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Proceso de producción
Monitoreo de información
Estrategias
de control
pH Temperatura Biomasa pO2 Concentración Sustrato
de producto consumido
Toma de decisiones
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Cuál es la importancia ???
económicamente viable
2
Medidas On-line y Off-line
•Viscosidad
Propiedades del medio de •Color
cultivo •Sólidos insolubles
•Potenciales Interferentes
•Exactitud y sensibilidad
Características del proceso
•Rapidez y versatilidad
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Métodos directos
Métodos indirectos
Análisis químicos
Bioluminiscencia y Quimioluminiscencia
Fluorescencia
Espectroscopia de infrarrojo cercano
Masa de componentes celulares
Actividades metabólicas
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PESO FRESCO.
Ventaja: Desventaja:
Puede aplicarse a Necesidad de
cualquier morfología estandarizar muy bien la
metodología y tiempos de
la técnica
PESO SECO
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Desventajas:
METODO VOLUMETRICO
En todos los casos se deben estandarizar las condiciones en las que
sedimenta la biomasa
Desventaja:
La sedimentación de la biomasa dependerá de la morfología del
cultivo
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DENSIDAD OPTICA.
Turbidimetría Nefelometría
Se mide la opacidad o El detector se ubica en un
densidad óptica. ángulo distinto del haz
incidente (normalmente
El detector se ubica en la o
90 ).
misma dirección en la que
incide el haz inicial.
Log I0/It= A x l Log I0/Is= -B x l
DO
Desventajas
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CONTEO EN CAMPO ELECTRICO.
Principio:
Se hace pasar las células por una pequeña apertura en la cual está
aplicado un campo de corriente eléctrica constante.
Como las células son generalmente no-conductoras, al pasar por la
apertura generan un incremento en el voltaje (por aumento de la
resistencia).
La concentración de la muestra debe de ser tal que pase una sola
célula a la vez por la ranura.
También se puede calcular el tamaño de la célula, ya que el cambio
en la resistencia es proporcional al tamaño.
Desventajas:
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CITOMETRIA DE FLUJO.
Principio: Desventajas:
Es similar al se CONTEO EN Alto costo del equipo.
CAMPO ELECTRICO. El
monitoreo del paso de las células Solo para
es por un haz de láser. microorganismos
unicelulares.
El detector registra la interrupción
del haz.
PERMEABILIDAD DIELECTRICA.
Principio:
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Para generar polarización necesita de membranas intactas
Ventaja:
Buen sistema para microorganismos filamentosos, los cuales
suelen ser problemáticos.
CONTEO DIRECTO EN
MICROSCOPIO.
Ventajas:
Diferencia entre células viables y no viables.
Equipamiento muy accesible.
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CONTEO DE VIABLES.
Ventaja: Desventaja:
Técnica apta para •Método muy lento.
microorganismos
•Considerar la exigencia
unicelulares y para el cultivo
nutricional de los
de esporas.
microorganismos.
METODOS INDIRECTOS
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BIOLUMINISCENCIA Y
QUIMIOLUMINISCENCIA.
LUZ
FLUORESCENCIA
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ESPECTROSCOPIA DE
INFRARROJO CERCANO
Desventajas:
Alto costo
Análisis de datos complejo
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MASA DE UN COMPONENTE CELULAR.
DNA.
Colorimetría basada en la reacción entre deoxiribosa y
difenilamina.
Ventaja: la concentración de DNA es bastante constante.
Desventajas: Poco sensible, usa reactivos peligrosos.
ACTIVIDADES METABOLICAS.
Se puede monitorear :
– la producción de gases como CO2,
–el consumo de sustratos o de O2,
–reacciones de reducción de colorantes específicos.
* En el caso del consumo de sustratos, se debe tener en cuenta que parte del
consumo se destina al mantenimiento y solo una parte de estos se destina al
crecimiento de la biomasa.
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