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CURSO:
Química Analítica y Análisis Instrumental
ALUMNA:
Alvarado Brophy, Carmen Cecilia.
DOCENTE:
MIGUEL ALEXIS LUNA QUINTO
ESPECTROFOTOMETRÍA
I. INTRODUCCIÓN:
Transmitancia: Fracción de luz que deja pasar cierta solución Así mismo, sabemos
que, si la absorbancia es mayor, la transmitancia será menor, es decir si una solución
absorbe mucho, transmitirá poco.
Ley de beer. Se puede decir que esta ley se trata de un medio o método matemático,
el cual es utilizado para expresar de que modo la materia absorbe la luz. En óptica
(Rama de la física que se encarga del estudio de la luz) La ley de Beer afirma que la
totalidad de luz que emana de una muestra puede disminuir debido a tres fenómenos
de la física, que serían los siguientes:
1. El número de materiales de absorción en su trayectoria, lo cual se denomina
concentración
2. Las distancias que la luz debe atravesar a través de las muestras. Denominamos a
este fenómeno, distancia del trayecto óptico
3. Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda pueda
absorberse por el material. Esto es la absorbencia o también coeficiente de extinción.
A = – logT
La utilidad de la absorbancia radica en que sus valores son directamente proporcionales
a la concentración de la sustancia absorbente (c), a través de la llamada ley de
LambertBeer:
A=εlc
donde l es la longitud del camino óptico (el largo de la cubeta que contiene a la muestra)
y ε es el coeficiente de absorción molar (propia de cada sustancia)8,10. Teniendo la
absorbancia de la muestra, el largo de la cubeta y la constante, podemos despejar la
concentración de nuestra muestra. Los espectrofotómetros nos permiten medir el
espectro de absorción completo de una sustancia. El espectro de una muestra es una
representación gráfica de la cantidad de luz que se absorben en función de la longitud
de onda. En la figura 2 podemos observar espectros de absorción del agua proveniente
de diversas fuentes y épocas del año. En este ejemplo, la absorbancia a 350 nanómetros
(nm) puede ser utilizada como un indicador del contenido relativo de lignina en la materia
orgánica disuelta en el agua. La lignina es un polímero fenólico que compone la madera
de las plantas vasculares y que absorbe radiación fuertemente a los 350 nm. Gracias al
espectrofotómetro podemos inferir que el agua pura no contiene lignina, pero si hay
presencia de este material en los arroyos, especialmente en las épocas de lluvia debido
al arrastre de material terrestre hacia los arroyos. En este sentido, diferentes longitudes
de onda aportan distinta información sobre la composición y concentración de un
compuesto en particular.
Fuente: Avances en Química, 13(3), 79-82 (2018)
Matráz aforado de 50 ml
Vaso de 100 ml
Vaso de 50 ml
Luna de reloj
Bureta de 25 ml
Soporte para bureta
Espátula
Piseta
Vagueta
Balanza Analítica
Espectro UV VIS
NaOH (Solución 0.1 N) 1 L
Fenolftaleína (1% en alcohol) 10 ml
Co(NO3).6H2O (0.15 M) 1 L
KMnO4 (66mg/L) 1L
2. PROCEDIMIENTO.
UTILIZANDO EL VERNIER UV- VIS CON UN ORDENADOR EMPEZANDO
1. Asegúrese que Logger Pro software (versión 3.8.6.2 o posterior) esté
instalado en su equipo antes de utilizar el Vernier UV- VIS.
2. Conecte la fuente de alimentación de AC para el espectrofotómetro. Gire
el interruptor de encendido en la posición ON.
3. Cuando el LED del indicador de la lámpara se mantiene en verde,
conecte el espectrofotómetro a un puerto USB en la computadora o un
concentrador USB.
4. Inicie el software Logger Pro 3 en el equipo.
5. Seleccione el tipo de datos (o unidades) que desea medir
6. El tipo de datos predeterminado es absorbancia. Si desea medir la
absorbancia de una solución, ir directamente a la sección Calibrar
continuación.
Si se desea medir % T o intensidad, haga lo siguiente:
CALIBRAR.
RECOPILACIÓN DE DATOS
Las longitudes de onda. Haga clic CLEAR SECTION. Seleccione las cajas
en la lista o arrastre el cursor en el gráfico para seleccionar un máximo de
diez longitudes de onda contiguas. Compruebe Combine.
Para esta práctica se hizo uso de los siguientes compuestos químicos: fenolftaleína
( ), 1 - naftol ( ) Y EL azul de metileno ( ), se determinará
la longitud de onda de cada uno.
FUENTE: PROPIA
DONDE:
MUESTRA 01 FENOLFTALEINA
MUESTRA 02 1 - NAFTOL
MUESTRA 03 AZUL DE METILENO
FENOLFTALEINA ( ).
MUESTRA 1: FENOLFTALEÍNA
3.5
3
2.5
ABSORVANCIA
2
1.5
1
0.5
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
-0.5
LONGITUD DE ONDA
FUENTE: PROPIA
1-NAFTOL ( )
MUESTRA2: 1 NAFTOL
2
1.5
ABSORVANCIA
0.5
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
-0.5
LONGITUD DE ONDA
FUENTE: PROPIA
AZUL DE METILENO ( ).
1.5
ABSORVANCIA
0.5
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
-0.5
LONGITUD DE ONDA
FUENTE: PROPIA
2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
c) Prepara una muestra en blanco llenando una cubeta a ¾ de su capacidad con agua
destilada. Ya estás listo para calibrar el colorímetro. Determinar la longitud de onda óptima
en el rango de: 550 – 650 nm.
Abre la tapa del colorímetro
Sujetando la cubeta por su borde superior, colócala en la cavidad especial para
cubeta del colorímetro, cierra la tapa.
Presiona el botón CAL hasta que el LED rojo comience a destellar. Luego suelta el
botón CAL. Cuando el LED deja de destellar, la calibración está completa.
d) Ya estás listo para recolectar datos de absorbancia de las cinco soluciones estándares. Haz
clic en el botón (TOMAR DATOS), vacía la cubeta de agua. Usando el tubo de ensayo 1,
enjuaga la cubeta 2 veces con cantidades de 1 ml y luego llena la cubeta a ¾ de su
capacidad. Seca sus lados externos con toalla de papel y colócala en el colorímetro.
Después de cerrar la tapa espera a que el valor de absorbancia se estabilice. Luego haz
clic en (CONSERVAR) y escribe “0,080 en la caja de edición. El par de datos que acabas
de tomar debe aparecer ahora en el gráfico.
e) Repite el paso 4 para los tubos de ensayo 2, 3, 4, 5. Cuando finalices haz clic en
(PRESENTAR GRÁFICA)
f) Examina el gráfico de Absorbancia vs. Concentración. Para ver si la curva representa una
relación directa entre estas 2 variables, haz clic en (AJUSTE LINEAL). Se mostrará una
recta correspondiente al mejor ajuste de regresión lineal de sus cinco puntos de datos
medidos
Curva de Calibración
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4
FUENTE: PROPIA
Por consiguiente, fuimos variando las longitudes de onda de las 5 muestras tomadas
desde 400nm hasta 950nm, de esta manera notamos que el punto max de la curva es a
800nm con una absorbancia de 1.1.
LONGITUD DE A
ONDA
400 0.05
450 0.001
500 0.003
550 0.019
600 0.086
650 0.278
700 0.639
750 0.998
800 1.16
850 1.112
900 0.979
950 0.836
Solución 1
1.4
1.2
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 200 400 600 800 1000
FUENTE: PROPIA
Media Arimética
0.214
0.361
0.604
2.403
1.564
1 2 3 4 5
FUENTE: PROPIA
GRÁFICO DE LA DESVIACIÓN ESTÁNDAR
0.7
0.63
0.6
0.5
CONCENTRACIÓN
Series1
0.4 0.36
Series2
0.29
0.3
0.22 Series3
0.2 Series4
0.11 Series5
0.1
0
S
DESVIACIÓN ESTÁNDAR
FUENTE: PROPIA
52.60%
79.10%
CV (%) 37.20%
40.40%
15.00%
0.00% 10.00% 20.00% 30.00% 40.00% 50.00% 60.00% 70.00% 80.00% 90.00%
FUENTE: PROPIA
III. DISCUSIÓN Y COCLUSION: