Universidad Andrés Bello.

Facultad de Ciencias Básicas.

Laboratorio de Biología Celular.
Profesores: Alejandro Arriada.

Trabajo Práctico N°5:

Citogenética.
BIO-133

Autores:
- Yarabi Concha.
- Valentín Berrios Farías.
- Felipe Arriata Lope.
 Introducción.

La citogenética es la ciencia encargada del estudio de los cromosomas, sus eventos y

enfermedades que ocurren en relación a ellos. La típica morfología que manifiestan los
cromosomas está dada por una estructura andamio sobre la cual se condensa el DNA en
conjunto a otras estructuras proteicas. (1)
El cariotipo es el patrón cromosómico único de cada especie, los cromosomas según la
especie pueden variar en cantidad, tipo de cromosoma y longitud. Y es en base al análisis
del cariotipo que se puede llegar a determinar enfermedades debido a mutaciones de tipo
cromosómicas tales como numérica y/o estructural.
La mutación de tipo numéricas hace referencia a la pérdida o ganancia de cromosomas de
forma completa, esta ganancia y/o perdida se puede dar tanto en los cromosomas
autosómicos como en los sexuales. La condición en donde la célula pierde un cromosoma
es llamada monosomía para ese tipo de cromosoma, en cambio si se da una ganancia de
un cromosoma esta condición es llamada trisomía. Otro tipo de mutación de tipo
numérica en los cromosomas es llamada Triploidía haciendo alusión a un juego de
cromosomas más (3n). (2)
Por otra parte, las mutaciones estructurales cromosómicas comprenden a aquellas en
donde uno o más cromosomas provocan alteraciones entre sus conformaciones, existen 3
tipos que son los más comunes: Las deleciones, las inversiones y las translocaciones. (3)
 Objetivos.

Observar y analizar muestras de saliva de mujer y encontrar el corpúsculo de Barr.

Observar la muestra seca de juego de cromosomas entregados en el laboratorio,
analizarla, contar el número de cromosomas e identificar os distintos tipos de ellos.
Confeccionar el cariotipo entregado en la guía de laboratorios.
 Materiales y métodos.
Actividad n°1
1- Se tomó una muestra de saliva (de mujer) raspando la mucosa interna de la mejilla
de una compañera usando un abatelenguas.
2- Se hizo frotis de la muestra sacadas en un portaojetos.
3- Se puso una solución de 2% de aceto-orceína sobre la muestra que está en el
portaobjeto.

4- Se sacó el exceso de aceto-orceína del portaobjeto.

5- Se puso un cubreobjeto sobre el portaobjeto.

6- Se puso el portaojeto con la muestra sobre la platina.

7- Se subió al máximo la platina par que luego se enfoque con el macrometrico

y el micrométrico en el objetivo x10.

8- Se enfocó progresivamente con cada objetivo hasta llegar al x100

9- Estando en este se puso una gota de aceite de inmersión sobre la muestra

para evitar que a luz del microscopio se desvié.

10- Se analizó la muestra y anotó los resultados.

Actividad n° 2
1. Se puso la muestra seca de los juegos de cromosomas sobre la platina del
microscopio óptico.
2. Se subió al máximo la platina.
3. Se enfocó con el macrometrico y el micromtrico en el objetivo x10.
4. Se volvió a enfocar progresivamente con cada objetivo hasta llegar al x100
5. Estando en este se usó el aceite de inmersión
 6. Se observó a través del ocular la muestra y analizarla, identificar los tipos de
cromosomas y contarlos.

Resultados.

Actividad n°1.
Observación de corpúsculo de Barr.
Lo primero que nos pudimos dar cuenta al observar dichas células fue que tenían una
tinción color rosado.
Para poder localizar los corpúsculos de Barr en las células de mujer tuvimos que usar el
objetivo x100 y el aceite de inmersión, al analizar la muestra, nos pudimos percatar que no
en todas células se podía encontrar el corpúsculo de Barr y que también no era algo que se
pudiera notar tan a simple vista por lo que tuvimos unas pocas dificultades al momento de
hallarlo pero finalmente encontramos algunas células que lo tenían y pudimos notar que
eran como pequeños círculos no tan perfectos color negro los cuales se encontraban
alrededor del núcleo celular.
A continuación, se pude observar una fotografía de la muestra analizada.
Actividad n° 2
Observación de cromosomas humanos.
Esta muestra fue analizada con el objetivo x100 por lo que fue necesario el uso de aceite
me inmersión para evitar que la luz del microscopio se desvié.
Esta muestra tenía una tinción de color morado y se podían observar perfectamente los
cromosomas a igual que su bandeo.
Se pudieron identificar cromosomas metacéntricos, submetacéntricos y acéntricos. Y su
cantidad fue 45 cromosomas.
A continuación, se muestra una fotografía de la muestra vista en el microscopio:
 Discusión.

Actividad n° 1
Como fue mencionado en los resultados esta muestra estaba con tinción de un color
rosado ya que usamos aceto-orceina para efectuarla. (4)
Los resultados de esta muestra fueron los esperados ya que los corpúsculos de Barr o
pudimos observar en la muestra de saliva de mujer. Esto se debe a que como las mujeres
tienen dos cromosomas sexuales X se les inactiva uno de ellos y esto provoca el corpúsculo
de Barr, en el caso del hombre no ocurre esto ya que sus cromosomas sexuales son XY,
pero el caso del hombre que tienen el síndrome de Klinefelter cuyos cromosomas sexuales
son XXY si se podría encontrar corpúsculos de bar debido a que poseen uno de sus
cromosomas X inactivo. Igual existen mujeres sin corpúsculos de Barr como es el caso del
síndrome de Tuner, ya que, sus cromosomas sexuales son X0. Y en casos menos frecuentes
igual nos podemos encontrar con mujeres y hombres con más de un cromosoma X
inactivo, como las súper mujeres que tienen tres cromosomas X (XXX), y en el síndrome de
Klinefelter con tres cromosomas X (XXXY) en donde igual podemos encontrar dos
cromosomas X inactivos. (5)

Actividad n° 2

En esta muestra se contaron 45 cromosomas por lo que no es normal ya que el humano

consta de 23 pares de cromosomas (46 cromosomas) por lo que deducimos que en este
cariotipo existe una monosomía en algún par, por lo que al investigar pudimos deducir que
podría tratarse de un caso del síndrome de Turner el cual tiene una monosomía en el par
sexual (X0). (6) Este síndrome solo lo pueden padecer las mujeres y consta de las
siguientes características: Baja estatura, "pliegues" en el cuello que van desde la parte
superior de los hombros hasta los lados del cuello, línea del cabello bajo en la espalda,
baja ubicación de las orejas y manos y pies inflamados (7)
Y los problemas que poseen son varios entre ellos están: defectos cardiovasculares,
hipertensión arterial, artritis, alteraciones metabólicas, entre otros. (8)
Como fue mencionado en los resultados pudimos identificar los tres tipos de cromosomas
en el cariotipo humano (metacéntricos, submetacéntricos y acéntricos)
La diferencia entre estos tres tipos de cromosomas es su tamaño y el lugar donde se
encuentra el centrómero.
Para empezar a describir cada tipo de cromosoma primero definiremos las partes más
importantes de estos.
Centrómero: Contrición que separa los brazos del cromosoma.
Cinetocoro: Punto de unión del huso mitótico el cual es esencial para el movimiento y
segregación del cromosoma en la división celular.

Tipos de cromosomas humanos.

Metacéntricos: El centrómero está ubicado más o menos en el centro, es decir los brazos p
y q son aproximadamente de la misma longitud.
Submetacéntricos: El centrómero se encuentra desplazado claramente del centro.
Acrocéntricos: El centrómero está ubicado cerca de un extremo. (Un brazo
considerablemente grande comparado con el otro)
También existe otro tipo de cromosomas llamados Telocentricos los cuales tienen el
centrómero en el extremo superior, pero estos no se encuentran en los humanos (9)

Actividad n° 3
Al confeccionar el cariotipo nos dimos cuenta que carecía de un cromosoma que al
ordenarlos no percatamos que era un cromosoma X, al investigar pudimos darnos cuenta
que consistía de una monosomía en el par sexual (X0) Lo que significa que es un cariotipo
de una mujer que padece del síndrome de Turner. (10)
 Investigación bibliográfica.
1- Investiga las siguientes enfermedades: Enfermedad de Waardenberg 2q36 y
Enfermedad de Gaucher 1q22. Esquematice su ubicación cromosómica.

Enfermedad de Waardenberg 2q36.

Esta es una enfermedad genética la cual tiene un carácter autosómico dominante y una
frecuencia de 1:42000, esta se caracteriza por anomalías faciales, oculares y sordera
neurosensorial. Su causa aun es desconocida, pero los investigadores creen que esta
alteración del desarrollo se podría deber a la migración anormal de las células de la cresta
neural. Lo que se sabe es que el gen de esta enfermedad está ubicado en el cromosoma 3.
Existen tres tipos y cada uno tiene distintos síntomas.
Los principales síntomas de esta enfermedad son:
Tipo I

 Puente nasal ancho.

 Ausencia del ángulo fronto- nasal.
 Hipoplasia de las alas de la nariz.
 Labio superior en "arco de cupido".
 Labio inferior grueso.
 Mandíbula prominente.
 Mechón de cabello blanco (40%).
 Conjunción de las cejas (sinofridia).
 Labio leporino.

Tipo II
Además de las características del tipo I, nos encontramos con:

 Frecuencia más elevada de sordera.

Tipo III

Además de los hallazgos faciales y auditivos descritos en el tipo I, hay afectación bilateral
de las extremidades superiores: deformidades por contracturas en flexión, fusión de los
huesos del carpo y sindactilia. (1)

Enfermedad de Gaucher 1q22.

Esta enfermedad trata de un transtorno genético infrecuente en donde el que lo padece

carece de una enzima llamada Glucosecebrosidasa. (2) Esta es una enzima lisosomal la cual
se encarga de degrada lípidos complejos, glucoesfingolípidos, como la glucosilceramida.
(3)
Esta enfermedad genética tiene un carácter autosómico recesivo, la falla de esta enzima
hace que se acumulen sustancias dañinas en el hígado, los huesos, el bazo, y la medula
ósea. Estas enzimas impiden el correcto funcionamiento de las células y los órganos del
individuo que la padece.
Existen 3 tipos de esta enfermedad, tipo I, tipo II y tipo III.
Tipo I: Esta es la más común e involucra enfermedad ósea, anemia agrandamiento de bazo
y trombocitopenia.

Tipo II: Comienza durante la lactancia con un compromiso neurológico grave y es una
forma que puede llevar a una muerte rápida y temprana.
Tipo III: Causa problemas en órganos como el hígado, el cerebro y el bazo. Quien la
padece puede vivir hasta edad adulta. (4)

2- Averigüe que efecto tiene la colchicina sobre las células en división y cuál es
su uso experimental.

Para empezar, podemos describir la colchicina como una droga que se extrae del
Colchicum hispanicum y su efecto sobre las células es la despolimerización de la tubulina
que forma las fibras del huso, así los cromosomas no se colocan en placa y siguen
espiralizándose, acortando su longitud, separándose más entre sí. Uso uso experimental
simplemente es para que los cromosomas puedan ser contados de una mejor manera para
llevar a cabo su observación y análisis. (5)
 3- Describa los 3 mecanismos por los cuales se generan individuos con síndrome
de Down.

a) Trisomía regular.
Es el mecanismo más frecuente mediante el cual se desarrolla el síndrome de Down,
alrededor del 94% de personas que sufren de esta dolencia son afectadas por la adición de
un cromosoma extra al par 21, por ende, todas las células del individuo tendrán 47
cromosomas en lugar de 46.
b) Mosaicismo
Este mecanismo se caracteriza debido a que no todas las células del organismo tienen 47
cromosomas en su núcleo, sino más bien una variabilidad entre células normales (46
cromosomas) y células anormales (47 cromosomas). La enfermedad ocurre mediante este
mecanismo entre un 2%-3%. En este caso la enfermedad no ocurre en el cigoto, sino que
en etapas embrionarias un poco más tardías.
c) Translocación.
Ocurre en el 3%-4% de los afectados. En este caso el cromosoma 21 extra no se encuentra
situado en conjunto al par de su mismo tipo, sino más bien fusionado con el par número
14. Alrededor del 1% de los afectados no expresan fenotípicamente el síndrome de Down
debido a que son de cierto modo portadores para el desarrollo del síndrome, esto es
debido a que tiene 2 cromosomas 21 en su genoma, pero poseen un cromosoma 21 en el
par 14 y otro libre. Es el único mecanismo de carácter hereditario. (6)

4- Explique cuál es la diferencia entre los términos tetraploidia y tetrasomia.

Tetraploidia hace alusión a que la célula tiene 2 juegos cromosómicos adicionales a lo

normal (4n) (en condiciones normales en cualquier especie que se reproduce vía sexual el
padre aporta con un “juego” y la madre con el otro formando células diploides, 2n). En
cambio, el término de Tetrasomia hace referencia a que dentro de un tipo de cromosoma
especifico existen 4 de estos en conjunto. (7)
 5- Indique la fórmula cromosómica correspondiente a individuos Klinefelter,
Turner y Súper mujer. Identifique las anomalías cromosómicas existentes y
comente. Identifique la enfermedad y desarrolle una pequeña discusión al
respecto, es decir, como se produce, características físicas de los enfermos,
síntomas. En resumen, investigue todo lo que pueda con respecto a la
enfermedad. etc.

Síndrome de Klinefelter (47, XXY)

Es una afección cromosómica que ocurre cuando un hombre tiene al menos un
cromosoma x extra. Las mujeres mayores a 35 años de edad son más propensas a tener un
hijo con síndrome de Klinefelter que las que se encuentran bajo este rango de edad.
Entre sus síntomas se pueden encontrar infertilidad, problemas sexuales, desarrollo de
vello púbico de forma femenina, menor vello axilar, facial y púbico, testículos pequeños y
firmes, alta estatura, agrandamiento anormal de las mamas y proporciones corporales
anormales.
El diagnostico suele darse cuando un varón puede presentar infertilidad, debido a que este
es el síntoma más común. Para confirmar la presencia de este síndrome se realiza un
cariotipado del individuo.
Con respecto a los tratamientos se puede contar con promover el crecimiento del vello
corporal, mejorar la concentración, mejorar la fuerza, mejorar la apariencia de la
musculatura, mejorar la energía y el impulso sexual y aumentar la autoestima en conjunto
al estado de ánimo. (8)

Síndrome de Turner (45, X0)

El síndrome de Turner se caracteriza por la deficiencia de un cromosoma x en las mujeres,
entre sus características se destacan baja estatura, manos y pies inflamados, baja altura de
las orejas, sus ovarios no funcionan correctamente, por ende, la mayoría son infértiles,
presentan cataratas, problemas renales, diabetes, osteoporosis, problemas tiroideos e
hipertensión arterial.
El diagnostico de esta enfermedad se da en base a pruebas genéticas, el diagnostico puede
darse incluso en etapas prenatales sin embargo la enfermedad no tiene cura, aun así,
existen tratamientos como estimulación con hormona de crecimiento para que logren por
lo menos a alcanzar una estatura promedio, por otra parte, técnicas de sustitución
hormonal puede ayudar al desarrollo sexual y con técnicas de reproducción asistida estas
mujeres pueden quedar embarazadas. (9)

Súper mujeres (XXX)

Unas de las anomalías de este síndrome pueden ser dificultad en el desarrollo del
lenguaje, alteraciones del EEG, trastornos de procedimiento auditivo, y la escoliosis.
No es un síndrome heredable su causa es por un evento durante la formación de las
células reproductoras, es una no disyunción, frecuentemente el cromosoma X extra que
poseen es de origen materno.
Los síntomas físicos más conocidos son los siguientes:
1- Incremento de espacio entre los ojos.
2- Estatura alta.
3- Trastornos de conducta.
4- Cabeza pequeña.
5- Retraso psicomotor. (10)
 Conclusión.

Considerando los resultados obtenidos podemos llegar a la conclusión de que nuestros

objetivos fueron cumplidos debido a que pudimos divisar corpúsculos de Barr en las
muestras analizada,(muestra salival de nuestras compañeras) por lo que podemos
confirmar que la presencia de corpúsculos de Barr tiene directa relación con la inactivación
de los cromosomas X, aun así la existencia de corpúsculos de Barr o no existencia de estos
no puede asegurar el sexo del individuo debido al posible desarrollo de un síndrome
relacionado a los cromosomas sexuales
Con respecto a la muestra cromosómica podemos afirmar que el objetivo se cumple
debido a que se cuantificaron los cromosomas, se diferenciaron y en exclusiva nos
pudimos dar cuenta de la anormalidad del cariotipo del individuo en cuestión el cual
expresaba el síndrome de Turner.
 Referencias.
(1) Universidad Andrés Bello. Departamento de Ciencias Básicas, Curso de laboratorio
de biología celular y genética, Santiago, Pág. 49.
(2) Universidad Andrés Bello. Departamento de Ciencias Básicas, Curso de laboratorio
de biología celular y genética, Santiago, Pág. 52.
(3) Universidad Andrés Bello. Departamento de Ciencias Básicas, Curso de laboratorio
de biología celular y genética, Santiago, Pág. 53.
(4) Universidad Andrés Bello. Departamento de Ciencias Básicas, Curso de laboratorio
de biología celular y genética, Santiago, Pág. 54.
(5) http://www.unav.es/ocw/genetica/tema11-4.html
(6) http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0025-
76802007000200019
(7) https://medlineplus.gov/spanish/turnersyndrome.html
(8) http://salud.discapnet.es/Castellano/Salud/Enfermedades/EnfermedadesDiscapaci
tantes/S/Sindrome%20de%20Turner/Paginas/Sindrome_Turner.aspx
(9) Universidad Andrés Bello. Departamento de Ciencias Básicas, Curso de laboratorio
de biología celular y genética, Santiago, Pág. 49.
(10) http://salud.discapnet.es/Castellano/Salud/Enfermedades/EnfermedadesDi
scapacitantes/S/Sindrome%20de%20Turner/Paginas/Sindrome_Turner.aspx

Referencias de investigación bibliográfica.

(1) http://salud.discapnet.es/Castellano/Salud/Enfermedades/EnfermedadesDisca
pacitantes/S/Sindrome%20de%20Waardenburg/Paginas/cover
%20waarden.aspx
(2) https://www.clinicadam.com/salud/5/000564.html
(3) http://www.guiametabolica.org/ecm/enfermedad-gaucher/info/es-
glucocerebrosidasa
(4) https://www.clinicadam.com/salud/5/000564.html
(5) http://www.unioviedo.es/A.Roca/citogenetica/2CICLO_CELULAR.pdf
(6) http://www.downlugo.org/sindromedown.asp?mat=26
(7) http://www.selectividad.tv/S_B_1_3_12_S_los_cromosomas_en_celulas_soma
ticas_y_sexuales_ii.html
(8) https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/000382.htm
(9) https://medlineplus.gov/spanish/turnersyndrome.html
(10) http://lasaludfamiliar.com/caja-de-cerebro/conocimiento-10406.html