CROMATOGRAFIA

La cromatografía es esencialmente un método físico de separación en el que los componentes a

separar se distribuyen entre dos fases, una inmóvil (lecho estacionario), y otra móvil (fase móvil) la
cual percola a través de la primera. El proceso cromatógrafo se da como resultado de repetidos
procesos de sorcion –desorcion durante el movimiento de los componentes de la mezcla
arrastrados por la fase móvil a lo largo del lecho estacionario (elución), produciéndose la
separación debido a las diferencias en las constantes de distribución de los componentes de la
mezcla entre la fase estacionaria y la móvil. A la distribución final de los componentes en función
de la posición sobre el lecho estacionario. O del tiempo en que eluyen se le denomina
cromatograma

Métodos Cromatográficos.
La separación de mezclas de compuestos en las sustancias puras y su
cuantificación revisten gran importancia dentro del trabajo del laboratorio químico.
Solamente así puede analizarse adecuadamente la pureza de un compuesto o la
composición de una mezcla de diversos componentes.

No solo el control de calidad, los análisis de alimentos o del medio ambiente, sino
también el control y la optimización de reacciones y procesos químicos se basan en
la determinación analítica de las cantidades de material. Una técnica importante
para la separación de materiales analítica y preparativa es la cromatografía.

El principio de la cromatografía, en la forma en que se usa en la actualidad, la

descubrió el botánico Michael Tswett (1872-1919). Publico en 1906 un
procedimiento relativo a la separación y aislamiento de pigmentos verdes y amarillos
vegetales de las hojas por cromatografía de absorción.
 CARACTERISTICAS

 Ponen en contacto dos fases mutuamente inmiscibles.

 Una fase es estacionaria y la otra móvil.

  Una muestra que se introduce en la fase móvil es transportada a lo largo de
la columna (colector) que contiene una fase estacionaria distribuida.

 Las especies de la muestra experimentan interacciones repetidas (repartos)

entre la fase móvil y la fase estacionaria. Cuando ambas fases se han
escogido en forma apropiada, los componentes de la muestra se separan
gradualmente en bandas en la fase móvil.

 Los componentes separados emergen en orden creciente en interacción con

la fase estacionaria.

 El componente menos retardado emerge primero, el retenido más

fuertemente eluye al último.

 La fase móvil puede ser un gas o un líquido, mientras que la fase estacionaria
sólo puede ser un líquido o un sólido.

TIPOS DE MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS.

F. estacionaria F. móvil Soporte Cromatografía Siglas

sólido gas columna sólido-gas G.S.C / G.C

(adsorción) líquido columna líquida C.L / H.P.L.C
capa fina en papel y/o T.L.C
capa fina

líquido gas columna líquido-líquido C.G.L

(partición) liquido columna gas-líquido C.L.L / H.P.L.C

resina líquido columna intercambio

(intercambio iónico
iónico)

gel líquido columna filtración de gel

(filtración en )
*H.P.L.C : cromatografía líquida de alta presión.
Aunque hay muchas y variadas técnicas cromatográficas, el objetivo de todas es
separar las sustancias que forman una mezcla y enviarlas secuencialmente a un
detector para que las determine y cuantifique.

Todas se basan en el mismo fenómeno: permitir que las sustancias que forman una
mezcla entren en contacto con dos fases. Una de las fases es estática y tenderá a
retener las sustancias en mayor o menor grado; la otra, fase móvil, tenderá a
arrastrarlas.

Estas fases consisten en:

Fase estática o estacionaria: la mezcla se coloca sobre un soporte fijo

Que a su vez se divide en 2

CROMATOGRÁFIA PLANA.
Cromatografía Plana: La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre
un papel. Las principales técnicas son: Cromatografía en papel y Cromatografía en
capa fina.
 Cromatográfia en columna.

Cromatografía en Columna: La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna.

Según el tipo de fluido empleado como fase móvil se distinguen: Cromatografía de
líquidos (LC), Cromatografía de Gases (GC) y Cromatografía de fluidos
supercríticos (SFF)

Fase móvil: se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya está sobre el
soporte de la fase estática. En la fase móvil empezará el proceso de separación de
los componentes de la mezcla al moverse a distintas velocidades.

Cromatografía sólido-líquido. La fase estática o estacionaria es un sólido y la móvil

un líquido.

Cromatografía líquido-líquido. La fase estática o estacionaria es un líquido anclado

a un soporte sólido.

Cromatografía líquido-gas. La fase estática o estacionaria es un líquido no volátil

impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.

Cromatografía sólido-gas. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un gas.

Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la mezcla

y la fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre.

Cromatografía de adsorción. La fase estacionaria es un sólido polar capaz de

adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.
La adsorción es la capacidad de las superficies para fijar moléculas.
Cromatografía de partición. La separación se basa en las diferencias de solubilidad
de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil, que son ambas
líquidas.

Cromatografía de intercambio iónico. La fase estacionaria es un sólido que lleva

anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por
aquellos iones presentes en la fase móvil.

EJEMPLOS DE CROMATOGRÁFIA:

Sobre un mantel blanco se derrama un poco de vino tinto, transcurrido un tiempo se

observa que la mancha no es uniforme, sino que hay una zona con predominio de tonos
azules y otra en que la tonalidad es roja. Eso es porque se ha producido una separación
cromatográfica de los pigmentos del vino.
 Las tintas de los rotuladores son una mezcla compuesta por algún disolvente y
diferentes pigmentos. Algunos colores, como el negro, suelen ser mezcla de dos o tres
pigmentos diferentes. Para separar estos pigmentos podemos realizar una
cromatografía.

- Se suele usar para tomar pruebas de la escena de un crimen (el análisis de muestras
de sangre o de telas).

- Verificación de incendios provocados (identificación de las sustancias químicas

responsables de un fuego).

- Análisis de sangre después de la muerte o en vida para determinar los niveles de

alcohol, drogas o sustancias venenosas en el cuerpo.

- También se utiliza para determinar la composición de los alimentos.

- Para mirar los niveles de contaminación, por ejemplo, del agua o del aire.

- Para el estudio de mezclas complejas en cosas tales como alimentos, perfumes,

petroquímica, y producción farmacéutica.