TEMA N°5

ESPECTROSCOPI
A

1. INTRODUCCIÓN

La espectroscopia es una técnica analítica experimental muy utilizada en química. Se

basa en detectar la absorción o emisión de radiación electromagnética por parte de una
sustancia que queremos estudiar.
Para entender cualquier técnica espectroscópica debemos pensar que siempre tenemos
3 elementos básicos: la fuente de luz, la muestra que queremos estudiar y un detector.
La fuente de luz irradia la muestra, interacciona con las sustancias que la forman, estas
modifican la luz incidente (porque la absorben parcialmente o porque emiten una
diferente) y con un detector registramos la luz resultante de interaccionar con la
muestra. Si sabemos interpretar las diferencias entre luz incidente y luz resultante
(grabadas en forma de lo que llamamos espectro), obtendremos información sobre la
muestra.

2. ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

Se denomina espectro electromagnético a la distribución energética del conjunto de

las ondas electromagnéticas. Referido a un objeto se denomina espectro
electromagnético o simplemente espectro a la radiación electromagnética que emite o
absorbe una sustancia. Dicha radiación sirve para identificar la sustancia de manera
análoga a una huella dactilar. Los espectros se pueden observar
mediante espectroscopios que, además de permitir ver el espectro, permiten realizar
medidas sobre el mismo, como son la longitud de onda, la frecuencia y la intensidad de
la radiación.
El espectro electromagnético se extiende desde la radiación de menor longitud de onda,
como los rayos gamma y los rayos X, pasando por la radiación ultravioleta, la luz visible
y la radiación infrarroja, hasta las ondas electromagnéticas de mayor longitud de onda,
como son las ondas de radio. Si bien el límite para la longitud de onda más pequeña
posible no sería la longitud de Planck (porque el tiempo característico de cada
modalidad de interacción es unas 1020 veces mayor al instante de Planck y, en la
presente etapa cosmológica, ninguna de ellas podría oscilar con la frecuencia necesaria
para alcanzar aquella longitud de onda), se cree que el límite máximo sería el tamaño del
Universo (véase Cosmología física) aunque formalmente el espectro electromagnético
es infinito y continuo.
Según el tipo de radiación que usamos, es decir, según la técnica espectroscópica
elegida, podemos obtener una información u otra (información estructural,
cuantitativa, cualitativa) porqué dependiendo del tipo de luz, interaccionará de una
forma u de otra con las moléculas de nuestra muestra. Por lo tanto, elegiremos una u
otra técnica espectroscópica según el tipo de moléculas que contenga nuestra muestra
y la información que queramos obtener.

3. ESPECTROSCOPIA

Es el estudio de la interacción de la radiación electromagnética (luz) con la materia

absorción de radiación: la materia absorbe radiación pasando de un estado bajo de
energía (estado fundamental) a un estado más alto (estado excitado) emisión de luz: la
materia regresa del estado excitado al estado fundamental emitiendo un fotón
Dispersión: la radiación cambia de dirección tras colisionar con la materia. La
dispersión puede ser elástica (sin cambio en la energía del fotón, es decir sin cambio de
su frecuencia) o inelástica (la frecuencia del fotón cambia)

La espectroscopia estudia la cantidad de luz que absorbe, dispersa (refleja) o despide

un objeto. Es decir, descompone la luz y mide las diferentes longitudes de onda de luz
visible y no visible. Por ejemplo, en el campo de la medicina, se utilizan distintos tipos
de espectroscopia para estudiar los tejidos y ayudar en el diagnóstico. No obstante,
también se puede estudiar en astrofísica para determinar la naturaleza y propiedades
físicas de los astros. Y, a su vez, también se puede aplicar en física, química y
biología, entre otras disciplinas científicas.

La espectroscopia estudia concretamente 6 fenómenos ópticos:

 Absorción
 Fluorescencia
 Fosforescencia
  Emisión
 Dispersión
 Quimioluminiscencia

El análisis espectral se encarga de detectar la absorción o emisión de radiación

electromagnética a ciertas longitudes de onda. Y tiene en cuenta los niveles de energía
implicados en una transición cuántica. Para ello, existen tres casos de interacción con
la materia:
 Choque elástico: es un choque donde no hay pérdida de energía cinética en el
sistema de cuerpos durante la interacción. En este caso, además, solo existe un
cambio en el impulso de los fotones. Por ejemplo, los rayos X, la difracción de
electrones y la difracción de neutrones.
 Choque inelástico: en este tipo de choque la energía cinética no se conserva.
Sería el caso de la espectroscopia Raman.
 Absorción o emisión resonante de fotones.

4. ESPECTROFOTÓMETRO

Es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en función de

la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se
miden en una muestra. Sus aplicaciones pueden ser cualitativas y cuantitativas. También
se utiliza en laboratorios de microbiología para la cuantificación de microorganismos.

Hay varios tipos de espectrofotómetros. Éstos se agrupan de acuerdo al tipo de muestra

analizada; los hay de absorción atómica y de absorción molecular (que comúnmente se
conoce como espectrofotómetro UV-VIS).

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través

de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le
permite al operador realizar dos funciones:

 Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.

 Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está
presente en la muestra.
Un espectrofotómetro típico posee cuatro componentes básicos:

 Una fuente de radiación que tiene intensidad constante en el rango de longitud

de onda que cubre (usualmente es lámpara de tungsteno para luz visible, y
deuterio para ultravioleta),
 Un compartimiento para la muestra,
 Un monocromador que separa la banda de longitud de onda deseada del resto
del espectro y la dispersa al compartimiento de la muestra, y
 Un fotodetector, que mide cuantitativamente la radiación que pasa por la
muestra.

5. UV-VIS
La espectroscopía UV-Vis está basada en el proceso de absorción de la radiación
ultravioleta-visible (radiación con longitud de onda comprendida entre los 160 y 780
nm) por una molécula.

La absorción de esta radiación causa la promoción de un electrón a un estado excitado.

Los electrones que se excitan al absorber radiación de esta frecuencia son los electrones
de enlace de las moléculas, por lo que los picos de absorción se pueden correlacionar
con los distintos tipos de enlace presentes en el compuesto.

Debido a ello, la espectroscopía UV-Vis se utiliza para la identificación de los grupos

funcionales presentes en una molécula. Las bandas que aparecen en un espectro UV-Vis
son anchas debido a la superposición de transiciones vibracionales y electrónicas.
5.1. APLICACIONES
 Determinación de grupos funcionales en moléculas orgánicas
 Análisis de muestras bioquímicas
 Determinación de metales en compuestos de coordinación
 Análisis de semiconductores
 Medidas de color
 Determinación cuantitativa
 Seguimiento de la cinética de procesos químicos y bioquímicos.

6. INFRAROJA

En la región infrarroja (IR) del espectro, la radiación de menor energía también puede
producir cambios dentro de átomos y moléculas. Este tipo de radiación no suele ser lo
suficientemente energética para excitar electrones.

No obstante, sí puede provocar que los enlaces químicos entre moléculas vibren de
diferentes maneras. Por ejemplo, para excitar un electrón de un átomo particular, la
energía necesaria es fija. Y la energía requerida para cambiar la vibración de un enlace
particular también lo es.
7. REQUISITOS DE LAS MUESTRAS

 Las muestras deben entregarse adecuadamente etiquetadas, envasadas y

acondicionadas para asegurar su identificación, integridad y conservación
durante el transporte y garantizar la seguridad del personal que lo realiza.
 El equipo dispone de una esfera integradora, por lo que se pueden analizar
muestras tanto líquidas como sólidas o en suspensión.
 El volumen mínimo de líquido a analizar es de 1 ml.
 La muestra deberá presentarse en disolución siendo la concentración la adecuada
para el análisis.
 La disolución del analito debe ser estable en las condiciones de almacenamiento
y análisis.
 Los disolventes y los tampones utilizados no deben interferir en la zona de
medida del analito.

8. LEY DE LAMBERT – BEER

La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER también se conoce como ley de Beer-

Lambert- Bouguer y fue descubierta de formas diferentes e independientes en primer
lugar por el matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729, Luego por el
filósofo y matemático alemán, Johann Heinrich Lambert en 1760 y por último el físico
y matemático también alemán, August Beer en el año 1852.

Se puede decir que esta ley se trata de un medio o método matemático, el cual es
utilizado para expresar de que modo la materia absorbe la luz. En óptica (Rama de la
física que se encarga del estudio de la luz) La ley de Beer afirma que la totalidad de luz
que emana de una muestra puede disminuir debido a tres fenómenos de la física, que
serían los siguientes:

 El número de materiales de absorción en su trayectoria, lo cual se denomina

concentración
 Las distancias que la luz debe atravesar a través de las muestras. Denominamos a
este fenómeno, distancia del trayecto óptico
 Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda
 pueda absorberse por el material. Esto es la absorbencia o también coeficiente de
extinción.
La relación anterior puede ser expresada de la siguiente manera:

A = − εcd
Donde:
A = Absorbencia
ε = Coeficiente molar de extinción d = Recorrido (en cm)
c = Concentración molar
A medida que la luz atraviesa un medio que la absorbe, la cantidad de luz absorbida en
cualquier volumen corresponde a la intensidad de luz que incide, luego se multiplica por
el coeficiente de la absorción. Frecuentemente la intensidad de un haz de luz incidente
declina significativamente a medida que pasa a través del medio absorbente. Cuando
esta relación se expresa como Ley de BOUGUER- LAMBERT-BEER, tenemos que:

T = 10–εcd o T = 10–A
Donde:

T = Transmitancia
ε = Coeficiente molar de extinción
c = Concentración molar del absorbente
d = Recorrido en cm
La transmitancia se puede expresar como la intensidad de la radiación incidente, Io.
Esto puede dividir a la luz que emerge de la muestra, I. Se refiere a la relación I/Io como
transmitancia o como T.

La transmitancia se puede trazar con relación a la concentración, pero esta relación no

sería Lineal. Aunque el logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia sí es lineal
con la concentración.
De esta forma, la absorción es medida como:
A continuación, podemos observar un diagrama de la absorción de un haz que atraviesa
un recipiente de tamaño l

BIBLIOGRAFÍA
 BERMEJO, R., MORENO, A. (2014). Análisis instrumental. (3ª Ed). España.
Síntesis.
 FUNDAMENTOS. POLARIMETRÍA. 4° Ed. México.
 MAURI, A., LIOBAT, M., HERRÁES, R. (2010). Laboratorio de análisis
instrumental. Barcelona España. Universidad de Valencia.
 Páginas Web:
 https://www.uv.es/tunon/Master_Ing_Bio/tema_7.pdf
 https://ieqfb.com/que-es-la-espectroscopia-tipos-y-tecnicas/