Preparación de reportes de Informe de laboratorios
Informe 3. Laboratorio de Instrumentación Médica
“Colorímetro. Sensores Resistivos”
Nicoll Caicedo Gonzalez
e-mail: u5600031@unimilitar.edu.co
TatianaRojas Grimaldos
e-mail: u5600083@unimilitar.edu.co
RESUMEN: En el presente informe se describe los
resultados obtenidos para el diseño de un equipo de
espectrofotometría, para el funcionamiento de este
equipo se realizó el acondicionamiento de un sensor
resistivo el cual mide la intensidad de luz que recibe,
posteriormente la señal es adquirida a través de la DAQ
al software LabVIEW, en donde se procesa y se identifica
el tipo de muestra, adicionalmente se observa la
concentración de la muestra.
PALABRAS CLAVE: colorimetría, DAQ, espectrometría,
fotoresistencia, LabVIEW.
1 INTRODUCCIÓN
La aparición del espectrofotómetro creado por Arnold
Beckman en 1941 revolucionó el mundo de la biociencia.
La cotidianidad actual de este instrumento ha conducido
al desconocimiento de los alcances de su tecnología.[1]
La espectrofotometría es una técnica que mide la
interacción de moléculas con la radiación
electromagnética; La espectrofotometría de absorción es
usualmente usada con moléculas disueltas en un
solvente transparente. La absorbancia de un soluto
depende linealmente de la concentración y por
consiguiente la espectrofotometría de absorción es ideal
para hacer mediciones cuantitativas. [2]
La luz se puede explicar como un conjunto de radiaciones
que se mueven por todo el espacio. Aquellas detectables
por nuestro ojo corresponden a la luz visible, pero la
mayoría son invisibles para nosotros. Estas radiaciones
se pueden describir como partículas y como ondas. La
descripción como onda se basa en que la luz consta de
campos eléctricos y magnéticos que oscilan
sinusoidalmente y en forma perpendicular a la dirección
de traslación por el espacio. [2]
Es frecuente y casi habitual, que los fármacos coexistan
en medios químicos y biológicos, por lo tanto, es
incuestionable la utilidad de Espectrofotometría de
derivada para la investigación farmacéutica y toxicológica
en cualquiera de sus áreas de aplicación para contribuir
al desarrollo de mejores medicamentos, tratamientos más
eficaces de intoxicaciones y la prevención de reacciones
indeseables.[3]
Esta técnica es obtenida por diferenciación de espectros
ultravioleta y visible permite una medición muy exacta de
la longitud de onda de máxima absorbancia y una
perfecta resolución de los espectros, suministrando una
información de la sustancia analizada mucho más
1
completa que el espectro original, al tiempo que permite
eliminar las interferencias en las medidas, causadas por
la presencia en el medio de la matriz biológica, de
excipientes, disolventes.[4]
Para evidenciar esto, en la presente práctica se realiza un
equipo de espectrofotometría, con los principios básicos
de colorimetría, evidenciando la intensidad de la luz y la
representación gráfica de las concentraciones de la
muestra.
2 MARCO TEORICO
2.1 COLORIMETRIA.
La colorimetría es la ciencia encarga de la cuantificación
del color, midiendo la longitud de onda en la que puede
ser percibido un color en específico al ojo humano; para
determinar a qué longitud de onda exacta se observa el
color deseado se necesita como referencia la curva
espectral del color[4]. Las funciones de la colorimetría se
basan en determinar el valor numérico de un color,
realizar una comparación entre colores en función de sus
valores numéricos y determinar la intensidad y los
matices del color estudiado.[5]
2.2 ESPECTROMETRIA.
La espectrofotometría es una técnica empleada cuando
se requieren mediciones cuantitativas y análisis de
espectros de luz específicos. Debido a que existen
diferentes tipos de luz y a que las herramientas y técnicas
usadas para medir y cuantificarlas son diferentes, existen
herramientas específicas que deben ser utilizadas según
el tipo de espectro de luz que necesita ser medido.[6]
Como resultado, hay también diferentes tipos de
espectrofotómetros con funciones específicas que
brindan diferentes usos y tipos de análisis. Dentro de los
diferentes tipos de espectrofotometría, existen dos
métodos principales que se utilizan:
• La espectrofotometría de absorción:
Corresponde a la absorción de radiaciones y espectros
de luz específicos. Se compara la intensidad de un haz
de luz medida antes y después de la interacción con una
muestra. Observe figura 1.
• El rango visible de espectrofotometría
ultravioleta: Abarca la reflectancia de espectros
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.
específicos de un material. Cada uno de estos métodos
de análisis tiene usos y herramientas específicas.[6]
2.3 ESTRUCTURA DE UN
ESPECTOFOTOMETRO.
Figura 1. Diagrama de espectrofotómetro.
Cuando una luz blanca incide sobre una determinada
sustancia (líquido o gas), ésta va a atravesarla. Después,
pasa a través de una ranura y el haz resultante pasa, a su
vez, a través de un prisma que lo va a descomponer. Se
observa entonces el espectro de absorción de la
sustancia en cuestión. Las rayas o bandas negras
observadas se localizan en las gamas de longitudes de
onda que fueron absorbidas.
La localización de las rayas correspondientes a
longitudes de onda específicos es característica de un
determinado elemento químico. El espectro de absorción
nos indica entonces la porción de la radiación
electromagnética incidente (en este caso, de la luz visible)
que fue absorbida, siendo así posible identificar la
composición de una sustancia. [6]
2.4 LEY DE LAMBERT BEER
La cantidad de radiación electromagnética absorbida por
un analito se puede relacionar cuantitativamente con la
concentración de dichas sustancias en solución. La
transmitancia (T) se define como la fracción de radiación
incidente transmitida por la disolución. Si la potencia
2
radiante que incide sobre la disolución es Po y P la
potencia radiante que sale, entonces:[2]
Figura 2. Representación gráfica ley de Lambert-Beer.[2]
La ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuación
1:
A=*C*I *E (1)
Donde:
E =Coeficiente de absortividad (M cm ),−1 −1 que indica
la cantidad de luz absorbida por dicha sustancia cuando
se encuentra en disolución.
C = Concentración de la especie absorbente (moles/litro).
I = Paso óptico de la muestra absorbente (cm).[2]
2.5 PATOLOGIAS
Por medio de la espectrometría se realizan pruebas que
pueden ayudar a contribuir en el área de la medicina,
teniendo en cuenta su concentración de proteínas, ácidos
nucleicos, enzimas, entre otros.
2.5.1 DIABETES
La diabetes es una enfermedad crónica que se
desencadena cuando el páncreas no produce suficiente,
o cuando el organismo no puede utilizar con eficacia la
insulina que produce.[7]
La diabetes es un importante problema de salud pública
y una de las cuatro enfermedades no transmisibles (ENT)
seleccionadas por los dirigentes mundiales para intervenir
con carácter prioritario. [7]
La hiperglucemia crónica de la diabetes se asocia con
daño a largo plazo en diferentes órganos, especialmente
en los ojos, riñones, nervios, corazón y vasos
sanguíneos.[7]
Se puede detectar por medio de una muestra de orina
para detectar el nivel de glucosa.
2.5.2 ANEMIA.
La anemia se produce por la falta de glóbulos rojos o la
presencia de glóbulos rojos disfuncionales en el cuerpo,
lo que provoca una reducción del flujo de oxígeno hacia
los órganos, en relación con un valor establecido como
adecuado por la Organización Mundial de la Salud según
edad y sexo. [8]
Aunque muchas partes del cuerpo ayudan a producir
glóbulos rojos, la mayor parte del trabajo se hace en la
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.

médula ósea. Esta es el tejido blando en el centro de los mayoría por insuficiencia cardiaca y, en menor medida, por
huesos que ayuda a la formación de las células cirrosis hepática.[11]
sanguíneas. [8]
La hemoglobina es la proteína que transporta el oxígeno 3 DIAGRAMA
dentro de los glóbulos rojos. Esta les da su color. Las
personas con anemia no tienen suficiente
hemoglobina.[8] Para realizar el equipo de espectrometría se debió tener
en cuenta el diseño para la detección de color y el diseño
para la gráfica de concentración.
2.5.3 ESCLEROSIS MÚLTIPLE.

La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad 3.1 DISEÑO PARA DETECCIÒN DE

autoinmunitaria que afecta el cerebro y la médula espinal COLOR
(sistema nervioso central).[9]
Como primer parámetro se diseñó un compartimiento de
La EM es causada por el daño a la vaina de mielina. Esta cartón el cual fue forrado en papel vinipel de color negro,
vaina es la cubierta protectora que rodea las neuronas. posteriormente se perforo un hueco en cada lado lateral
Cuando está cubierta de los nervios se daña, los impulsos de la caja, en la perforación 1 está ubicada la
nerviosos disminuyen o se detienen.[9] fotorresistencia y en la 2 va conectado tres leds de chorro
envueltos en aluminio para un mejor rayo de luz como se
El daño al nervio es causado por inflamación. La ilustra en la figura 3, y en medio de estos esta la probeta
inflamación ocurre cuando las células inmunitarias del sostenida por un soporte para que no se ladee y bloquee
propio cuerpo atacan el sistema nervioso. Esto puede el ruido de la luz ambiente como se muestra en la figura
ocurrir a lo largo de cualquier zona del cerebro, el nervio 4. Finalmente se etiquetan los respectivos colores para
óptico o la médula espinal. [9] identificar las enfermedades a diagnosticar como se
muestra en la figura 3.
Para diagnosticar esta enfermedad se realiza una
muestra de líquido cefalorraquídeo, extraído mediante
una punción lumbar, con el fin de detectar los niveles de
ciertas proteínas del sistema inmunológico y la presencia
de anticuerpos llamados “bandas oligoclonales”. Estas
bandas indican una respuesta inmune en el sistema
nervioso central y se encuentran en el fluido
cerebroespinal del 90% al 95% de las personas con
Esclerosis Múltiple.[9]

2.5.4 SHIGELLA.

La shigelosis es una infección intestinal aguda causada

por microorganismos gramnegativo especies de Shigella.
Sus síntomas son fiebre, náuseas, vómitos, tenesmo y
diarrea, que suele ser sanguinolenta.[10]
Su principal reservorio es el intestino del ser humano. En
países desarrollados, el modo de transmisión más
frecuente es de persona a persona. Se considera el
entero patógeno bacteriano más transmisible por esta vía.
[10]
Para diagnosticar esta enfermedad, implica extraer una
muestra de las heces para analizarlas en un laboratorio y
detectar la presencia de la bacteria shigela o sus toxinas.

2.5.5 DERRAME PLEURAL.

Los derrames pleurales son acumulaciones de líquido

dentro del espacio pleural. Tienen múltiples causas y en
general se clasifican como trasudados o exudados. [11]
La detección es por examen físico y radiografía de tórax; Figura 3. Comportamiento del espectrómetro.
para determinar la causa, a menudo se requieren la
toracocentesis y el análisis del líquido pleural. [11] El diagnostico simulado de las enfermedades
seleccionadas en el presente laboratorio fueron elegidas
El derrame pleural es causado por el líquido que se filtra relacionando su color y tipo de patología, como se explica
debido a la presión elevada de la sangre. En estos casos, la a continuación.
pleura está sana. El trasudado suele estar originado en su

3
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.

La enfermedad de color rojo es la anemia donde se Este circuito tiene la finalidad de medir el voltaje que va
diagnostica al tener deficiencia de hemoglobina en la disminuyendo o aumentando, dependiendo de la
sangre; la verde es la shigella, la cual es diagnosticada al muestra.
detectar la bacteria shigela en una muestra de heces, la
de color amarillo es la esclerosis múltiple que es
diagnosticada si se encuentran glándulas oligoclonales
de una recolección de líquido cefalorraquídeo; la azul
será derrame pleura, analizando el líquido pleural y el
blanco será la diabetes si se detecta alto nivel de glucosa
en la orina.

Figura 5. Circuito divisor de voltaje.

• Adquisición de datos.
Para esta fase se desarrolló un programa en LabVIEW,
en donde se adquiere los datos por medio de la DAQ y se
grafica para visualizar el voltaje como se ve en la figura 6.

Figura 4. Diseño interior del comportamiento del

espectrómetro.

Al tener el diseño del espectrómetro se procede a

realizar 3 fases, como se muestra en el diagrama de
bloques de la figura 5.

Figura 5. Diagrama de bloques.

• Fuente de luz.

Se realizó un pequeño circuito, conformada por 3 leds

enrollados en papel aluminio y ubicados dentro de la caja
Figura 6. Conexión de los diagramas de la DAQ con el
negra, conectados a 3 resistencias.
graficador de voltaje vs tiempo.
• Circuito divisor de voltaje.
Posteriormente se realiza un análisis de medición de
concentración de cada muestra para identificar su voltaje,
Se compone de 4 elementos como se muestra en la figura
y finalmente se realiza estructuras lógicas para
5. En donde el número 1 de la figura 5, es la fuente de
diagnosticar en tiempo real que muestra está en el
entrada que en este caso es alimentado por la DAQ con
equipo. Esto se podrá evidenciar a continuación:
5V, el 2 es la fotorresistencia que a mayor exposición de
intensidad de luz menor es su resistencia, el 3 es el cable
que va conectado a la DAQ para adquirir los datos de la
muestra al software de LabVIEW y el 4 es la tierra del
circuito.

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.

• Shigella.
• Anemia.

Figura 7. Equipo de espectrómetro con muestra roja. Figura 10. Equipo de espectrómetro con muestra verde.

Figura 11. Estructura de caso de Shigella en LabVIEW

con un intervalo de 1,5 a 1,7V.

Figura 8. Estructura de caso de anemia en LabVIEW con

un intervalo de 1,7 a 1,9V.

Figura 12. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de

shigella, led verde prendido.

Figura 9. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de

anemia, led rojo prendido.

5
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.

• Esclerosis múltiple.
• Derrame pleural.

Figura 13. Equipo de espectrómetro con muestra amarilla.

Figura 16. Equipo de espectrómetro con muestra azul.

Figura 14. Estructura de caso de esclerosis múltiple en

LabVIEW con un intervalo de 3,1 a 3,3V.

Figura 17. Estructura de caso de derrame pleural en

LabVIEW con un intervalo de 1 a 1,3V.

Figura 15. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de

esclerosis múltiple, led naranja prendido. Figura 18. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de
derrame pleural, led azul prendido.

6
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.

• Ambiente.

• Diabetes.

Figura 22. Estructura de caso de anemia en Labview con

un intervalo de 3,4 a 3,5V.

Figura 19. Equipo de espectrómetro con muestra de

agua.

Figura 23. Interfaz grafica del voltaje en ambiente, led

morado prendido.

Lo expuesto anteriormente podría entenderse mejor

mediante el diagrama de flujo de la figura 24.(Se
encuentra en anexos)

Figura 20. Estructura de caso de diabetes en LabVIEW

con un intervalo de 3,6 a 3,9V.

3.2 DIAGRAMA PARA LA GRAFICA DE

CONCENTRACIÒN DE LA MEZCLA VS
TIEMPO.

Para graficar la concentración en función del tiempo,

Figura 21. Interfaz gráfica del voltaje con diagnóstico de
diabetes, led blanco prendido.
se idealizo como primer parámetro un controlador el
cual va conectado junto con una gráfica de tipo
Waveform charts, esta grafica va trazando en función
del tiempo los cambios de una variable como lo es el
voltaje, el cual se interpretará como la concentración
de la muestra.
Sin embargo, se presenta un problema y es que
mientras se deposita más solución en la muestra, el
voltaje variara de forma no favorecedora para analizar
la concentración en función del tiempo.

7
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.
Para solucionar esto, se creó una estructura lógica que
va conectada con un switch, en la cual se introduce
dentro de esta estructura una variable local del control
como se visualiza en la figura 25.
Figura 25. Programación de bloques en LabVIEW para
grafica la concentración en función del tiempo.
Lo que va a hacer este programa, es que al activar el
switch grafica el voltaje que le está entrando a la DAQ,
mientras que si esta apagado graficara el ultimo dato
adquirido de manera constante.
En la figura 26, se puede visualizar en la gráfica derecha
un cambio de voltaje que queda constante por un tiempo,
ese lapso es en el que se desactiva el switch mientras se
agregar más solución a la muestra, adicionalmente se
puede observar que en el ultimo segmento graficado se
encuentra en el mismo voltaje que el de la gráfica del lado
izquierdo.
Figura 26. Graficas de voltaje vs tiempo y concentración
vs tiempo de la muestra de anemia. (roja)
4 CONCLUSION
Por medio de un acondicionamiento de un sensor
resistivo se logró desarrollar un sistema en el
programa LabVIEW para la medición de la
intensidad de la luz, en donde se evidencia el
cambio de color, es decir la enfermedad a la que
hace referencia, adicionalmente por medio de la
interfaz gráfica se determinó el cambio de
concentración que se propuso para cada
enfermedad.
Se comprobó por medio de la interfaz el voltaje de
cada pigmentación y por medio de un intervalo de
8
voltaje se determinaba que enfermedad se
presentaba, esto también se conoce como el tema
de espectrofotometría por lo que esta se basa en
medir cuanta luz absorbe una sustancia química,
para este laboratorio se evidencia en los tintes de
las distintas enfermedades, adicionalmente se
evidencia la importancia de realizar un buen
controlador para el tiempo, ya que en nuestro caso
se presentaron inconveniente en arrojar valores no
favorables para analizar la concentración.
Finalmente podemos destacar el sistema de swith
ya que gracias a este se logró comparar la gráfica
en el cambio de voltaje cuando esta es constante y
cuando presenta variaciones en la concentración,
adicionalmente es importante tener en cuenta que
unas de las patologías que se escogió es el derrame
pleural, pero en esta caso no se desea identificas
tal patología, si no realizar el análisis del líquido
(sangre) que se encuentra dentro de los pulmones
y de esta manera determinar la concentración que
existe.
5 REFERENCIAS
[1] J. L. L. S. Iván Arenas Sosa,
«ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN.,» Instituto
de Biotecnología, México., 2004.
[2] J. A. B. R. Nieves Abril Díaz, « Espectrofometría:
Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de
biomoléculas,» Departamento de Bioquímica y Biología
Molecular, Córdoba., 2016.
[3]R. Farhat, «La aplicación de la espectrofotometría de
derivada al análisis de benzodiazepinas en medios
químicos, biológicos y formas farmacéuticas diversas,»
Universidad de Granada , España, 2002.
[4] E. S.A., «El análisis de color: colorimetría y
colorímetro,» QuimiNet, México, 2019.
[5]Universidad Autónoma De Barcelona,
"Espectrofotometría UV-vis Servei d'Anàlisi Química",
Sct.uab.cat, 2016. [Online].Available:
http://sct.uab.cat/saq/es/content/espectrofotometria-uv-
vis.[Accessed: 30- Mar- 2020].
[6]K. M. Sensing, «Espectrofotometría de Absorción vs.
Rango de Espectrofotometría Ultravioleta Visible,»
Konica Miltona, California., 218.
[7]O. m. d. l. salud., «INFORME MUNDIAL SOBRE LA
DIABETES.,» Global-report, España, 2016.
[8]M. D. B. N. D. D. A. Dra. Aixalá, «SOCIEDAD
ARGENTINA DE HEMATOLOGÍA,» Laboratorio
Andromaco , Buenos Aires, 2012.
[9]W. B. D. J. M. A. R. J. L. CARRETERO ARES,
«Actualización: esclerosis múltiple,» Scielo.iscii, vol. 11,
nº 9, pp. 1-3, 2001.
[10]J.-I. A. Ana González-Torralbaa, «Shigelosis, la
importancia de la higiene en la prevención,» El sevier, vol.
33, nº 3, pp. 1-3, 2015.
[11]L. G. T. Rendon, «Derrame Pleural,» La clinica y el
laboratorio, vol. 15, nº 72, pp. 1-2, 2008.
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ANEXOS

Figura 24. Diagrama

de flujo de la fase de adquisición de señal.

Figura 27. Diagrama de flujo para grafica la concentración

de la muestra en función del tiempo.