BIOSEGURIDAD

Objetivo de la práctica
 Identificaran los procedimientos y los materiales de Bioseguridad que se
utilizan en el laboratorio
Descripción del desarrollo de la práctica
1.- El docente a cargo del trabajo práctico deberá pedir las llaves del laboratorio, en
coordinación de laboratorio central de la Escuela de Estomatología y registrar en la
planilla correspondiente la fecha, horario y firma del retiro y devolución de las mismas.
2.- Los docentes y alumnos dejarán sus pertenencias en los armarios ubicados en el
salón de usos múltiples, e ingresar con la vestimenta adecuada (delantal y cofia).
3.- Se recomienda llevar candado, precinto de seguridad o lo que se considere
conveniente para garantizar la seguridad. Una vez finalizada la clase, los armarios
deberán quedar disponibles (vacíos y abiertos) para el próximo grupo de trabajo.
4.- Se identificara cada tipo de material de bioseguridad.
5.-Utilizar la vestimenta adecuada y limpia (cofia y delantal). Las visitas eventuales,
deben utilizar cofia y delantal, no pudiendo permanecer con ropa de calle en el
laboratorio. No se puede ingresar, transitar o permanecer con ropa de calle.
6.- La puerta del laboratorio deberá permanecer cerrada durante la realización del
práctico.
Procedimientos previos al comienzo del trabajo práctico
1.- Lavado de manos: a. Agua caliente + Jabón / Detergente
b. Formación de espuma + Fricción por 20 segundos
c. Enjuagar y secar con papel Es necesario realizar el lavado adecuado de manos en
los siguientes casos:
a. Antes de comenzar la actividad
b. Después que utilizar el sanitario
c. Después de manipular alimentos crudos, cocidos, listos para consumir
d. Luego de tocar la basura
e. Al término de la actividad
2.- Higiene de las mesadas y los utensilios de trabajo.
3.- Los contenedores de residuos deben estar con sus tapas y con bolsa negra, o color
establecido por la legislación vigente. Se limpiarán y desinfectarán cada vez que se
vacíen.
4.- En la mesada de trabajo solo se colocarán los alimentos que vayan a utilizar y
alguna libreta / cuaderno para anotaciones.
Seguridad y calor
 Utilice los mecheros de alcohol o de gas según las instrucciones del profesor.
 Apague la llama una vez que terminó de usarlo.
 No tire los fósforos utilizados para encender los mecheros en el tacho de basura
con papeles.
 Aleje su cabeza, ropa y cabello del mechero encendido. Amárrese el cabello si lo
tiene largo.
 Aleje material inflamable como libros y papeles del mechero encendido. No
coloque ningún objeto al fuego a no ser que se lo indiquen.
 Cuando caliente una sustancia en un tubo de ensayo, no apunte el tubo hacia
usted u otra persona.
 Use pinzas para manipular material de vidrio caliente
Seguridad y reactivos químicos
 Use lentes de seguridad cuando trabaje con reactivos químicos peligrosos que
puedan salpicar o derramarse.
 Lea la etiqueta del frasco antes de utilizar su contenido. Nunca utilice reactivos de
frascos no etiquetados.
 Utilice sólo la cantidad requerida. No devuelva el excedente al frasco.
 Utilice una bombilla de succión para transferir líquidos con una pipeta. No use la
boca.
 Nunca agregue agua sobre ácidos fuertes. El calor que se genera causa que
salpique.
 Agregue el ácido lentamente sobre el agua.
 No inhale directamente ningún reactivo. Agite el aire por encima del reactivo hacia
su nariz y huela cuidadosamente.
 Cuando trabaje con sustancia inflamable (éter, cloroformo, bencina) evite prender
fósforos o mecheros. Si necesita calentarlos utilice una cocinilla eléctrica.
 Si cualquier sustancia toca su piel lávese inmediatamente con abundante agua.
Seguridad y electricidad
 Manipule cualquier equipo eléctrico con las manos secas y asegúrese que el área
de trabajo también esté seca.
 No permita que ningún cordón eléctrico esté colgando fuera de las mesas de
trabajo.
 No utilice ningún equipo eléctrico con cordones pelados, conexiones sueltas o
alambres expuestos. Avise al profesor si algún equipo se encuentra en esas
condiciones.
 Cuando desconecte algún equipo de tomacorrientes, jálelo por el enchufe y no por
el cordón.
Seguridad y material de vidrio
 Use material de vidrio limpio y no rajado.
 No fuerce tubos de vidrio o termómetros en los agujeros de los tapones de jebe.
Lubrique el vidrio con agua o glicerina e insértelo suavemente en el tapón con un
movimiento de torsión.
 Si se rompe un material de vidrio, avise inmediatamente a su profesor. Cuídese de
no cortarse con los vidrios rotos.
 Nunca juegue con el mercurio de un termómetro roto. Notifique a su profesor
inmediatamente si se rompe un termómetro.
Seguridad y especímenes
 Manipule los microorganismos crecidos en una placa petri o tubo de cultivo con
extremo cuidado. Siempre utilice técnicas de esterilidad.
 Algunas plantas pueden ser venenosas, nunca lleva a la boca plantas
desconocidas o parte de ellas como semillas, frutos y hojas.
 Trate a los animales que utiliza en el laboratorio de manera humanitaria y
manipúlelos con cuidado.
 Si se va a disecar un animal, hágalo sobre una tabla de disección. No intente
cortarlo mientras lo tiene en sus manos.

BALANZA ANÁLITICA

Objetivo de la práctica
Conoce el uso y los cuidados que se debe tener con una balanza analítica.

Descripción del desarrollo de la práctica

Materiales y equipos
De Laboratorio:
- Luna de reloj - Vaso de precipitados 50 mL

- Espátulas - Silicagel desecante

- Balanza triple brazo - Balanza analítica

Fundamento

La BALANZA ANALÍTICA es un instrumento de medición que se utiliza para saber

cuánta masa tiene un objeto determinado. A diferencia de la BALANZA GRANATARIA,
la analítica es un instrumento mucho más preciso y por lo tanto más delicado, una
balanza analítica nos proporciona un margen de error menor que cualquier balanza
granataria. Actualmente existen balanzas analíticas que pueden manejar cantidades
del orden de los microgramos. Una de las desventajas de este tipo de balanzas es su
mantenimiento, debido a que para lograr una mayor precisión, el equipo se vuelve más
sensible al medio ambiente y por lo tanto su mantenimiento debe ser riguroso. El buen
uso de la balanza analítica depende del cuidado que nosotros le dediquemos, ya que
este instrumento es sumamente sensible al medio, de manera que las medidas que
debemos tomar respecto a su cuidado son las siguientes:

1. Las balanzas analíticas deberán encontrarse en un lugar cerrado, cuando

entremos en él no se deberá dejar nunca la puerta abierta, ya que el aire puede mover
la balanza y por su alta sensibilidad puede alterarse la lectura correspondiente.

2. Antes de empezar a trabajar con la balanza se debe limpiar cuidadosamente el

área de trabajo, es decir, el platillo, el área alrededor del platillo y la mesa en donde se
encuentra, pues de otro modo el polvo o basuritas pueden introducirse en la balanza y
afectar el peso.

3. Nunca hay que recargarse ni escribir en la mesa de trabajo pues se puede

descalibrar la balanza, produciéndose los consecuentes errores.

Procedimientos:
Se pesa el recipiente idóneo que ha de contener a la muestra (esto se llama tarar). Se
retira de la balanza y una vez fuera se añade la sustancia que se quiere pesar con una
espátula, si es un sólido, o se adiciona con una pipeta, si es un líquido. Siempre se debe
retirar el recipiente del plato de la balanza para adicionar el producto, para evitar que se
nos caiga un poco sobre el plato y deteriore a la balanza. El recipiente con la muestra se
vuelve a colocar en el centro del plato de la balanza y se efectúa la lectura de pesada.
Hay que anotar el peso exacto, indicando todas las cifras decimales que dé la balanza
utilizada. La diferencia entre este valor de pesada y la tara nos dará el peso del producto.
Después de pesar se ha de descargar la balanza, es decir ponerla a cero (a menos que
las indicaciones del fabricante aconsejen otra cosa).
La cámara de pesada y el plato de la balanza se deben dejar perfectamente limpios.
Entre dos pesadas independientes hay que lavar la espátula con el disolvente adecuado,
en general agua des ionizada y secarla.

VOLUMETRIA REDOX: PERMANGANIMETRÍA

OBJETIVO

Prepara y estandariza solución de KMnO4 0,100 N para emplearla en volumetría

redox.

Adquiere dominio en el manejo de reactivos y materiales.

Descripción del desarrollo de la práctica

Materiales y equipos

Materiales del laboratorio:

- Vaso beaker 250 mL - piceta con agua

- Balanza analítica - KMnO4 sólido

- matraz Erlenmeyer de 250 mL - luna de reloj

- cocinilla - matraz de 1 litro

- bureta de 25 mL - Na2C2O4 p.a

Fundamento

Volumetría basada en reacción redox entre el permanganato de potasio (oxidante) y

algún analito de carácter reductor.
El patrón primario para estandarizar una solución de permanganato de potasio es el
oxalato de sodio.

Oxalato de Sodio: Na2C2O4

Se dispone de este reactivo comercialmente en estado muy puro, se disuelve en
medio ácido sulfúrico, formándose ácido oxálico no disociado.
2 MnO4-1 + 5 H2C2O4 + 6 H+1 → 2 Mn+2 + 10 CO2 + 8 H2O
El mecanismo por el cual transcurre esta reacción es extraordinariamente complicado,
y sólo se obtienen resultados analíticos reproducibles y estequiométricos cuando se
satisfacen ciertas condiciones empíricas:
· Debe valorarse a unos 70 ºC para favorecer la velocidad de reacción
· A medida que avanza la reacción, el valorante reacciona cada vez con mayor
rapidez, hasta que la reacción se vuelve prácticamente instantánea, constituyendo un
proceso autocatalítico, en el cual uno de los productos de la reacción funciona como
un catalizador, se forman complejos de oxalato de Mn(III).
4 Mn+2 + MnO4-1 + 15 C2O4-2 + 8 H+1 → 5 Mn(C2O4)3-3 + 4 H2O
· Estos complejos de Mn(III) se descomponen en varios pasos, formando Mn+2 y CO2:
2 Mn(C2O4)3-3 → 2 Mn+2 + 2 CO2 + 5 C2O4-2
El resultado neto de todas estas reacciones es que el H2C2O4 se oxida a CO2 , el
KMnO4 se reduce a Mn+2 y se obedece la estequiometría de reacción deseada.

Procedimiento

a) PREPARACIÓN Y ESTANDARIZACIÓN DE PERMANGANATO DE POTASIO 0,1

N:
PM KMnO4 : 158 g/mol
Luego: MnO4-1 + 8 H+1 + 5 e-1 → Mn+2 + 4 H2O Eq = PM / 5 = 32 g/eq
Tomar 0,8 g de KMnO4 y llevar a 250 ml para lograr una solución 0,1 N.

Tomar 0,8 g de KMnO4 sólido (sobre vidrio de reloj), pasar a erlenmeyer de 250 litros
adicionando agua hasta 1000 ml. Tapar con vidrio de reloj, hervir suavemente de 15 a
20 minutos. Enfriar, completar el agua evaporada. Filtrar por lana de vidrio o crisol de
porcelana, NUNCA PAPEL, se retendrá el MnO2 (producto de la reducción por la
materia orgánica), también puede decantarse cuidadosamente. El líquido filtrado se
pasa a frasco oscuro (bien limpio y excento de materia orgánica).

3.2 g KMnO4----------------- > 1000 ml

X ------------------> 250 ml

X= 0.8

Formula:

#Eq-q (sto) wsto/ P.E

N= ----------------- = --------------
V sol (l) V sol (l)

M 158
P.E= ----------------- = ------- = 31.6
Q 5

Wsto/31.6
0.1= ----------------- =
0.25

WSTO= N * V sol (l) * P.E

WSTO= 0.1 * 0.25 * 31.6

WSTO= 0.79 g
 Vamos a pesar el permanganato 0.79 g en la balanza analítica

+
=

 Luego en el matraz medir 250 ml de agua destilada y diluir con el

permanganato
 Luego que hemos diluimos vamos a calentar en 10 a 15 minutos en la cocina
eléctrica llegar una temperatura 70 C y luego lo filtramos

 Una vez filtrado colocamos en un frasco oscura

b) ESTANDARIZACIÓN:
Utilizaremos Oxalato de sodio.
PM Na2C2O4 : 134 g/mol
Como: C2O4-2 → 2 CO2 + 2 e-1
1000 ml KMnO4 0,1 N 6,7 g Na2C2O4
Estimamos consumir en la estandarización unos 20 ml de KMnO4, de manera que
pesamos:
1000 ml KMnO4 0,1 N → 6,7 g Na2C2O4
20 ml KMnO4 0,1 N → x = 0,134 g Na2C2O4
Los 0,134 g de Na2C2O4 se pesan y se pasan a Erlenmeyer de 500 ml, se adicionan
250 ml de agua destilada y 10 ml de H2SO4 concentrado (con cuidado). Se agita y
calienta suavemente, hasta unos 60ºC. Se titula desde bureta color caramelo con el
KMnO4 reduciendo la velocidad gota a gota hasta llegar al punto final en que la
solución se torna color rosado permanente.

ESTANDARIZACIÓN CON Na2C2O4 (oxalato de sodio) en 0.1 N

250ml 0.1N KMnO4----------------- > 1.67g Na2C2O4

5ml 0.1N KMnO4 ------------------> X

X= 0.0334 g Na2C2O4

Formula:

#Eq-q (sto) wsto/ P.E

N= ----------------- = --------------
V sol (l) V sol (l)
 M 134
P.E= ----------------- = ------- =67
Q 2

Wsto/67
0.1= -----------------
0.005

WSTO= N * V sol (l) * P.E

WSTO= 0.1 * 0.005 * 67

WSTO= 0.0335g

 Vamos a pesar oxalato de sodio 0.0335 g en la balanza analítica

+
=
 Luego en el matraz medir 6.5 ml de agua destilada y diluir con el oxalato de
sodio

 AGREGAMOS 2.5ml DE H2SO4 al oxalato de sodio diluido en 62.5ml de agua destilada.

  Vamos a comenzar hacer la reacción con el permanganato y con el oxálico en
medio acido

HAY COMENZAMOS CON LA TITULACION CON LA REACCION YA QUE EL

PERMAGANATO (ESTA EN LA PARTE DE ARRIBA) ESTA CAENDO GOTA POR
GOTA QUE REACCONE CON EL OXALICO MEDIO ACIDO, HASTA LLEGAR AL
PUNTO FINAL EN QUE LA SOLUCIÓN SE TORNA COLOR ROSADO
PERMANENTE

SE TORNO DE COLOR ROSA CON UN GASTO DE 4.7ML DE PERMAGANATO

CON ESTA FINALIDAD SE HIZO EL PUNTO DEL EQUILIBRIO
REACION GENERAL : KMnO4 y Na2C2O4
c) DETERMINACIÓN DE AGUA OXIGENADA
El H2O2 es oxidante en medio alcalino y reductora en medio ácido.
DETERMINACIÓN DEL OXÍGENO ACTIVO:
Entiéndese por oxígeno activo, al volumen de oxígeno que desprende un volumen de
H2O2, por ejemplo, si es de 10 volúmenes significa que al descomponerse totalmente
libera 10 veces su volumen de Oxígeno (medidos a 0ºC y 760 mmHg).
Reacción: En medio H2SO4
2 KMnO4 + 3 H2SO4 + 5 H2O2 → K2SO4 + 2 MnSO4 + 8 H2O + 5 O2

Procedimiento:
· Se colocan 50 ml de H2O2 en un matraz aforado y se diluyen a 500 ml con agua
destilada:
· Se toman luego 10 ml y se colocan en un erlenmeyer con 10 ml de H2SO4 1:4
· Se lleva a un volumen cómodo con agua (por ejemplo 100 ml)
· Se titula en frío con el KMnO4 estandarizado (por ejemplo 0,1 N) hasta permanencia
de color rosado. Al comenzar la titulación suele observarse que las primeras gotas de
KMnO4 no se decoloran en seguida (como si no sucediera nada), esto se debe a las
sustancias estabilizantes que tienen las aguas oxigenadas (para que no pierdan el
oxígeno en el transcurso de ltiempo), así entonces se le adiciona Mn+2, que cataliza la
reacción redox entre el H2O2 y el KMnO4. En algunas aguas oxigenadas no tan
estables las primeras gotas de KMnO4 se decoloran rápidamente pasando a Mn+2 no
siendo necesario su agregado.
La reacción por pasos resulta: (en medio ácido sulfúrico)
2 ( MnO4-1 + 8 H+1 + 5 e-1 → Mn+2 + 4 H2O )
5 ( H2O2 → 2 H+1 + O2 + 2 e-1 )
2 MnO4-1 + 6 H+1 + 5 H2O2 → 2 Mn+2 + 5 O2 + 8 H2O

Cálculos:
Eq. KMnO4 = 158,03395 / 5 = 31,6068 g/eq
Luego:
O2 = 32 g/mol « 22,414 litros
O = 16 g → 11,207 litros
O/2 = 8 g « 5,603 litros → 1 equivalente de oxígeno
Entonces: Eq. H2O2 = PM / 2 = 34,0146 / 2 = 17,0073 g/eq
31,6 g KMnO4 = 8 g Oxígeno = 5,6 litros de Oxígeno = 17,0073 g H2O2
Luego:
% H2O2 p/v = V * N * 0,017 * 100 / Vm
% O2 p/v = V . N ( 0,008) X 100 / Vm
O2 v/v = V . N X 5,6 / Vm
Ejemplos:
· ¿Qué volumen tendrá un H2O2 si 50 ml de la misma consumen 89,5 ml de KMnO4
0,1 N?
O2 v/v = 89,5 * 0,1 * 5,6 / 50 = 1 v/v
Esto indica que 50 ml de H2O2 liberan 50 ml de oxígeno, esto es, 1 volumen.
· ¿Cuántos ml de H2O2 de 100 volúmenes se necesitarán para preparar 100 ml de
otra disolución al 3 % p/v?
Ecuación de descomposición del H2O2: H2O2 → H2O + ½ O2
Luego: 1 mol H2O2 (34 g) en 1 litro liberan : 11,2 litros de oxígeno (11,2 volúmenes)
Luego: 34 g/l 11,2 litros O2 , 303,5 g/l = x → 100 litros O2
Luego: 303,5 g → 1000 ml, 30,35 g = x → 100 ml => 30,35 %
Entonces: Sabemos que la cantidad de sustancia disuelta es siempre igual al producto
del volumen por la concentración, siendo entonces:
V1 * C1 = V2 * C2 => V1 = 100 * 3 / 30,35 = 10 ml
· Si en una valoración de H2O2 por permanganimetría tal como indicamos en la
técnica se hubiesen consumido 16,8 ml de KMnO4 0,1 N, calcular el % p/v de H2O2, los
volúmenes de H2O2 y el % p/v en Oxígeno.( Resulta una muestra de 1 ml, ver
procedimiento página 27)

a) 1 ml KMnO4 0,1 N → 0,017 g H2O2

16,8 ml « x = 0,0286 g H2O2
Luego: % H2O2 p/v = 16,8 * 0,1 * 0,017 * 100 / 1 = 2,86 %
O sea: 100 ml H2O2 tienen 2,856 g H2O2

b) 1000 ml KMnO4 1 N (1 átomo gramo) « 11207 ml O2 (1 átomo gramo)

1 ml KMnO4 0,1 N → 0,56 ml O2
16,8 ml → x = 9,4 ml O2
O sea: H2O2 9,4 volúmenes
Otra forma de cálculo: v/v O2 = 16,8 * 0,1 * 5,6 / 1 = 9,4 volúmenes
c) 1 ml KMnO4 0,1 N « 0,008 g O2
16,8 ml → x = 0,01344 g O2 en la muestra
Luego: 0,001344 g O2 → 1 ml muestra
1,344 g O2 = x → 100 ml muestra => 1,34 % p/v O2
O también: % p/v O2 = 16,8 * 0,1 * 0,008 * 100 / 1 = 1,34 %
 MEDIMOS 25 ML DE PERODIXO DE HIDROGENO (REDUCTOR) + 250 ml de agua
destilada

 SACAMOS UNA LICUOTA DE 10 ML DE LO MENCIONADO Y LO PONEMOS

ERLENMEYER
  Vamos a comenzar hacer la reacción con el permanganato y con agua
oxigenada

HAY COMENZAMOS CON LA TITULACION CON LA REACCION YA QUE EL

PERMAGANATO (ESTA EN LA PARTE DE ARRIBA) ESTA CAENDO GOTA POR
GOTA QUE REACCONE CON EL AGUA OXIGENADA REDUCTOR, HASTA
LLEGAR AL PUNTO FINAL EN QUE LA SOLUCIÓN SE TORNA COLOR ROSADO
PERMANENTE

SE TORNO DE COLOR ROSA CON UN GASTO DE 41ML DE PERMAGANATOCON ESTA

FINALIDAD QUE SE ESTABILIZA EL COLOR

REACCION GENERAL: KMnO4 y H2O2