UNIVERSIDAD PRIVADA INCA GARCILASO DE LA VEGA

Práctica N° 3: Recuento de microorganismos

Asignatura:
Microbiología Farmacéutica

Sección:
1-A

Docente:

Integrantes:

2019
 1. INTRODUCCION

El área microbiológica forma parte de las actividades cotidianas, diariamente los

microorganismos los encontramos participando de manera benéfica y perjudicial,
desarrollando diferentes papeles. En el área biológica, una de las tareas es el
aislamiento y la identificación. Dependiendo del tipo de muestra y análisis es
necesario conocer el número de unidades formadoras de colonias (UFC) presentes,
este número es tomado en cuenta para cumplir los estándares establecidos bajo
normatividad en el área de los alimentos, en el área de salud, análisis de agua, aire
y suelo entre otros. Para estos análisis los expertos de estas áreas realizan conteos
manuales o muy rudimentarios que consumen grandes cantidades de tiempo con
resultados que varían según quien realice el conteo.

En este informe se propone observar las formaciones de colonias en este caso de

la Escherichia Coli (E. Coli) que es una bacteria anaerobia gram negativa.

2. OBJETIVOS

- Aprender a realizar una tinción y un sembrado a placa o portaobjetos.

- Determinar y observar las colonias de bacterias en un recuento bacteriano.

 3. MARCO TEORICO

Escherichia coli:
Esta bacteria fue descubierta en 1885 por el bacteriólogo alemán Theodor
Escherich. Es un bacilo Gram negativo, no esporulado que forma parte de la
microflora anaeróbica facultativa del tracto gastrointestinal del hombre y de algunos
animales.
Características:
Escherichia coli es un bacilo Gram (-), aerobio y considerado como anaerobio
facultativo, con flagelos peritricos; es parte de la flora bacteriana intestinal de los
seres humanos y de algunos animales de sangre caliente como saprobio, ya que es
una bacteria mesófila; por ende, es sensible a temperaturas inferiores a los 7°C y
superiores de los 70°C. Posee una sola cadena espiral de ADN, con una carga
genética de 5 000 genes.
Estructura:
Al ser una bacteria Gram (-) posee estructuras típicas como la cubierta que consta
de 3 elementos básicos: la membrana citoplasmática, la membrana externa y el 7
espacio periplasmático constituido por péptidoglucano, la cual le brinda forma y
rigidez, además de permitir la resistencia a situaciones adversas. Inclusive se
pueden hallar fimbrias y estructuras relacionadas a la patogenicidad de la bacteria.
Taxonomía:
Esta bacteria pertenece al género Escherichia, de la tribu Escherichieae,
perteneciente a Enterobacteiaceae como se puede observar en la figura 2
 Conteo

microbiano:
El conteo bacteriano señala la magnitud de la población total bacteriana. En ese
sentido se puede determinar por diversas técnicas que se basan en algunos de los
siguientes tipos de medida: cuenta celular (directamente al microscopio o mediante
un contador electrónico de partículas o indirectamente con la cuenta de colonias),
masa celular (en forma directa pesando el contenido celular del nitrógeno o
indirectamente por turbidimetría, proporcional al número de células) y actividad
celular (indirectamente relacionando el grado de actividad bioquímica al tamaño de
la población bacteriana). Veremos algunos tipos de conteos de microorganismos:

Método extendido en placa:

- Es el método de elección para anaerobios facultativos y cultivo de
microaerofilos.

Metido de vertido de placa:

- Esta técnica se usa generalmente para bacterias aerobias obligatorias.

4. MATERIALES Y EQUIPOS

- Safranina
- Cristal violeta
- Lugol
- Alcohol acido
- Ansa bacteriológica
- Pinza
- Agua destilada
- Placa petri con muestra de E. Coli
- Soporte para tinción
- Mechero
- Microscopio
- Portaobjetos
 5. PROCESO EXPERIMENTAL

Comenzamos tomando el portaobjeto con la pinza y la esterilizamos en

el mechero. Paso seguido, tomamos una muestra de E. Coli de la placa
petri con el ansa y la sembramos en el portaobjetos.

Luego añadimos 2 gotas de agua destilada y la extendemos por el

centro de la placa, secamos con el calor del mechero y lo fijamos.
Colocamos la muestra en el soporte y cristal violeta en toda la placa y
dejamos por 1 minuto y lavamos suavemente con agua destilada.

Agregamos lugol y volvemos a lavar con agua destilada.

Agregamos 2 gotas de alcohol cetona por 30 minutos
para despintar restos, lavamos con agua destilada.
Luego llevamos al microscopio y observamos.
 6. RESULTADOS

Se puede observar a la bacteria que es

una gram positiva porque tiene una
tinción azul. Tiene forma de cocos y de
racimos como los diplococos.
7. CONCLUSIONES

- Las técnicas de recuento rápido permiten una contabilización aproximada

de bacterias de una forma
rápida y eficiente a comparación de otras técnicas.

- Pudimos determinar la alta concentración de carba bacteriana que tenía la

muestra.

- Se realizó la identificación y cuantificación de microorganismos, en este

caso la E. Coli

8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

- Arango, Y. A., López, C. A., Pino, N. J., & Echeverry, D. N. P. (2016).

Manual de prácticas de laboratorio de Microbiología general (1st ed.).
Medellín, Antioquia.

- Membrillo-Hernández, J., A. Nuñez-de la Mora, T. del Rio-Albrechtsen, R.

Camacho-Carranza & M. C. Gómez-Eichelmann. 1995. Thermally-induced
cell lysis in Escherichia coli K12. J. Basic Microbiol. 35:45-50.

- De Vidania, R., Garcés, F., Parametrización integrada de la curva de

crecimiento bacteriano, comprobación experimental. 1984. 108: 102-104.