Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de

la Educacin"

FACULTAD
DE INGENIERA
GEOGRFICA
CINTICA
ENZIMTICA
AMBIENTAL Y ECOTURISMO
ESCUELA DE INGENIERA AMBIENTAL

Docente:
Ing. Erick Mercado Zarate
Ciclo: V
Aula: D6 -3 (MA)
Integrantes:
Altamirano Ramos Liam
Castillo Mendoza Kevin
Pio Ochoa Leonardo
Quiroz AHuanari John
Valer Ortiz Zarahi

2015

ESCUELA DE INGENIERIA AMBIENTAL

INTRODUCCIN

El trmino cintica enzimtica implica el estudio de la velocidad de una reaccin

catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener factores como los inhibidores.
Uno de los principales estudios que se realizan en una enzima es medir el efecto en la
velocidad de la reaccin cuando se modifican las concentraciones del sustrato y se
mantienen constantes la concentracin de enzima, el pH, la fuerza inica del medio, la
temperatura, entre otros.
Se evala la influencia de estos factores en la reaccin catalizada por enzimas con la
finalidad de determinar los intermediarios en una reaccin y el papel que juegan en la
reaccin enzimtica, es decir, para predecir mecanismos de reaccin. Es esencial
entender estos mecanismos para desarrollar nuevas herramientas moleculares, por
ejemplo, para combatir enfermedades en las que se conoce a la enzima que la produce.
Tambin es usual medir la actividad enzimtica con diferentes sustratos para entender su
especificidad o bien, medir la actividad de la enzima de diferentes tejidos u organismos
para entender cmo las diferencias en actividad estn relacionadas con la funcin y/o la
fisiologa del organismo del que proceden.

-Solucin Sustrato almidn

500 mg/L.
-Enzima amilasa extrada
de granos de trigo
germinados por 72 horas

Espectrofotmetro o
fotocolormetro

Reactivo de yodo 0.01 eq/L

de Yodo en HCl 0.02M

pipetas

Tubos de prueba y gradila

Pro pipeta

MATERIALES

CLCULOS
1. Calcule las concentraciones respectivas de cada tubo del estndar y anote sus
resultados de absorbancia.
Tubo
1
2
3
4
5
6

Conc.
(mg/ml)
8,3
16,67
33,33
50
66,67
83,33

Absorb.
0,065
0,069
0,123
0,071
0,272
0,264

a) En un papel milimetrado grafique la curva estndar

Grafica en papel milimetrado con la curva estndar, realizado con una calculadora cientfica, se trabaj con cinco tubos,
exceptuando el tubo nmero cuatro porque es el que se alejaba de la tendencia lineal de los dems tubos.

b) Determine el factor de calibracin de la curva

CURVA DE CALIBRACION 1
0.3

0.27

0.25

0.26

f(x) = 0x + 0.02
LineaRde
lineal
= tendencia
0.74

0.2

ABSORBANCIA 0.15

0.12

0.1

0.07
0.07 0.07
Linear (Linea de tendencia lineal)

0.05
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

CONCENTRACION mg/ml

En el grfico de la curva de calibracin, se tom los seis tubos, la curva de calibracin

tiene una tendencia lineal con un coeficiente de correlacin de 0,7365. Factor de
calibracin sin correccin: 0,0029. Factor de calibracin con correccin:
A=0,0029C+0,0189, donde C es concentracin y A es absorbancia.

CURVA DE CALIBRACION 2
0.3

0.27
f(x) = 0x + 0.03
R = 0.95
linea de tendencia lineal

0.25

0.26

0.2

ABSORBANCIA 0.15

0.12

0.1

0.07 0.07
Linear (linea de tendencia lineal)

0.05
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

CONCENTRACION mg/ml

En el grfico de la curva de calibracin, se tom cinco tubos, exceptuando el tubo

numero 4 porque es el que se alejaba de la tendencia lineal de los dems tubos, por lo
tanto, la curva de calibracin tiene una tendencia lineal con un coeficiente de
correlacin de 0,9479. Factor de calibracin sin correccin: 0,003. Factor de calibracin
con correccin: A=0,0031C+0,0298, donde C es concentracin y A es absorbancia.

2. La velocidad de reaccin se define como la cantidad de sustrato consumido o de

producto formado por unidad de tempo. En nuestro caso se medir la
desaparicin de sustrato frente al tiempo.
a) Determinar la concentracin de sustrato (almidn) de cada tubo empleando la
curva estndar de almidn (por extrapolacin o usando el factor de calibracin).
Conc. Mg/ml
Conc. Mg/ml
Tubo
C=(AC=A/0,0029
0,0189)/0,0029
1
0
0,333
108,31
114,83
2
2
0,098
27,28
33,79
3
4
0,083
22,10
28,62
4
6
0,095
26,24
32,76
5
8
0,087
23,48
30,00
Para calcular la concentracin mediante el factor de calibracin sin correccin/
con correccin de la curva de calibracin 1.
Tiempo
(min)

Absorbanci
a

b) En el papel milimetrado representar la curva de progreso de la reaccin

graficando la concentracin de sustrato vs tiempo de reaccin.
c) Determinar experimentalmente la velocidad inicial de la enzima amilasa
d[P] o d[S]/dT = Vi = tg = b/a

120.00
108.31
100.00
80.00

CONCENTRACION mg/ml

60.00
40.00

27.28

26.24

22.10

23.48

20.00
0.00

TIEMPO min

Vinicial =

27.28108.31
20

= -40.52

|V inicial| = |40.52| = 40.52