020].

[6]K. M. Sensing, «Espectrofotometría de Absorción vs.


Rango de Espectrofotometría Ultravioleta Visible,»
Konica Miltona, California., 218.

[7]O. m. d. l. salud., «INFORME MUNDIAL SOBRE LA


DIABETES.,» Global-report, España, 2016.

[8] M. Plus, «Prueba de glucosa en la orina,» U.S.


National Library of Medicine , 25 02 2020. [En línea].
Available: https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-
laboratorio/prueba-de-glucosa-en-la-orina/. [Último
acceso: 02 04 2020].

[9] M. D. B. N. D. D. A. Dra. Aixalá, «SOCIEDAD


ARGENTINA DE HEMATOLOGÍA,» Laboratorio
Andromaco , Buenos Aires, 2012.

[10] W. B. D. J. M. A. R. J. L. CARRETERO ARES,


«Actualización: esclerosis múltiple,» Scielo.iscii, vol. 11,
nº 9, pp. 1-3, 2001.

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ANEXOS

Figura 24. Diagrama de flujo de la fase de adquisición de


señal.

Figura 27. Diagrama de flujo para grafica la concentración


de la muestra en función del tiempo.

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