Análisis de mentol y alcanfor en Zepol® por la técnica de cromatografía de gases.

Alumna: Krissia J. Wilhelm Romero Carné: B37675

Curso: Análisis Químico Cuantitativo QU-0347

Palabras clave: Rubefaciente, mentol, alcanfor, cromatografía de gases, ungüento.

Resumen

Los rubefacientes son ampliamente utilizados para aliviar los dolores producidos
por artritis así como los musculares, el mentol y el alcanfor son componentes esenciales de
estos fármacos. En la práctica se realizó el análisis de estos por cromatografía de gases, en
el cual se tomó una muestra del rubefaciente, se trató y se inyecto en un cromatógrafo
(nombre), se realizó la cuantificación por medio de curva de calibración con patrones
externos de ámbitos de (1427-2378) mg/L y (1440-2400) mg/L para el mentol y el alcanfor
respectivamente. En los cuales se obtuvo una mediana de

Introducción

Los rubefacientes son sustancias que contienen silicatos además de otros productos
naturales como el alcanfor, eucaliptol, aceite de oliva; los silicatos tienen el papel de anti
irritante para disminuir la sensación de dolor, afectando el flujo de sangre local al dilatar
las venas capilares en la superficie de la piel produciendo una sensación de calor1; se
utilizan principalmente para aliviar los dolores musculares leves y de artritis.2

El zepol resfríos es un rubefaciente producido en Costa Rica por los laboratorios

ZEPOL, el cual alivia los síntomas del refrío, descongestiona y relaja el cuerpo 3, entre los
ingredientes presentes se encuentran el mentol y el alcanfor los cuales se encargan de dar el
efecto rubefaciente.

El mentol se encuentra en la planta Mentha piperita y se usa en cigarros, sopas y

perfumes por el olor agradable que posee, así como su acción refrescante 4. También se
utiliza como descongestionante, por lo que se utiliza mucho en los síntomas de bronquitis y
sinositis.5 El mentol se encuentra en fuentes naturales como levógiro, o como una mezcla
racémica en fuentes sintéticas. 6
 El alcanfor proviene del árbol Cinnamomum camphora, el cual se encuentra
principalmente en Asia, en el sur de China, Vietnam y Japón. Este se fácilmente absorbido
en piel e impone una sensación de frescura, pero a dosis altas (>500 mg) cuando es ingerido
es venenoso y provoca convulsiones, irritabilidad, y confusiones mentales.

La cromatografía de gases es una de las técnicas más utilizadas en los análisis

químicos, en ella los componentes de una muestra vaporizada se separan como
consecuencia de su reparto entre una fase móvil gaseosa y una fase estacionaria líquida o
sólida en una columna7, en el caso del laboratorio estas fueron hidrógeno/aire y una
columna capilar con fase estacionaria de polietilenglicol (Carbowax).

Los objetivos de la práctica son identificar y cuantificar el mentol y el alcanfor en

una muestra de Zepol resfríos por medio de la cromatografía de gases, así como evaluar la
precisión y exactitud del método presentado en la tesis Desarrollo de un método de
análisis cuantitativo por cromatografía de gases para los componentes de un producto
rubefaciente no farmacopieco realizada por Luis Fernando Castro Lizano.

Sección Experimental

Reactivos: Para la preparación de las curvas de calibración se utilizó mentol (C 10H20O) de

marca sigma- Aldrich de 99% de pureza, así como alcanfor (C 10H16O) de marca Merck y
geraniol (C10H18O) de 98% de pureza de marca sigma-Aldrich; además se diluyó con
hexano (C6H14) de grado HPLC, para las muestras se diluyo con el mismo solvente y para
los enriquecimientos se utilizó el mentol y el alcanfor descritos con anterioridad.

Equipo de laboratorio: Se utilizó un cromatógrafo de gases de marca Shimadzu

modelo…. Equipado con un detector FID, así como una columna capilar con fase
estacionaria de polietilenglicol (Carbowax), las inyecciones se realizaron con una jeringa de
10 µL.

Condiciones cromatográficas: Los parámetros que se utilizaron en el laboratorio son los

siguientes: temperatura de inyección 250 ºC, temperatura inicial columna 110 ºC, con una
rampa de 16 ºC/minuto cada 2 minutos, temperatura final de columna 190 ºC, y el flujo de
gas de 621 KPa con gas de hidrógeno/Aire.
 Muestras: Las muestras se obtuvieron de una muestra comercial de Zepol resfríos de 30 g
de lote…, la cual se cuarteo y se obtuvo una muestra representativa, de esta se pesó 0,2200
g del rubefaciente para determinar el mentol y el alcanfor, las muestras se disuelven en 12,0
mL de hexano en un baño ultrasónico durante 5 minutos, luego son trasvasadas a un balón
de 25,00 mL en donde se adiciono una alícuota de 1000 µL de geraniol y se llevó a la
marca de aforo con hexano, por último se filtraron por gravedad utilizando un embudo y
papel filtro Whatman 42. El filtrado se inyectó en el cromatógrafo.

Enriquecimiento: A tres de las muestras se les agrego 477 µL de mentol y 477 µL de

alcanfor antes de aforar con hexano.

Método de cuantificación: Se utilizó el método de curva de calibración de patrones

externos con Geraniol como estándar interno, se preparó una disolución madre combinada
de alcanfor y mentol, y se tomaron alícuotas de 6,0 mL, 6,7 mL, 8,0 mL; 8,7 mL; 9,4 mL y
10,0 mL; se diluyeron en balones de 25,00 mL con hexano y se agregó 1000 µL del
estándar interno, para obtener curvas de alcanfor y mentol que comprendían los ámbitos de
(1440-2400) mg/L y (1427-2378) mg/L respectivamente.

Resultados

A continuación se presentan los resultados obtenidos en la práctica.

Cuadro I. Incertidumbres de los patrones de mentol y alcanfor con su respectiva

concentración en miligramos por litro.

Mentol Alcanfor
Factor de incertidumbre Concentración Concentración
µ µ
(mg/L)
(mg/L)
µ (mg/L) patrón 1 6 1427 6 1440
µ (mg/L) patrón 2 6 1593 6 1608
µ (mg/L) patrón 3 7 1760 7 1776
µ (mg/L) patrón 4 7 1902 7 1920
µ (mg/L) patrón 5 7 2069 7 2088
µ (mg/L) patrón 6 7 2235 7 2256
µ (mg/L) patrón 7 8 2378 8 2400
U 12 12
U expandida al 95% de confianza con
un factor de cobertura de 2 para el ± 12 ± 12
patrón con el menor volumen medido.

La mayor fuente de incertidumbre encontrada es la incertidumbre por

reproducibilidad de picos, ver hoja de cálculo: incertidumbres.

Cuadro II. Datos obtenidos de la regresión lineal de la curva del mentol.

Variable Valor Variable Valor

Pendiente de la recta (m) 0,0015 Coeficiente de correlación (r) 0,9801
Sb 0,0001 S y/x 0,0384
Intersección (b) -0,2201 Sxo 51,00
Sa 0,5938 So 60,00
Límite Detección 181,00 Límite de cuantificación 602,00

Cuadro III. Datos obtenidos de la regresión lineal de la curva del alcanfor.

Variable Valor Variable Valor

Pendiente de la recta (m) 0,0015 Coeficiente de correlación (r) 0,9870
Sb 0,0001 S y/x 0,0246
Intersección (b) -0,4370 Sxo 30,00
Sa 0,3806 So 38,40
Límite Detección 155,22 Límite de cuantificación 384,05

Cuadro IV. Concentraciones e incertidumbres de las muestras 1, 2, 3 y 4, así como de las

muestras enriquecidas A, B y C.

Muestra µ Concentración mentol (mg/L) Concentración alcanfor (mg/L)

1 12 542 710
2 14 620 778
3 12 509 679
4 12 511 691

La mayor fuente de incertidumbre encontrada es la incertidumbre por

reproducibilidad de picos, ver hoja de cálculo: incertidumbres.
Cuadro V. Gramos obtenidos de mentol y de alcanfor en las muestras de Zepol resfríos 1, 2,
3 y 4, así como en las muestras enriquecidas.

Gramos de
µ µ
Muestra mentol gramos de alcanfor
1 1,86 0,04 2,4400 0,06
2 2,13 0,05 2,6760 0,06
3 1,75 0,04 2,3345 0,05
4 1,76 0,04 2,3763 0,05
A (Enriquecida) 2,132 0,004 2,7276 0,005
B (Enriquecida) 1,977 0,004 2,5769 0,005
C (Enriquecida) 2,085 0,004 2,7060 0,005

Cuadro VI. Porcentajes de recuperación de mentol y alcanfor en las muestras enriquecidas

A, B y C.

Muestra % de enriquecimiento mentol % de enriquecimiento alcanfor

A (Enriquecida) 81,5431 85,5705
B (Enriquecida) 80,0957 84,7270
C (Enriquecida) 81,1023 85,4421

Cuadro VII. Desvio robusto de las áreas de las muestras y las muestras enriquecidas, asi
como de las masas medidas.

Variable DER
Muestras 11,123
Muestras enriquecidas 1,046
Masas de las muestras enriquecidas 0,0000
 Altura patrón/Altura Estandar Interno
4.00
3.50
3.00 f(x) = 0 x − 0.22
2.50 R² = 0.96
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
1,400 1,600 1,800 2,000 2,200 2,400
Concentración Mentol mg/L (± 12 mg/L)

Figura 1. Curva de calibración de mentol para cuantificar las muestras de Zepol.

Altura patrón/Altura Estandar Interno

3.30
3.10
f(x) = 0 x − 0.44
2.90 R² = 0.97
2.70
2.50
2.30
2.10
1.90
1.70
1.50
1,400 1,600 1,800 2,000 2,200 2,400 2,600
Concentración de Alcanfor mg/L (±12 mg/L)

Figura 2. Curva de calibración de alcanfor para cuantificar las muestras de Zepol.

Discusión de resultados

Se realizó el análisis cromatográfico de 7 muestras de Zepol resfríos, 3 de ellas

enriquecidas en mentol y alcanfor, se realizó primeramente una identificación de los
compuestos, seguido de su cuantificación por medio del método de curva de calibración.

Los tiempos de retención de los compuestos a analizar, alcanfor, mentol, hexano y

geraniol, dictaron las identidades de los analitos en las muestras, los tiempos de retención
obtenidos fueron de aproximadamente 7,7 minutos, 6,3 minutos, 2,0 minutos, 8,7 minutos
respectivamente.

El geraniol es el estándar interno utilizado en la práctica, éste cumple con la

finalidad de relacionar las áreas del analito con sus respectivas áreas, esto para solventar las
variaciones de los volúmenes inyectados8. El geraniol fue otorgado por la proveeduría de la
Escuela de Química, al realizar la identificación con la disolución patrón, se obtuvo que
éste presentaba impurezas, Bäcktor et al. proponen que el geraniol se oxida en presencia
de aire, mediante una serie mecanismos que conducen a la formación de epóxidos,
reordenamientos Baeyer-Villiger y transesterificaciones; la presencia de estos compuestos
obligo a que las corridas cromatográficas presentaran un tiempo final de retención de 14,40
minutos.

Además debido a que el geraniol ostentaba una gran concentración, se procedió a

utilizar el pico de 8,2 minutos para obtener la relación de áreas.

Los resultados obtenidos de la cuantificación de las muestras indican que la mediana

de las muestras sin enriquecer es de 1,8107 g para el mentol y 2,4081 g para el alcanfor, lo
que representa un 27,64% y 36,76% respectivamente de la masa declarada en la etiqueta,
las causas a esta drástica disminución del analito son las perdidas presentadas por la
volatilización de la muestra pues su conservación no fue la adecuada, al presentarse
problemas con la refrigeración las muestras pasaron un fin de semana a temperatura
ambiente fomentando la perdida de los analitos.

Esto se dio a pesar de q

, la cual según Remington

Conclusiones

Recomendaciones

Se recomienda utilizar una menor cantidad de geraniol, pues su elevada

concentración dificulta la realizar una buena relación de áreas, por ende afecta la
cuantificación de los analitos así como extiende el tiempo de retención, debido a que este se
encontraba contaminado, en una menor concentración es probable que los contaminantes
posean áreas despreciables.
Bibliografía