DETERMINACIÓN DE ALCOHOL EN UNA BEBIDA ALCOHÓLICA POR

REFRACTOMETRÍA Y DETERMINACIÓN DE SACAROSA EN AZÚCAR POR

POLARIMETRÍA

Ana C. Tacan Pinchao, Orley A. Vera.

anitapi1992@gmail.com, Orley.a.v.p@hotmail.com.

Presentado a: Diego Fernando Morales V.

Cali, Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento
de Química, Tecnología química, abril 5 de 2012.

RESUMEN
En la práctica se realizó la determinación de etanol a una bebida alcohólica mediante
refractometria, y de sacarosa en una muestra de azúcar de mesa mediante
polarimetría, para la bebida alcohólica el procedimiento se llevó a cabo realizando
una curva de calibración de patrón externo y una curva de adición de estándar. La
concentración de la muestra de etanol hallado mediante curva de patrón externo fue
equivalente a ⁄ , teniendo como porcentaje de error -10,34%, mientras
que la concentración de la muestra mediante una curva de adición estándar equivalió
a ⁄ y el porcentaje de error fue de . Para la determinación de
sacarosa, en el procedimiento que se llevó a cabo al realizar la curva de patrón
externo, la concentración de azúcar en la muestra fue equivalente a 84% p/v.

Palabras clave: Índice de refracción, curva de calibración, patrón externo, adición

estándar.

DATOS CÁLCULOS Y RESULTADO De la misma manera se determinó la

concentración para alícuotas de 1, 2,
Pureza de alcohol etílico: 96%
3, 4, 5mL como se muestra en la
Densidad =
siguiente tabla

Tabla 1.datos para una curva de calibración

de patrón externo.
concentración índice de refracción
%p/v analista analista promedio
Ec(1) 1 2
1, 58073 1,3350 1,3349 1,33495
3,16147 1,3355 1,3360 1,33575
Determinación de las 6,32294 1,3359 1,3370 1,33695
concentraciones de etanol en las 9,48441 1,3389 1,3392 1,33905
12,6468 1,3411 1,3412 1,34115
soluciones estándares mediante el
15,8078 1,3427 1,3431 1,34290
método patrón externo en %p/v
muestra 1,3390 1,3389 1,33895
Determinación de las concentración como se muestra a
concentraciones de etanol en las continuación
soluciones estándares mediante el
adición estándar %p/v

Se prepararon 6 estándares con

diferentes volúmenes patrón el cual se De la misma forma se determinó para
les adicionaron 3 mL de muestra, a los demás estándares como se
cada estándar se determinaron la muestra en la siguiente tabla

Tabla 2. Preparación de disoluciones estándar de alcohol a partir de una disolución patrón 96 mg/L de alcohol
Volumen de disolución índice de refracción
Concentración
# estándar (mL ) patrón
%p/v analista 1 analista 2 promedio
de concentración 96 p/p
1 0,0 0 1,3339 1,3340 1,33395
2 0,5 1,58073 1,3345 1,3349 1,33470
3 1,0 3,16147 1,3361 1,3362 1,33615
4 2,0 6,32294 1,3381 1,3388 1,33845
5 3,0 9,48441 1,3409 1,3412 1,34105
6 4,0 12,6468 1,3430 1,3431 1,34305

1,346

1,344
indice de refraccion promedio nD

1,342

1,34
Calibracion Normal
1,338
Calibracion Estandar.
1,336
Lineal (Calibracion
1,334 Normal)
Lineal (Calibracion
1,332 Estandar.)

1,33
-2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Concentración Etanol %p/v

Grafica 1. Índice de refracción promedio vs concentración. %p/v

Curva de calibración por patrón Sr =2,96x10-4

externo:
Pendiente (b1) = 0,00056716 ⁄
Dónde: Desviación estándar de la pendiente
Sb=2,3686x10-5
Correlación lineal (r) = 0,99307182
Desviación estándar de la regresión Intercepto (a) = 1,333
Desviación estándar del intercepto Calculo concentración alcohol
Sa=0,00022724 etílico:

Sxx= 152,02

Determinación de la concentración de ⁄
conocida del alcohol mediante la
ecuación de la recata La botella de licor reporta como
contenido de alcohol ⁄
[ ] Ec (1)
El porcentaje de error es:
Donde n= índice de refracción
Ec (3)
Remplazando la ecuación donde
n=1,33895 (b1) = 0,00056716 y (a) =
1,33 se determina la concentración de
alcohol en la muestra. Curva de calibración por adición de
estándar.
[ ] Dónde:

Desviación estándar de la (r) = 0,9592 Sr=0,00020

concentración:
(b2)= Sb=2,58x10-5
̅
[ ] √ ( ) Ec (2) (a) = 1,33373 Sa =0.0001831

Donde [ ] = concentración alcohol

m = 1 Numero de lecturas de la etílico
muestra

yo = 1,33895 Señal de la solución Calculo concentración alcohol etílico

problema en la muestra.

̅ 1,33852 Promedio [ ] Ec (4)

[ ] Se resta el índice de refracción del

agua al intercepto:
Calculo concentración alcohol etílico
en la muestra.
Se calcula la concentración de la
muestra:

El contenido de alcohol etílico en el ron

es del ⁄ La incertidumbre de la concentración
de la muestra se calcula mediante la
Densidad del etanol puro: siguiente ecuación:
 ̅
[ ] √ ( ) Ec (5) √

Promedio ̅

3. 5,676

[ ] 4.

Calculo concentración alcohol etílico en ¿ ? Si

la solución.
5. se rechaza se acoge la

Densidad del etanol puro:
Calculo concentración alcohol etílico
6. la pendiente (sensibilidad) de la
curva de adición de estándar es
estadísticamente diferente a la del
método de calibración normal,
obteniendo efecto de matriz
Cálculo del límite de cuantificación
del método.

Ec (6)

La botella de licor reporta como =señal del blanco

contenido de alcohol ⁄
=desviación estándar de la señal del
El porcentaje de error es: blanco

Entonces

Sr
CALIBRACIÓN SIMPLE VS ADICIÓN
DE ESTÁNDAR. Se obtiene
Evidencia de efectos de matriz. Ec (7)
Pruebas de significación: Reemplazando en la ecuación 7
1.

2.

De la ecuación se obtiene: El uso de la ecuación de regresión

conduce a un límite de cuantificación
| |

√
Límite de cuantificación del método
Dónde:
Determinación de sacarosa de mesa Ecuación de la recta
por polarimetría
[ ]
Se prepararon 6 estándares de 25 mL
Al remplazar los siguientes valores se
de un patrón estándar de 96 % a
obtiene la siguiente ecuación
diferentes concentraciones, para asi
determinar su rotación como se
muestra a continuación [ ]

Tabla 3. Datos experimentales de la curva

de patrón externo Dónde:
rotación
concentración
medida ̅
[ ] √ ( )
3,615 5,150
7,251 9,500
9,038 12,50
10,84 17,55 Numero de lecturas de la
14,40 26,25 muestra
18,00 25,85
muestra 16,95 Señal (promedio) de la solución
problema

[ ] ⁄
Rotacion observada vs
30
Concentracion
25
Porcentaje de sacarosa en la
20
muestra
[α °]

15
10
5
0
0 10 20
concentración de sacarosa % (p/v)
Gráfica 2. Curva de calibración (¿Calculo rotación específica ([ ]) de
rotación observada vs concentración. la sacarosa?)

Dónde: Utilizando la ecuación de la recta se

obtiene:
(r) = 0,9668 Sr=2,4782
[ ] Ec (8)
(b)= Sb=0,2159
Dónde:
(a) = -1.0747 Sa =2,4879
Espesor de la celda en decímetros

Al remplazar los valores en la ecuación

3 se obtiene que:
[ ]
Se conoce la rotación especifica de la
sacarosa (66.5°) se calcula el
porcentaje de error.
Cálculo del límite de cuantificación
del método.
Ec (6)
=señal del blanco
=desviación estándar de la señal del
blanco
Entonces
a para la curva de calibración de patrón
Sr
Se obtiene
Ec (7)
Reemplazando en la ecuación 7
El uso de la ecuación de regresión
conduce a un límite de cuantificación
Límite de cuantificación del método
DISCUSIÓN
En la práctica se determinó el
porcentaje de etanol a una muestra de
ron viejo de caldas por el método
refractometría y se determinó sacarosa
a una muestra de azúcar de mesa
mediante polarimetría.
En primer lugar se determinó etanol
mediante dos curvas de calibración,
patrón externo y adición estándar con
un refractómetro, la refractometría es
un método óptico de determinar la
velocidad de propagación de la luz en
un medio, compuesto, substancia,
cuerpo, la cual se relaciona
directamente con la densidad de este
medio compuesto, substancia,
cuerpo, para emplear este principio se
utiliza la refracción de la luz, (la cual es
una propiedad física fundamental de
cualquier sustancia), y la escala de
medición de este principio se
llama índice de refracción[1], en este
caso al medir el índice de refracción
externo se observa que al aumentar la
concentración de los patrones aumenta
el índice de refracción del etanol,
indicando que hay mayor cantidad de
moléculas de etanol en el disolvente
agua, generando una demarcación
mayor en la densidad del patrón a
analizar y por lo tanto aumentando la
refracción de la luz.
El índice de refracción de un medio
determinado (n) es la relación entre la
velocidad de la luz en el vacío (C) y la
velocidad de la luz en el medio (v)
como se muestra en la siguiente
ecuación:
Para esto se trabajó con una luz
monocromática de sodio a una longitud
de onda (389.3 nm), y una
temperatura 25,7. ºC, la determinación
del Índice de Refracción se ve
influenciada por la temperatura y la
longitud de onda de la luz emitida, bajo
condiciones controladas de medida,
esto es una propiedad constante para
un medio y permite determinar la
pureza de una sustancia o
[2]
cuantificación .
Durante el procedimiento experimental
se pudo observar que el índice de
refracción de la solución no varía
mucho con respecto al del agua, esto
se puede explicar, en el momento en
que se iniciaron concentraciones
diluidas de etanol hay más agua en el
medio que en el analito a analizar y la
formación de puentes de hidrógenos
entre ellos, pero cuando se aumentó
las concentraciones aumenta el índice
de refracción acercándose al del
etanol puro, el cual tiene un valor de
1,361indice de refracción.
La grafica 1, muestra un
comportamiento lineal por el método de
calibración de patrón externo este
método consiste en realizar
estándares, que son soluciones del
analito a las cuales se les conoce
exactamente su concentración, para
así mediante mínimos cuadrados se
obtuvo una concentración de etanol en
el ron equivalente a 31,38 %(v/v)
(±0,56) con un error del -10 % error por
defecto, este puede estar asociado a
las diferencias que existen entre los
patrones de etanol puro con respecto a
la muestra, ya que esta puede tener
ciertos compuestos adicionales que
pueden generar cierta variación en los
ángulos de refracción de la luz; otra
posible causa de error posiblemente es
debida a que el etanol es un
compuesto volátil y que al poseer
interacciones tan grandes con el agua
forman puentes de hidrogeno, otro
factor puede ser el cambio de
temperatura ya que este al incrementar
un grado centígrado causa una
disminución del índice de refracción
dificultando al momento de cuantificar,
una forma de corregir es adecuando al
refractómetro una chaqueta de manera
que circule agua a tal temperatura
proveniente de un baño termostatizado.
Mientras que para la calibración de
adición estándar se utiliza el mismo
procedimiento y con las mismas
dificultades del equipo de
refractometría, solo que aquí la
diferencia está al momento de medir ya
que para una calibración de patrón
externo solo se media a los patrones
con concentración conocida, mientras
que en adición estándar se mide
soluciones de patrones que contienen 3
mL de muestra, como se muestra en la
tabla 2, los índice de refracción son
muchos mayores que los de patrón
externo, obteniendo una concentración
de etanol del 3,32 %(v/v) con un
porcentaje de error de -94 %, error por
defecto, este error es muy grande
comparado con el de calibración de
patrón externo esto debido a que la
adición estándar es un método de
extrapolación, el resultado es menos
preciso que el que se obtiene por una
interpolación que es de la calibración
normal.
La curva de calibración estándar usa
mayores cantidades de muestra,
comparado con el método de
calibración por patrón externo y es
poco práctico y tedioso en el caso de
análisis de numerosas muestras, la
curva de adición de estándar sólo se
usa cuando hay evidencia de efectos
de matriz, para verificar se realizó una
prueba t, si los efectos de matriz son
despreciables, la pendiente
(sensibilidad) de la curva de adición
estándar no debe ser estadísticamente
diferente a la del método de calibración
normal, para este caso se encontró
efecto de matriz esto quiere decir que
sería recomendable utilizar el método
de adición estándar pero los valores de
concentración dicen lo contrario.
La presencia de este efecto de matriz,
en la muestra de ron se puede explicar
mediante el procesamiento de este, en
donde pueden quedar moléculas que
al final afecten el análisis realizado. En
la fabricación del ron la parte en donde
pueden quedar moléculas que afecten
el análisis de refractometría es la
destilación, la cual se realiza con el fin
de depurar el jugo de los residuos
que quedan de la fermentación. (4)
Para confirma esto es necesario
realizar el análisis pero se debe tener
un mayor cuidado posible para que
así no se presenten diferencias en lo
realizado con lo teórico.
Por último se determinó sacarosa a
azúcar casera mediante un polarímetro
o sacarímetro, este mide la rotación
angular de las sustancias ópticamente
activas en un plano de luz polarizada,
(luz polarizada, a las ondas
electromagnéticas del espectro
luminoso que oscilan en sólo un
plano)[3]
Las sustancias ‘ópticamente activas’
giran el plano de polarización de la luz
linealmente polarizada, en este caso la
solución de azúcar puede ser
ópticamente activa; si se coloca la
solución de azúcar entre un polarizador
y un analizador cruzados, parte de la
luz puede atravesar el sistema. El
ángulo que debe girarse el analizador
para que no pase nada de luz, y c9on
esto permita conocer la concentración
de la solución; se ha observado que la
rotación es directamente proporcional
a la concentración y el espesor de la
celda {5].
La luz polarizada atraviesa una
muestra constituida por una disolución
de la sustancia química sacarosa esta
es soluble en agua y ligeramente
soluble en alcohol y éter, cristaliza en
agujas largas y delgadas y es
dextrógira, es decir, desvía el plano de
polarización de la luz hacia la derecha.
Por hidrólisis rinde una mezcla de
glucosa y fructosa, que son levógiras,
pues desvían el plano de polarización
hacia la izquierda, por ello, esta mezcla
se llama azúcar inversa
Imagen 1
Para realizar la medición se utilizó
como fuente una luz monocromática de
sodio (línea D) a una determinada
temperatura, una vez determinada la
lectura se aplica la siguiente formula:
[ ]
En donde:
 [α]λT es la rotación específica.
 T es la temperatura.
 λ es la longitud de onda de la luz.
 α es el ángulo de rotación.
 l es la longitud del tubo del
polarímetro.
 c es la concentración de la
disolución.
La sacarosa tiene un ángulo rotacional
del 76,90 con un porcentaje de error
relativo del 15,64% error por defecto;
sabiendo que el ángulo de rotación es
directamente proporcional a la
concentración y al camino óptico, al
calcular la concentración de la
sacarosa se obtuvo un valor de
p/v en la muestra lo cual es un
porcentaje poco menor al esperado.
Estos sesgos se deban que al
momento de observar los datos que
arrojaba el instrumento no se podía
asegurar que era el valor verdadero, ya
que al observar la línea negra en el
círculo naranja era imperceptible a la
vista, y al ser una técnica sensorial se
ve afectado el análisis, además la
sacarosa como se mencionó
anteriormente tiene la propiedad de
formar complejos con el agua (figura 1)
y permanecer hidratada, debido a esta
propiedad se pueden presentar
lecturas que contengan cierto grado de
error, ya que a esta disociación el
polarímetro puede detectar otro ángulo
diferente al de la sacarosa, de igual
forma esta comparada con otros
disacáridos, tiene un conjunto de
propiedades únicas, no presenta
mutorrotación y no es un azúcar
reductor.
PREGUNTAS
1. ¿Se presenta alguna
diferencia entre las
concentraciones de etanol
encontradas por ambos
métodos?
Si se presentan una gran diferencia
entre las concentraciones de
etanol, ya que en la calibración de
patrón externo se realizó una
interpolación donde el valor se
acerca al centroide siendo más
preciso el dato; mientras que para
adición estándar se hacer una
extrapolación donde el rango de
error es mucho mayor debido a que
este análisis se realiza a los datos
de lo extremos de la calibración.
2. Con las pendientes de las dos
curvas establecer
estadísticamente si se
presentan efectos de matriz.
De acuerdo con las dos cuervas
establecidas si se presenta efecto
de matriz.
3. ¿Hay diferencias en las
lecturas antes y después de
la inversión? Explique.
Si hay diferencia, debido a que la
sacarosa presenta una rotación
diferente antes y después de la
inversión, ya que este es un
disacárido, compuesto que está
constituido por dos monosacáridos
tales como: la fructosa y la glucosa.
También son ópticamente activos ,
uno de ellos es levógiro y el otro es
dextrógiro, por tanto la medida es
la sumatoria de los dos y
generalmente cuando una
molécula se invierte cambia la
dirección hacia donde se desvía la
luz del plano polarizado, la
sacarosa es una sustancia
dextrógira y si se invierte será
levógira[6].
4. ¿Se presentan diferencias en
el contenido de sacarosa
aplicando la fórmula de
Clerget con el obtenido
mediante la curva de
calibración? De algunas
razones que expliquen este
hecho.
Si, se presentan diferencias, esto
se puede dar debido a que la
ecuación de clerget tiene en
cuenta los ángulos de rotación,
cuando la mezcla hidrolizada y se
elimina las interferencias de las
sustancias ópticamente activas
presentes en la muestra, mientras
que en la curva de calibración no
se tiene en cuenta otros ángulos
diferentes al de la sustancia a
 analizar. Esto también se puede dar 12refraccion.pdf/. Citado Abril 06 del
por los efectos de matriz, en lo que 2013.
no se tiene en cuenta al momento [3] skoog.,Holler J , Y Nieman T.,
de analizar. principios de análisis instrumental ,
quinta edición, McGraw-Hill,
CONCLUSIONES Interamericana de España, 2001.
Citado Abril 07 del 2013.
1. El etanol es una sustancia
muy volátil, que posee [4] http://www.conalcohol.com/ron-
grandes fuerzas historia-y-elaboracion. Citado Abril 07
intermoleculares (muy del 2013.
soluble) al interaccionar con [5]http://es.wikipedia.org/wiki/Polarimetr
el agua, que ocasionan %C3%ADa. Citado Abril 08 del 2013.
desviaciones en los [6]http://www.almeriastella.es/imagenes
volúmenes y pueden afectar /noticias/documentos/534.pdf citado
la determinación de la Abril 08 del 2013.
concentración de cada patrón
en las curvas de calibración
realizadas.
2. La determinación del índice
de refracción para el etanol
se ve directamente afectada
por factores como la
temperatura, la pureza de la
sustancia y por ende en los
cambios de concentración y
densidad.
3. La determinación de
sacarosa mediante
polarimetría depende de
factores como la temperatura
y de los cambios rotacionales
de la sustancia al estar en
contacto con el agua
(hidrolisis).
4. La concentración de etanol
en la muestra analizada, no
fue la esperada debido al
efecto de matriz o
interferencias de moleculares
dentro de la solución.

REFERENCIAS

[1]http://www.uned.es/094258/contenid
o/tcnicas/refractometria/refractometria3.
htm. Citado Abril 06 del 2013.
[2] http://www.metas.com.mx/guias
metas/la-Guia-Meta-08-