REVISIÓN No.

:
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NUEVO LEÓN 08-14-02

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BACTEC 9120 HEMOCULTIVO P-SSNL-HMI-LAB-137

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CONTROL DE MODIFICACIONES Y REVISIONES

Firmas de
Pág Motivo del
No. Decía Dice Solicitud y de Fecha
. Cambio
Autorización

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

QFB Irma Yolanda Martinez

Huerta Dr. Carlos Gabriel Díaz
QCB Eleazar Vera Puente QCB Graciela Cantú González Olachea
Químico Analista Coordinador de Laboratorio Jefe de Laboratorio
Puesto y Firma Puesto y Firma Puesto y Firma
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OBJETIVO
Establecer un procedimiento manual que incluya una guía para la detección rápida de
bacterias y hongos en hemocultivos clínicos causantes de enfermedad en el paciente.

ALCANCE

Este examen reúne las condiciones necesarias para el diagnóstico in Vitro en pacientes en
estado gestacional así como en pacientes pediátricos.

RESPONSABILIDADES

Es responsabilidad del Jefe de Laboratorio

 Aprobar el presente documento

 Aplicar las medidas necesarias en caso de desviaciones en el cumplimiento de éste
procedimiento.

Es responsabilidad del Químico responsable de Calidad

 Coordinar y supervisar los procedimientos analíticos que se llevan a cabo en el

laboratorio, con la precisión y exactitud requerida para proporcionar resultados útiles
en el diagnóstico clínico.
 Mantener y mejorar la precisión de los resultados analíticos del laboratorio para
asegurar la confiabilidad de los mismos.
 Supervisión de la aplicación de control de calidad establecido en el laboratorio.
 Supervisar el mantenimiento preventivo y correctivo del equipo
 Revisar periódicamente y cuando se considere necesario los procedimientos de
proceso y documentación de calidad.

Es responsabilidad del Químico Analista

 Elaborar, revisar y mantener actualizado el presente documento.

 Verificar la ejecución correcta de este procedimiento y revisar los registros generados
durante la aplicación del presente documento.
 Aplicar los sistemas de control de calidad interno y externo.
 Preparar el material reactivo.
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 Documentar todas las actividades de control de calidad, calibraciones y

mantenimientos, ya sea preventivos o correctivos.
 Evaluar los resultados de acuerdo a los valores de referencia
.
 Validar el resultado.

DEFINICIONES

 Agar: Polisacárido seco extraído del alga marina japonesa y utilizado como un agente
solidificante en los medios de cultivo biológicos.
 Agar Sangre: Agar enriquecido con sangre para incrementar el cultivo de los
microorganismos con requerimientos especiales para el crecimiento y/o diferenciación
de colonias hemolíticas.
 Agar Mc Conkey: Medio empleado para aislar e identificar selectivamente a
enterobacterias como Salmonella, Shigella y coliformes a partir de heces, orinas,
aguas negras y diversos alimentos.
 Agar Sulfito de Bismuto: Medio de Wilson y Blair modificado altamente selectivo
para aislar Salmonella Typhi, así como bacilos entéricos de heces, aguas negras,
aguas de bebidas y diversos alimentos.
 Agar Verde Brillante: Es un medio muy selectivo para aislar Salmonella (excepto
Salmonella Typhi) y Shigella de heces, orina, leche y productos lácteos, y de otros
alimentos de importancia sanitaria.
 Agar Salmonella-Shigella: Medio diferencial selectivo para el aislamiento de bacilos
entéricos patógenos, especialmente los que pertenecen a los géneros Shigella y
Salmonella.
 Agar Chocolate: Medio selectivo para aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de
gérmenes difíciles por adición con sangre.
 Agar S110 :Medio selectivo para aislamiento y cultivo de estafilococos.
 Agar Papa-Dextrosa (PDA): Medio empleado para la identificación y cultivo de
levaduras.
 Caldo Tioglicolato: Caldo nutritivo para cultivo y aislamiento de microorganismos.
 Caldo Tetrationato: Caldo de enriquecimiento, principalmente útil para entero
bacterias del género Salmonella.
 Anaerobio, Facultativo: Microorganismo que únicamente crece con la falta total o
casi total de aire u oxígeno molecular.
 Aerobio, obligado: Microorganismo que vive y crece libremente en el aire y no en
condiciones anaeróbicas.
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 Antimicrobiano: Sustancia química que mata o inhibe el crecimiento microbiano.

 Asa bacteriológica: Instrumento de laboratorio que consta de una base hecha de
platino, hacer, aluminio, y un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno, o platino
que termina en una aro de 5mm. o en punta.
 Cepa: Variante fenotípica de una especie usualmente propagada clonalmente, para la
conservación de sus cualidades definitorias.
 Contaminación: Cualquier sustancia extraña que efectúa una incursión inadecuada.
 Equipo Vitek 2 compact: Sistema para identificar organismos mediante una
metodología basada en las características de los datos de cepas conocidas y de las
reacciones típicas de las especies a un juego de perfiles bioquímicos discriminantes.
Sí no se reconoce un patrón de identificación único, se presenta una lista de posibles
o se determina que la cepa está fuera del alcance de la base de datos.
 Espécimen: Parte de un individuo que se toma como muestra.
 Incubadora: Aparato con la función de crear un ambiente de humedad y temperatura
adecuada para el crecimiento de seres vivos.
 Infección Nosocomial: Infección contraída por paciente infectado en un recinto de
atención a la salud.
 KOH: Compuesto químico inorgánico usado para el aclaramiento de células de
levadura.
 Microscopio: Instrumento que permite observar objetos de tamaño muy reducido
especialmente células y organismos celulares.
 Microorganismos: Ser vivo que solo puede ser visualizado con el microscopio.
 Medio de Transporte: Medio de cultivo que es capaz de mantener viva una muestra o
cepa de microorganismos por un período prolongado.
 Medio de Cultivo: Mezcla de sustancias nutritivas en una forma sólida, semisólida o
líquida que reúne los requisitos para el crecimiento y la multiplicación bacteriana.
 Tarjetas para Identificación Gram (-): Para identificación de bacilos Gram (-)
fermentadores y no fermentadores, basada en métodos bioquímicos establecidos y
sustratos para medir la utilización de la fuente de carbono, las actividades enzimáticas
y la resistencia.
 Tarjetas para Identificación Gram (+): Para identificación de bacilos y cocos Gram
(+), basada en métodos bioquímicos establecidos y sustratos para medir la utilización
de la fuente de carbono, las actividades enzimáticas y la resistencia.
 Tarjetas para Identificación de Neisseria-Haemophilus: Para identificación de los
organismos más exigentes desde el punto de vista clínico, basada en métodos
bioquímicos establecidos y sustratos para medir la utilización de la fuente de carbono,
las actividades enzimáticas.
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 Tarjetas para Identificación Levaduras: Para identificación de Levaduras y

organismos similares, basada en métodos bioquímicos establecidos y sustratos para
medir la utilización de la fuente de carbono, la utilización de la fuente de nitrógeno y
las actividades enzimáticas.
 Tarjetas para Identificación de Anaerobios: Para identificación de bacterias
Anaerobias basada en métodos bioquímicos establecidos y sustratos para medir la
utilización de la fuente de carbono, y las actividades enzimáticas.
 Tinción de Gram: Tipo de tinción diferencial empleada en bacteriología para la
visualización de las bacterias.
 Estación: Pocillo individual de un rack donde se aloja un vial.
 Rack: Parte del instrumento que soporta los viales.

POLÍTICAS

IMPORTANCIA CLÍNICA
Un Hemocultivo positivo nos indica de manera inmediata, si el paciente presenta una
infección seria, lo que permite al médico administrar un antibiótico correcto al reporte de un
organismo específico.

TIPO, RECOLECCION Y MANEJO DEL ESPECIMEN

a) Tipo de espécimen: Sangre periférica.

b) Método de colección: Ver manual de toma de muestras (P-SSNL-HMI-LAB-022)

Enviar inmediatamente al laboratorio de microbiología para su análisis (en un plazo no

mayor de 1 hora a partir del momento de la obtención de la muestra.

PRINCIPIO DEL MÉTODO

Cuando hay microorganismos presentes, éstos metabolizan los nutrientes del medio de
cultivo, liberando dióxido de carbono (CO2) al medio. Un sensor de fluorescencia mide el
nivel de fluorescencia, que corresponde a la cantidad de CO2 liberado por los
microorganismos, el cuál es detectado por el sistema de acuerdo a parámetros pre
programados de positividad.

MATERIALES
1.- Botellas para hemocultivos aeróbicos adultos y pediátricos.
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ESTABILIDAD Y CONAERVACION DEL REACTIVO

QUIMICO ANALISTA

EQUIPO
1. BACTEC 9120

MANTENIMIENTO DE EQUIPOS
Los equipos deben de llevar su mantenimiento de acuerdo a lo establecido en el Programa
de Mantenimiento Preventivo y Correctivo de equipos.

DESCRIPCIÓN DEL PROCESO

 Las muestras deben recogerse asépticamente del paciente e inocularse en los viales.
 Una vez preparadas las muestras, debe de registrarse la solicitud del estudio en el
sistema pulsando la tecla F3,rellene los siguientes datos
 Identificación del Paciente.
 Nombre del Paciente.
 No. Muestra.
 Día de Extracción.
 Hora de Toma.
 Servicio Hospital.
 Escanear el vial y pulsar la tecla F10 para guardar los datos.
 Abrir las puertas del instrumento BACTEC 9120, tomar la pistola escanear el código
de barra de la puerta que indica vial entry, escanear el vial y el equipo nos asignara el
lugar donde colocar el vial en la estación.

HEMOCULTIVOS POSITIVOS

 El instrumento nos indicará a través de una alarma audible y la iluminación en la parte

frontal como vial positivo.
 Abrir las puertas del instrumento.
 Tomar el lector de código de barras y escanear la opción de menú Retirar Positivos.
 Localice una estación que tenga el led rojo intermitente y extraiga el vial.
 Escanee la etiqueta de código de barras del vial.
 Cierre las puertas del instrumento.
 El vial positivo debe de subcultivarse en los 5 tipos de medios de cultivo que se
utilizan en este hospital y además se realizara una tinción de Gram.
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HEMOCULTIVOS NEGATIVO
 El instrumento nos indicará a través del monitor del instrumento el vial negativo.
 Abrir las puertas del instrumento.
 Tomar el lector de código de barras y escanear la opción de menú Retirar Negativos.
 Localice una estación que tenga el led verde intermitente y extraiga el vial.
 No escanee la etiqueta de código de barras del vial.
 Cierre las puertas del instrumento.
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DIAGRAMA DE FLUJO
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INTERPRETACIÓN
Los Hemocultivos positivos se detectarán en las primeras 24 horas después de la
inoculación.

Los Hemocultivos negativos deben de conservarse durante 5-7 días antes de ser
desechados como negativos.

LIMITACIONES DE LA PRUEBA:

 Por contaminación proveniente de piel, que dan resultados falsos positivos.

94% corresponden a Staphylococcus coagulasa (-)
Bacillus spp. Propionibacterium acne, Corynebacterium spp. Se consideran
patógenos cuando se aíslan en hemocultivos múltiples en pacientes inmunodeprimidos o
portadores de dispositivos protésicos como catéteres venosos, válvulas etc.

CONTROL DE REGISTROS
Registro Almacenaje Recuperación Retención mínima
BITACORA DE Electrónico e impreso Calidad Indefinido
MANTENIMIENTO
PREVENTIVO
BACTEC 9120
F-SSNL-HMI-LAB-
081 01-13-00

BIBLIOGRAFÍA

1. -- Todd. Sanford.Davidsohn and Henry, J.B.

2. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods.

3. 17 Th Edition.W.B. Saunders Company, Philadelphia.

4. Manual del usuario de la serie fluoresente BACTEC 9120