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Laboratorio N 7
CROMATOGRAFA DE GASES
Curso:
Integrantes:
Profesor:
Ciclo:
20111273J
20120247H
Lima - Peru
2014
Hacer uso del mini-cromatografo Vernier para los reactivos dados y comparar estos
con el de una muestra desconocida y saber cul esta.
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms puros y que puedan ser usados
posteriormente (etapa final de muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad analtica). En este caso, las
cantidades de material empleadas son pequeas.
CROMATOGRAFA
En qu consiste?
La cromatografa comprende un conjunto de tcnicas que tienen como finalidad la separacin de
mezclas basndose en la diferente capacidad de interaccin de cada componente en otra sustancia. De
forma general, consiste en pasar una fase mvil (una muestra constituida por una mezcla que contiene el
compuesto deseado en el disolvente) a travs de una fase estacionaria fija slida. La fase estacionaria
retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a
diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla presenta un
tiempo caracterstico de paso por el sistema, denominado tiempo de retencin. Cuando el tiempo de
retencin del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, ste se puede
separar mediante la separacin cromatogrfica.
La separacin de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un lquido o gas es el
resultado de las diferentes interacciones de los solutos a medida que se desplazan alrededor o sobre una
sustancia lquida o slida (la fase estacionaria). Las diversas tcnicas para la separacin de mezclas
complejas se fundamentan en la diversidad de afinidades de las substancias por un medio mvil gas o
lquido y un medio absorbente estacionario (papel, gelatina, almina o slice) a travs del cual circulan.
Por qu se separan los componentes?
Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se separan por que se mueven a
diferentes velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorcin que ejerce el soporte sobre cada
elemento, as de fcil.
Si no nos hemos equivocado es adsorcin, que puede confundirse con absorcin pero no es lo mismo.
Vamos a explicarlo.
La absorcin es cuando una sustancia se introduce en la estructura de otra. Ejemplo: una esponja absorbe
agua, entonces si cortamos la esponja en pedazos vamos a encontrar agua en todas partes de la estructura
de la esponja
Esto se produce por las distintas velocidades a las que se mueven los pigmentos por el papel cuando se
mojan con el alcohol y se mueven. Abajo hay un video con ejemplo ya realizados para que los puedas
ver.
Como vemos hay una fase fija que ser la colocacin de la mezcla en el papel y otra mvil que ser la
subida del alcohol por el papel. La fase fija se hace con papel (slido) y la mvil se hace con un lquido,
el alcohol. Ms adelante explicaremos las fases cromatografas. Aqu tienes una imagen del ejemplo de
la tinta del rotulador.
Para qu se utiliza la Cromatografia?
La cromatografa se utiliza para lograr la separacin de los componentes de una mezcla como para
medir la proporcin de cada elemento en la mezcla.
Fases de la cromatografa
Las cromatografas se hacen en dos fases. Una esttica y otra mvil.
En la fase esttica o estacionaria, la mezcla se coloca sobre un soporte fijo, por ejemplo papel. En esta
fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro ejemplo un papel.
En la fase mvil se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya est sobre el soporte de la fase
esttica, por ejemplo un lquido que se mueve por el papel con la mezcla. En la fase mvil empezar el
proceso de separacin de los componentes de la mezcla al moverse a distintas velocidades por el lquido
los distintos componentes de la mezcla sobre el papel.
Tipos de Cromatografia
Aunque hay muchas y variadas tcnicas cromatogrficas, el objetivo de todas es separar las sustancias
que forman una mezcla y enviarlas secuencialmente a un detector para que las determine y cuantifique.
Todas se basan en el mismo fenmeno: permitir que las sustancias que forman una mezcla entren en
contacto con dos fases (un lquido y un gas, un slido y un lquido, etc.). Una de las fases es
esttica (no se mueve) y tender a retener las sustancias en mayor o menor grado; la otra, fase mvil,
tender a arrastrarlas. Cada sustancia qumica tiene distinta tendencia a ser retenida y a ser arrastrada.
Dependiendo de la naturaleza de la fase esttica y de la fase mvil se pueden distinguir distintos tipos
de cromatografa
a) Cromatografa slido-lquido. La fase esttica o estacionaria es un slido y la mvil un lquido.
b) Cromatografa lquido-lquido. La fase esttica o estacionaria es un lquido anclado a un soporte
slido.
c) Cromatografa lquido-gas. La fase esttica o estacionaria es un lquido no voltil impregnado en un
slido y la fase mvil es un gas.
d) Cromatografa slido-gas. La fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.
Segn el tipo de interaccin que se establece entre los componentes de la mezcla y la fase mvil y
La columna se calienta usando una corriente elctrica. La temperatura de la columna se controla por un
detector de temperatura de resistencia incorporado (IDT) para medidas exactas de la temperatura (la
columna trabaja entre 30 C y 160 C). El conjunto de columna tambin tiene un termistor independiente
para proteger contra el sobrecalentamiento.
Al final de la columna est el detector que es un sensor quimiocapacitivo de Seacoast Science. El sensor
es un chip sensor micromecanizado recubierto con un polmero quimioselectivo. El polmero absorbe los
analitos que salen de la columna. La absorcin del analito por el recubrimiento de polmero es medido
por el circuito detector.
Una muestra que consta de uno o ms compuestos se inyectan en la columna y es arrastrada por el aire
atmosfrico, que es la fase mvil. Los compuestos orgnicos que fluyen hacia la salida de la columna de
cromatografa se registran como un pico en un cromatograma, como se muestra en la figura siguiente.
El tiempo que necesita un compuesto especfico para salir de la columna (y ser detectado) despus de
que se inyecta se llama tiempo de retencin, y es un tiempo caracterstico y nico para el compuesto en
determinadas condiciones de trabajo. Con un equipo de GC, un compuesto puede ser identificado a partir
de una mezcla de compuestos por medio de su tiempo de retencin.
Varios factores pueden afectar el tiempo de retencin de un compuesto. Por ejemplo: Dados dos
compuestos del mismo grupo funcional, el ms voltil (es decir, el compuesto con un punto de ebullicin
ms bajo) se mover a travs de la columna ms rpido debido a que est fluyendo en la fase mvil ms
rpidamente. Los grupos funcionales presentes en el compuesto son tambin un factor importante. Por
ejemplo, los alcoholes pueden interaccionar con una fase estacionaria polar, por lo que interactan ms
fuertemente que los steres, porque los alcoholes son capaces de formar enlaces de puente de hidrgeno,
entonces, entre un alcohol y un ster de similares masas molares, el alcohol demorar ms en salir
(tiempo de retencin mayor). El peso molecular de un compuesto tambin puede jugar un papel en
pequea medida, a pesar de que no exista una relacin directa entre la masa molecular y el tiempo que
tarda en viajar a travs de una columna de GC.
En este experimento, usted se ver inmerso en el proceso de identificar una o ms especies desconocidas
usando la cromatografa de gases. En primer lugar, usted practicar realizando un cromatograma de
gases probando varias sustancias conocidas. Luego usar esta informacin para identificar las sustancias
presentes en una muestra de mezcla desconocida.
2. Ejercicios pre-experimentacin
Complete la tabla de abajo. Esta informacin es un punto de partida comn para la comprensin del
comportamiento de un conjunto de sustancias a ser analizadas por cromatografa de gases, que se pueden
encontrar en una mezcla. Para cada sustancia identificar su familia orgnica: alcano, alqueno, alcohol,
aldehdo, ster, ter, cetona, etc.
Compuesto
Temperatura de
Ebullicin (C)
Grupo funcional
Metanol
Etanol
Acetato de etilo
65
78
77
32.04
46.07
88.11
Alcohol
Alcohol
Carbonilo
Computadora
Logger Pro
Mini GC Vernier
Jeringa de vidrio de 1L
Reactivos
Etanol
Acetato de etilo
Metanol
Mezcla desconocida
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PARTE I
PRUEBA PARA COMPUESTOS CONOCIDOS
1. Obtener una jeringa de vidrio as como un set de viales que contienen las cuatro sustancias conocidas.
Use el metanol para limpiar la aguja de la jeringa.
2. Prepare el Mini GC Vernier para la recoleccin de datos:
a) Encienda el Mini GC.
b) Conecte el mini GC al puerto USB de su ordenador.
c) Inicie el programa de recoleccin de datos y a continuacin elija Nuevo en el men Archivo.
d) Para abrir el perfil de Temperatura-Presin, haga click en Tomar datos.
e) Establezca los valores de Temperatura-Presin a:
f) Seleccione Aceptar para iniciar el Mini GC mientras calienta. Cuando el Mini GC est listo para la
inyeccin, en el paso 6, aparecer una ventana con el mensaje: "Inyectar y Recoger al mismo tiempo", y
el LED se iluminar en verde. Contine con el paso 3 durante el calentamiento.
3. Siga estos pasos para limpiar y lavar la jeringa con metanol. Importante: La jeringa de vidrio es
frgil, tenga cuidado de no doblar la aguja o doblar el mbolo. Nunca tire del mbolo ms de
50% de su volumen total. Tenga cuidado de no doblar el pistn a medida que lo presiona al momento de
la inyeccin.
a) Presione el mbolo completamente.
b) Sumergir la punta de la aguja de la jeringa en el vial de metanol.
c) Tire del mbolo para llenar la jeringa aproximadamente con 1/3 de metanol.
d) Expulsar el lquido sobre una toalla de papel.
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e) Repita los pasos del a-d, al menos dos veces hasta que se sienta familiarizado con el proceso de
recoleccin de lquido en la jeringa y la medicin del volumen del mismo. Use una toalla de papel para
secar cuidadosamente alrededor de la punta de la aguja de la jeringa.
4. Siga el proceso en el paso 3 para limpiar y lavar la jeringa con el lquido a analizar.
5. Recolecte cierto volumen del lquido a analizar para la inyeccin.
a) Sumerja la punta de la aguja dentro del vial del lquido a analizar.
b) Medir 0.10 L de lquido. Es importante que el volumen est muy cercano a los 0.10
inyecte el mismo volumen para cada muestra.
c) Despus de recolectar datos, secar suavemente la aguja con papel toalla.
L y que se
7. Mientras la recoleccin de datos se lleva a cabo, repita el paso 3 para limpiar a fondo la jeringa y la
aguja con el siguiente compuesto. Al momento de introducir el compuesto, notar que el desplazamiento
del mbolo en la jeringa se torna ms difcil. Puede tardar ms de 3 enjuagues sentir el movimiento del
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mbolo de la jeringa sin problemas de nuevo, que ser nuestro indicador de que se limpi correctamente
la aguja y la jeringa.
8. La recoleccin de datos terminar despus de 10 minutos. Usted puede detener la recoleccin antes, si
tiene la certeza de que toda la muestra inyectada ha pasado por el detector.
9. Determine el tiempo de retencin de su cromatograma:
a) Elija Integracin de picos (peak integration) en el men de anlisis.
b) Seleccione e integre un pico. Para ello, arrastre desde un punto antes a la izquierda del pico hasta lo
suficientemente a la derecha que incluya toda la cima del pico. Seleccione
Aadir.
c) Guarde el tiempo de retencin mostrado en su tabla de datos.
10. Repita los pasos anteriores con las otras muestras conocidas.
11. Repita los pasos anteriores con la mezcla de concentracin conocida, pero en este caso anote las
reas debajo de cada curva.
PARTE II
PRUEBA PARA LA MEZCLA DESCONOCIDA
1. Repita los pasos anteriores con la muestra desconocida. Determine los tiempos de retencin y
las reas de cada pico. Determine la identidad de las sustancias que componen la mezcla y su
concentracin por comparacin de reas.
2. Despus de haber completado la prueba de la mezcla desconocida, guarde el archivo para usarlo
en otro momento. Guarde el archivo en una unidad flash USB, ordenador segn las indicaciones
del instructor.
3. Apague el Mini GC, mantenga los resultados del experimento abierto en una ventana del
software ya que tendr que hacer referencia a los diferentes cromatogramas para responder a las
preguntas de anlisis de datos.
VI. TABLA DE DATOS
Compuesto
Tiempo de Retencin
(min)
Metanol
1.220
Etanol
1.415
Acetato de etilo
1.525
12
Mezcla conocida
rea
Metanol
1.220
361.48
Etanol
1.415
391.50
Acetato de etilo
2.345
250.09
Muestra desconocida
1.525
373.03
04. Resultados
Principios de cromatografa
La cromatografa es uno de los principales mtodos para la separacin de especies qumicas
estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La cromatografa es un mtodo fsico de separacin
basado en la distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o
estacionaria y otra mvil.
En todas las separaciones cromatogrficas la muestra se disuelve en una fase mvil, que puede ser un
gas un lquido o un fluido supercrtico. Esta fase mvil se hace pasar a travs de una fase estacionaria
inmiscible, la cual se mantienen fija en una columna o sobre una superficie slida. Las fases se eligen
de tal forma que los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase mvil y la
fase estacionaria. Aquellos componentes que son retenidos con ms fuerza por la fase estacionaria se
mueven lentamente con el flujo; por el contrario los componentes que unen dbilmente a la fase
estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de
la muestra se separan en bandas discriminadas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.
En el laboratorio de tcnicas instrumentales de la Universidad de Valladolid disponemos de las
siguientes tcnicas cromatogrficas:
Cromatografa de lquidos HPLC
Principios de la tcnica
En la cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una columna que contiene
a la fase fija. La separacin cromatogrfica en HPLC es el resultado de las interacciones especficas
entre las molculas de la muestra en ambas fases, mvil y estacionaria
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Compuestos poco voltiles, generalmente los de peso molecular superior a 300 u.m.a.
Compuestos sensibles a una elevacin de la temperatura incluso moderada (determinados
compuestos de inters biolgico)
Compuestos que se encuentran en forma inica (puesto que son e n general poco voltiles)
Por esta razn, la cromatografa de gases se emplea cuando los componentes de la mezcla problema son
voltiles o semivoltiles y trmicamente estables a temperaturas de hasta 350-400C. En cambio,
cuando los compuestos a analizar son poco voltiles y/o termolbiles, la tcnica separativa adecuada
suele ser la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).
A menudo la cromatografa de gases se emplea para confirmar de la presencia o ausencia de un
compuesto en una muestra determinada.
Aplicaciones
Medioambientales: Anlisis de pesticidas y herbicidas, anlisis de hidrocarburos, semivoltiles y
voltiles, anlisis del aire...
Alimentos y aromas: fragancias y aromas, aceites, bebidas, cidos orgnicos, azcares, FAMES,
steres metlicos, triglicridos, alcoholes...
Qumica Industrial: alcoholes, cidos orgnicos, aminas,aldehdos y cetonas, steres y glicoles,
hidrocarburos, disolventes, anilinas, gases inorgnicos...
Biociencia: drogas, frmacos, alcoholes y contaminantes en sangre, disolventes residuales...
Derivadas del petrleo: gas natural, gases permanentes, gas derefinera, gasolinas, gasleos,
parafinas...
Partes de un cromatografo
La cromatografa es la separacin de una mezcla de compuestos en sus componentes individuales. Se
requieren tres pasos principales en la separacin y la identificacin de los componentes de una mezcla
mediante un GC. Ellos son:
1. Inyectar una muestra en el GC (se realiza en el inyector).
2. Separar la muestra en componentes individuales (se realiza dentro de la columna del horno).
3. Detectar qu compuestos haba en la muestra (se realiza en el detector).
Entre sus partes ms importantes se encuentran:
Inyectores
Los cromatgrafos de gases cuentan con inyectores que son los dispositivos por donde se inyectan las
muestras en el GC, puede tener un mximo de dos inyectores.
Hoy en da, existe una gama completa de inyectores: con y sin divisin [0100 psi y 0150 psi], de
multimodo, empaquetados con purga, fros en columna, de vaporizacin de temperatura programable y
de interfaz para voltiles. El tipo de inyector se elegir en funcin del tipo de anlisis que se haga, el tipo
de muestra que se analice y la columna que se utilice.
Las muestras se pueden inyectar en los inyectores a mano con una jeringa o con un dispositivo de
muestreo automtico.
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Vlvulas de muestreo
Otra de las partes fundamentales un cromatgrafo son las vlvulas de muestreo son dispositivos
mecnicos sencillos que introducen una muestra de tamao fijo en el flujo del gas portador. Las vlvulas
se usan ms a menudo para probar gases o lquidos en flujos de circulacin constante.
Columna y horno de GC
Las columnas del GC se encuentran dentro de un horno de temperatura controlada. Por lo general, un
extremo de la columna est unido al inyector y el otro extremo est unido al detector. Las columnas
varan en longitud, dimetro y recubrimiento interno. Cada columna est diseada para su uso con
diferentes compuestos.
El propsito de la columna y del horno es separar la muestra inyectada en sus compuestos individuales a
medida que pasa por la columna. Para contribuir a este proceso, el horno del GC puede programarse para
acelerar el flujo de la muestra a travs de la columna.
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06. Bibliografa
http://latina.chem.cinvestav.mx/RLQ/tutoriales/cromatografia/Gas.htm
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/principios_de
_cromatografia.pdf
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/cromatografia
_de_gases.pdf
http://depa.pquim.unam.mx/~fercor/dqo/manuales/1311/p7.pdf
http://es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis
Remington Farmacia. Segunda Edicin. Editorial Mdica Panamericana.
Principio y aplicaciones de la cromatografa. Miriam Barquero Quiroz. Serie
Qumica.
Qumica orgnica. Morrison y Boyd. Quinta Edicin 1998. Impreso en Mxico.
Qumica orgnica: Fundamentos terico-prcticos para laboratorio. Lydia Raquel.
Impreso en Espaa.
Qumica orgnica. Aliger Cava de Jongh Jonhson. Segunda Edicin. Impreso en
Espaa.
Qumica orgnica: conceptos y aplicaciones. Philip S. Bailey, Christina A. Bailey
1998
ABBOT D. y Andrews R.S. Introduccin a la Cromatografa. 3a. Ed. Alhambra,
Madrid, 1970.
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