Espectroscopia y Métodos de Cuantificación Analítica

¿Qué es?

La espectroscopia estudia la interacción de la radiación electromagnética con la

materia. En este blog explicaremos en qué consiste exactamente y cuáles son los

principales tipos y técnicas espectroscópicas que utilizan espectrofotómetros.

La espectroscopia estudia la cantidad de luz que absorbe, dispersa (refleja) o despide un

objeto. Es decir, descompone la luz y mide las diferentes longitudes de onda de luz visible

y no visible. Por ejemplo, en el campo de la medicina, se utilizan distintos tipos de

espectroscopia para estudiar los tejidos y ayudar en el diagnóstico.

La espectroscopia es la disciplina científica que se ocupa de estudiar cómo interactúan

las radiaciones electromagnéticas con la materia. Exactamente, sirve para analizar cómo

la materia termina absorbiendo o emitiendo energía radiante (WIKIPEDIA, 2023)

¿Qué estudia?

La espectroscopia estudia concretamente 6 fenómenos ópticos: (MIRAESTELS, 2020)

 Absorción

 Fluorescencia

 Fosforescencia

 Emisión

 Dispersión

 Quimioluminiscencia
El análisis espectral se encarga de detectar la absorción o emisión de radiación

electromagnética a ciertas longitudes de onda. Y tiene en cuenta los niveles de energía

implicados en una transición cuántica. Para ello, existen tres casos de interacción con la

materia:

 Choque elástico: es un choque donde no hay pérdida de energía cinética en el

sistema de cuerpos durante la interacción. En este caso, además, solo existe un

cambio en el impulso de los fotones. Por ejemplo, los rayos X, la difracción de

electrones y la difracción de neutrones.

 Choque inelástico: en este tipo de choque la energía cinética no se conserva.

Sería el caso de la espectroscopia Raman.

 Absorción o emisión resonante de fotones.

¿Cómo se lleva acabo?

Un espectroscopio es un instrumento óptico que se utiliza para la identificación visual de

líneas de emisión atómica.

En los espectrómetros compactos, sin partes móviles, la luz se dirige al espectrómetro a

través de una fibra óptica entra por una rendija de tamaño variable (10- 500 micras), la

radiación es focalizada sobre la red de difracción con un espejo colimador, se dispersa

en sus diferentes longitudes de onda y se proyecta sobre un espejo que permite focalizar

la radiación separada en sus diferentes longitudes de onda sobre el detector (IEQFB,

2021)

Método
Para comenzar, es importante aclarar que método es un conjunto de procedimientos que

ayudan a alcanzar un objetivo, es decir, se trata de varios pasos que se siguen hasta

llegar a una meta, por ello se enfatiza que el método se puede aplicar en diferentes áreas

de la vida cotidiana y, no solamente en el conocimiento científico, si bien es cierto que

permite generar conocimiento (Malvenr Panalytical, 2023)

Cuantificación La cuantificación es el cálculo del número de unidad, tamaño o

proporción de una cosa, especialmente, por medio numérico. La cuantificación es un

proceso por el cual se expresa la observación en término numérico

para ayudar en el análisis y la comparación. En filosofía, la

expresión de la cantidad (extensión y comprensión) en el

enunciado o juicio, o especialmente en el predicado.

Método de cuantificación

En química se conoce como análisis cuantitativo a la determinación de la abundancia

absoluta o relativa (muchas veces expresada como concentración) de una, varias o todas

las sustancias químicas presentes en una muestra.

Los métodos y técnicas de análisis cuantitativo pueden clasificarse en: (Malvenr

Panalytical, 2023)

 Gravimétricos: Cuantifican la masa de la sustancia a analizar (analito) o de

algún compuesto químicamente relacionado con él.

 Volumétricos: Cuantifican el volumen de una disolución de una sustancia

químicamente equivalente al analito. Un ejemplo es la valoración ácido-base,

la valoración redox o la argentometría.

 Ópticos: Espectroscópicos y no-espectroscópicos: Cuantifican la interacción

entre la radiación electromagnética con el analito o las radiaciones que emanan

del mismo.

 Electroanalíticos: Cuantifican ciertas magnitudes eléctricas relacionadas con la

cantidad de analito. Algunos ejemplos son la potenciometría, culombimetría y

la electrogravimetría.

 Otros métodos variados: Cuantifican propiedades térmicas (como la

conductividad térmica), radiactivas, etc. Un ejemplo es la calorimetría.

El espectro electromagnético

Se denomina espectro electromagnético a la distribución energética del conjunto de las

ondas electromagnéticas.

El espectro electromagnético se extiende desde la radiación de menor longitud de onda,

como los rayos gamma y los rayos X, pasando por la luz ultravioleta, la luz visible y los

rayos infrarrojos, hasta las ondas electromagnéticas de mayor longitud de onda, como

son las ondas de radio. Se cree que el límite para la longitud de onda más pequeña

posible es la longitud de Planck mientras que el límite máximo sería el tamaño del

Universo.

El espectro electromagnético es el conjunto de longitudes de onda de todas las

radiaciones electromagnéticas. Incluye:

Los rayos gamma tienen las longitudes de onda más cortas y las frecuencias más altas

conocidas. Son ondas de alta energía capaces de viajar a larga distancia a través del aire

y son las más penetrantes.

Los rayos X tienen longitudes de onda más largas que los rayos gamma, pero menores

que la radiación ultravioleta y por lo tanto su energía es mayor que la de estos últimos.

Se utilizan en diversas aplicaciones científicas e industriales, pero principalmente

utilizan en la medicina como la radiografía. Consisten en una forma de radiación

ionizante y como tal pueden ser peligrosos. Los rayos X son emitidos por electrones del

exterior del núcleo, mientras que los rayos gamma son emitidos por el núcleo.

La radiación ultravioleta (UV) se define como la porción del espectro electromagnético

que se encuentra entre los rayos X y la luz visible.

La luz visible —también espectro visible— es la parte de espectro electromagnético que

los ojos humanos son capaces de detectar. Cubre todos los colores del azul a 400 nm al

rojo a 700 nm. La luz azul contiene más energía que la roja.

La radiación infrarroja (IR) —también radiación térmica— es la parte del espectro

electromagnético que se encuentra entre la luz visible y las microondas. La fuente

natural más importante de radiación infrarroja es el Sol.

Las ondas radioeléctricas tienen longitudes de onda largas que varían unos pocos

centímetros a miles de kilómetros de longitud. Sus principales usos son en la televisión,

los teléfonos móviles y las comunicaciones por radio.

Métodos de análisis

Métodos clásicos, que se basaban en propiedades químicas del analito. Se incluyen las

gravimetrías, las volumetrías y los métodos de análisis cualitativo clásico. La

gravimetría, es un método analítico cuantitativo; es decir, que determina la cantidad de

sustancia, midiendo el peso de la misma (por acción de la gravedad). Los cálculos se

realizan con base en los pesos atómicos y moleculares, y se fundamentan en una

constancia en la composición de sustancias puras y en las relaciones ponderales

(estequiometría) de las reacciones químicas.

La volumetría, también llamada valoración química, método químico para medir cuánta

cantidad de una disolución se necesita para reaccionar exactamente con otra disolución

de concentración y volumen conocidos. Para ello se va añadiendo gota a gota la

disolución desconocida o ‘problema’ a la otra disolución (disolución valorada) desde un

recipiente cilíndrico denominado bureta, hasta que la reacción finaliza. Según el tipo de

reacción que se produzca, la volumetría será, por ejemplo, volumetría ácido-base, de

oxidación-reducción o de precipitación. El final de la reacción suele determinarse a

partir del cambio de color de un indicador, como papel de tornasol o una mezcla especial

de indicadores denominada indicador universal.

Métodos instrumentales, basados en propiedades químico-físicas. La clasificación de los

métodos instrumentales se realiza en base a la propiedad que se mide (espectroscópicos,

electro analíticos, térmicos...).

Métodos de separación. Se incluyen en este grupo los métodos cuya finalidad es la

separación de compuestos para eliminar las interferencias y facilitar las medidas

Metodología del proceso analítico

La Química Analítica alcanza sus objetivos mediante una metodología que se

fundamenta en la aplicación del método científico. Desde un punto de vista formal, esta

metodología es común a todas las ciencias experimentales.

 METODOS ANALITICOS

Los métodos analíticos se suelen clasificar en clásicos o instrumentales. Esta

clasificación es en gran parte histórica, y los métodos clásicos precedieron en un siglo o

más a los métodos instrumentales (Ayres, 1970).

Métodos clásicos

En los primeros años de la química, la mayor parte de los análisis se realizaban

separando los componentes de interés de una muestra (los analitos), mediante

precipitación extracción o destilación. En los análisis cualitativos, los componentes

separados se trataban seguidamente con reactivos originando así productos que podían

identificarse por sus colores, sus puntos de ebullición o de fusión, sus solubilidades en

una serie de disolventes, sus olores, sus actividades ópticas o sus índices de refracción.

En los análisis cuantitativos, la cantidad de analito se determinaba por medidas

gravimétricas o volumétricas. En las primeras se determinaba la masa del analito o la de

algún compuesto producido a partir del mismo. En los procedimientos volumétricos se

determinaba el volumen o el peso de un reactivo estándar que reaccionase

completamente con el analito.

Métodos volumétricos

Existen métodos analíticos utilizados en la industria y en la investigación que permiten

conocer con bastante precisión y rapidez la concentración de las soluciones con las que

se trabaja.
Estas técnicas generalmente son llamadas volumétricas, y están basadas en la medición

de volúmenes en el laboratorio, consisten en hacer reaccionar cuantitativamente una

solución de la sustancia cuya concentración se busca, con un reactivo en solución cuya

concentración y forma de reaccionar se conocen. Una vez que toda la sustancia

contenida en la muestra ha reaccionado, se mide el volumen gastado y se calcula la

composición de la muestra utilizando el método de equivalentes de reacción. Los

métodos volumétricos o de titulación son métodos de análisis cuantitativos (Skoog,

1989).

Se puede detectar que la operación de titulación ha terminado bien sea por observación

directa (utilizando indicadores, por ejemplo) o mediante instrumentos (pH metro), en

algunas ocasiones, los cambios de color de las sustancias reaccionantes pueden ser

utilizados para tal fin, aun cuando lo acostumbrado es añadir indicadores que dan

cambios más nítidos.

Estas técnicas son particularmente adecuadas para determinar concentraciones de

sustancias que tienen actividad de transferencia de protones (ácido- base) y de

transferencia de electrones (redox).

Métodos instrumentales

Para el estudio de los métodos instrumentales es conveniente describir propiedades

físicas que puedan utilizarse como señales analíticas en el análisis cualitativo o

cuantitativo. La tabla 3 (Skoog, 1994) enumera la mayoría de las señales analíticas que

se suelen utilizar en el análisis instrumental. Obsérvese que las seis primeras están

relacionadas con la radiación electromagnética. En la primera, el analito origina la

señal radiante; los cinco restantes implican cambios en el haz de radiación producidos a

su paso por la muestra. Las cuatro siguientes son eléctricas. Por último, cuatro señales

diversas se agrupan conjuntamente. Estas son la razón masa a carga, la velocidad de

reacción, las señales térmicas y la radiactividad.

COMPONENTES DE LOS INSTRUMENTOS OPTICOS

La clasificación de la instrumentación analítica se realiza en base a la propiedad que se

mide. Señal analítica. Cualquier manifestación de una propiedad química o física a

partir de una sustancia de la cual es posible es establecimiento de su composición

cualitativa de la muestra o la determinación cuantitativa.

Los métodos ópticos miden las interacciones entre la energía radiante y la materia. Los

primeros instrumentos de esta clase se crearon para su aplicación dentro de la región

visible y por esto se llaman instrumentos ópticos. La energía radiante que se utiliza para

estas mediciones puede variar desde los rayos X, pasando por la luz visible, hasta las

ondas de radio. El parámetro usado más frecuentemente para caracterizar la energía

radiante es la longitud de onda, que es la distancia entre las crestas adyacentes de la

onda de un haz de radiación.

Los rayos X, de longitud de onda corta, son relativamente

de alta energía y por esta razón pueden producir cambios

marcados en la materia, y que las microondas y las ondas

de radio tienen longitudes de onda larga y son

relativamente de baja energía; los cambios que pueden

ocasionar al interactuar con la materia son muy leves y

difíciles de detectar.

(E, 2019) (Alberto, 2016)

Selectores de longitud de onda

En espectroscopia óptica medimos la absorbancia o transmitancia en función de la

longitud de onda. Desafortunadamente, no podemos aislar una sola longitud de onda de

radiación de una fuente continua, aunque podemos estrechar el rango de longitudes de

onda que llegan a la muestra.

Transductores de radiación

Transductor es un término general que se refiere a cualquier dispositivo que convierta

una propiedad química o física en una señal eléctrica de fácil medición. La retina en tu

ojo, por ejemplo, es un transductor que convierte los fotones en un impulso nervioso

eléctrico; tu tímpano es un transductor que convierte las ondas sonoras en un impulso

nervioso eléctrico diferente. Un transductor de fotones toma un fotón y lo convierte en

una señal eléctrica.

Fuentes de radiación

Todas las formas de espectroscopia requieren una fuente de energía para colocar el

analito en un estado excitado. En espectroscopia de absorción y dispersión esta energía

es suministrada por fotones. La espectroscopia de emisión y fotoluminiscencia utiliza

energía térmica, radiante (fotón) o química para promover el analito a un estado

excitado adecuado.

Contenedores de Muestras

El comportamiento de muestras proporciona un ambiente hermético a la luz que limita

la radiación parasita. Las muestras normalmente están en estado líquido o en una

solución, y se colocan en celdas construidas con materiales transparentes.

Fibra Óptica

Si necesitamos monitorear la concentración de un analito a lo largo del tiempo, es

posible que no sea posible extraer muestras para su análisis. Este suele ser el caso, por

ejemplo, cuando se monitorea una línea de producción industrial o línea de desechos

cuando se monitorea la sangre de un paciente, o cuando se monitorea un sistema

ambiental, como una corriente. Con una sonda de fibra óptica podemos analizar

muestras.

(Harvey, 2022)
 LEY DE BEER

La ley de Lambert-Beer permite la determinación de concentraciones de disoluciones

problema, a partir de una recta de calibrado obtenida midiendo las absorbancias de

disoluciones patrón de concentraciones conocidas. Para hacer las determinaciones

cuantitativas se elige, en general, la longitud de onda correspondiente a un máximo,

pues el error de medición es mínimo y la sensibilidad máxima.

Esta Ley fundamental rige la absorción de todos los tipos de radiación electromagnética,

aplicable a disoluciones y también a gases y sólidos. Nos dice que la absorbancia de

radiación electromagnética producida por una especie absorbente es directamente

proporcional a la trayectoria de la radiación a través de la disolución y a la

concentración en esta de la (Geraldo, 2020)sustancia que produce la absorción.

 A=a b c

A= Constante de proporcionalidad, absortividad, es una propiedad

intensiva de la materia y por tanto relacionada únicamente con la

naturaleza de la misma.

B= Trayectoria de la radiación a través de muestra (cm)

C= Concentración de las especies absorbentes (g/l), entonces “a”

tiene unidades de 1 mol, es por ello que pasa a dominarse

absortividad molar.

Por tanto, esta ley relaciona la atenuación de la luz y las propiedades del material a

través del cual viaja la luz. La ley se aplica comúnmente a análisis químicos mediciones

y se utiliza en la comprensión de la atenuación en la óptica física por fotones, neutrones

o gases enrarecidos.

(Geraldo, 2020)

La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración a

mayor número de moléculas mayor interacción de la luz con ellas; también depende de

la distancia que recorre la luz por la solución –a igual concentración cuanto mayor

distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrara.

La espectrofotometría UV es una técnica analítica que permite determinar la

concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las

radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de

forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un

espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa

por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma.

 Fuentes de radiación

Las fuentes de radiación deben de poseer dos condiciones básicas. Primero deben de

proporcionar la suficiente energía radiante a lo largo de toda la región de longitudes de

onda en la que se medirá la absorción. Y segundo, deben mantener una intensidad

constante por encima del intervalo de tiempo durante el que se realicen las medidas. Si la

intensidad es baja en la región donde se determina la absorción, el intervalo de

longitudes de onda que pasa a través de la muestra, debe ser relativamente amplio, a fin

de obtener el rendimiento necesario de energía, lo que puede provocar errores en las

medidas de la absorción.

Las medidas en la región visible y hasta el infrarrojo cercano se realizan generalmente

con lámparas de filamento incandescente que dan un espectro continuo en todo el

intervalo. El filamento se calienta por medio de una corriente eléctrica, y se encuentra

en un bulbo de vidrio herméticamente sellado al vacío o con gas inerte. Los filamentos,

generalmente, se enrollan para aumentar su emisividad, eficacia y luminancia media.

Las fuentes de radiación, requieren una gran estabilidad a corto plazo, sobre todo para

los espectrofotómetros de un solo haz. La intensidad de la radiación de una fuente

incandescente es proporcional al voltaje de la lámpara elevado a una potencia superior a

la unidad y con el fin de estabilizar la corriente fotoeléctrica dentro de un 0,2%, que

representa la precisión asequible del espectrofotómetro, el voltaje de las fuentes debe

regularse dentro de unos cuantos milivoltios.

La estabilidad de las fuentes se logra utilizando transformadores de voltaje constante y

reguladores de potencial electrónicos.

Las fuentes de radiación característica deben de tener tres propiedades fundamentales:

Mono cromaticidad: la línea de resonancia se debe poder seleccionar con toda precisión

exactamente a la longitud de onda del elemento a determinar.

Intensidad: debe ser lo suficientemente intensa a la longitud de onda de interés.

Estabilidad: suficiente como para poder realizar las medidas sin fluctuaciones

considerables

Actualmente hay varias fuentes de radiación utilizables, las de emsion continua, que

abarca el espectro desde el ultravioleta lejano hasta el visible y las fuentes de emisión

discontinua, que emiten únicamente a las longitudes de onda muy concretas.

La mayoría de los métodos espectrofotométricos requieren generalmente el aislamiento

de bandas discretas de radiación. Para aislar una banda estrecha de longitudes de onda,

se utilizan filtros, monocromadores o ambos.

 Los monocromadores: tienen como función seleccionar la línea de absorción,

separándola de las otras líneas de emisión emitidas por el cátodo hueco. Los

aparatos comerciales suelen venir equipados con monocromadores del tipo de

prima o red de difracción. Consiste de una rendija de entrada que proporciona

una imagen estrecha y casi coherente de la fuente de radiación, un colimador que

hace paralela la radiación procedente de la rendija de entrada, una red o prisma

para dispersar la radiación incidente, otro colimador para formar la imagen de la

rendija de entrada sobre la rendija de salida para aislar la banda espectral

deseada.
 Filtros: los filtros proporcionan un alto rendimiento de radiación. Su montaje es

relativamente fácil, los más utilizados son los filtros de absorción y los filtros

interferenciales. Los filtros de absorción los efectos se derivan de las

interacciones totales de la radiación con el material y los interferenciales se

basan en las interferencias ópticas y en su caso, más simple consiste en una

película espaciadora dieléctrica insertada entre dos películas paralelas de metal

parcialmente reflejante, generalmente plata. El espesor de la película dieléctrica

es controlado para tener una, dos o tres medias ondas.

 Detectores: miden la intensidad de la radiación antes y después de la absorción

por la muestra. A partir de los valores obtenidos, se podrá calcular la radiación

absorbida

 Modulación: La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no

deseadas, produciendo interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas. Los

detectores que se utilizan son sensibles a determinadas frecuencias, ignorando las

señales continúas ocasionadas por la llama. Por ello, se modula el sistema de

alimentación de las lámparas a la misma frecuencia que el tubo

fotomultiplicador.

 Sistema óptico: su función es conducir las radiaciones emitas, por la lámpara a

través del sistema de obtención de átomos en estado fundamental y el

monocromador hasta llegar al detector.

 BIBLIOGRAFIA

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