Tercer Cuatrimestre

Divisin: Ciencias de la Salud,

Biolgicas y Ambientales

Cuaderno de Prcticas
Qumica Analtica
Unidad 4. Mtodos espectrofotomtricos

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Qu es el cuaderno de prcticas y ejercicios?

El cuaderno de prcticas simuladas de laboratorio y ejercicios es una herramienta de
actividades formativas que contribuye a desarrollar los conocimientos tericos necesarios
para comprender los anlisis qumicos y su realizacin.
Los procedimientos a desarrollar que incluyan alguna medicin de sustancia con
instrumental de laboratorio son en su totalidad simulados, es decir, se nombraran los
pasos a seguir, sin embargo no se realizarn de forma presencial debido a que no se
cuenta con el equipo de laboratorio, por lo tanto slo te enfocars en realizar los clculos
necesarios para la cuantificacin de sustancias.
El presente material se encuentra divido en dos apartados: Prcticas tericas de
laboratorio y ejercicios.
En el apartado de Prcticas tericas, encontrars los datos necesarios para simular tus
prcticas de laboratorio, con base en ello describirs el desarrollo, anlisis de datos,
resultados y conclusiones. Adems de realizar una pequea investigacin bibliogrfica
sobre el tema de cada prctica, para sustentar el trabajo experimental.
Los ejercicios que debes realizar son aplicaciones de los conocimientos adquiridos en los
ejemplos, cambiando las variaciones de los reactivos para lograr el objetivo. Debido a que
no se pueden realizar las prcticas de forma presencial, se ofrece la alternativa de visitar
pginas en internet donde se encuentren videos de las realizaciones de las prcticas.
En el apartado de ejercicios debers realizar las acciones sugeridas, de preferencia la
totalidad de ellos para poder aplicar despus los conocimientos tericos. Recuerda que la
qumica analtica es una ciencia pura que puede ser aplicada en asignaturas posteriores.

Cul es su propsito?
El propsito del cuaderno de prcticas y de ejercicios es que reafirmes los conocimientos
adquiridos, y que valores la importancia de la aplicacin de los mtodos analticos para
las diferentes determinaciones en las diversas reas de la ciencia, de la industria, de
servicios, etc.
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Cul es el alcance de las prcticas?

Por medio de las prcticas simuladas puedes aplicar los conocimientos de los clculos de
las concentraciones, el tipo de reaccin que se realiza, el mtodo que se aplica, la
recopilacin de los datos, la forma de expresar los resultados, el anlisis de los resultados
y las conclusiones; lo que te apoyar para alcanzar la competencia de la asignatura.

Cul es la estructura textual para reportar las prcticas?

Al finalizar la realizacin de una prctica terica de laboratorio, se debe elaborar un
reporte de la prctica que contenga los siguientes apartados:
Informacin general del reporte de prctica
Ttulo de la
prctica

Establecida en la actividad

Marco terico

Este apartado responde a las preguntas de qu trata?, por qu

se ha realizado?, cmo se elabor? Se debe ofrecer una visin
panormica de la prctica.

Objetivos

Se especifica lo que se pretende obtener con la realizacin de la

prctica.

Desarrollo

Se enumeran los materiales y reactivos a utilizar especificndose

la cantidad requerida.

Materiales,
reactivos y
procedimiento

De igual manera, se explican los pasos realizados con los que se

logr cumplir con el objetivo de la prctica, as como la obtencin
de los datos.

Datos

Se ordenan los datos en tablas y se realizan las grficas o

clculos necesarios, de acuerdo al tipo de prctica realizada.

Anlisis de datos

Se analizan los datos, as como las grficas o resultados de las

operaciones realizadas.

Resultados

Datos numricos obtenidos del procedimiento realizado durante el

desarrollo de la prctica.

Conclusiones

En este aparatado se debe responder a las siguientes preguntas:

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Referencias

a) Qu dicen los datos respecto a la prctica?

b) Qu sucedi en la prctica?
c) Qu se aprendi al completar esta prctica?
Aquellas referencias que hayas consultado. Se debe utilizar el
formato APA.

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Introduccin
En esta cuarta unidad, analizaremos los mtodos espectrofotomtricos en la regin
visible, uv, infrarroja y por absorcin atmica. As como, sus principales aplicaciones en el
anlisis qumico.
De igual manera, consolidaremos los trminos y procedimientos utilizados en las
determinaciones espectrofotomtricas, mediante la resolucin de ejercicios tericos,
enfocados principalmente al clculo de concentraciones de sustancias problema,
utilizando un patrn mediante la construccin de curvas de calibracin.
Finalmente, las prcticas planteadas te permitirn conocer y aplicar los procedimientos a
seguir en un laboratorio de anlisis qumico, para caracterizar un analito. Los clculos
matemticos basados en la estequiometria, te reforzarn la competencia de habilidad de
pensamiento, que te ser de gran utilidad para tu formacin personal y profesional.

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Prcticas

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Actividad 4. Prctica 1: Cuantificacin glucosa en mermeladas.

Elaboren la prctica simulada de laboratorio desarrollando nicamente los
procedimientos de cuantificacin de sustancias que se indican a continuacin.
Antes de iniciar, investiguen cul es la funcin de la glucosa en las mermeladas y que
complejo colorido se forma al hacer reaccionar glucosa con el cido 3,5-dinitrosaliclico
(DNSA).
Posteriormente:
1. Preparen el reactivo DNSA (cido 3,5-dinitrosaliclico): disuelvan 10 g de DNSA
en 200 ml de NaOH 2.0M
2. Calienten la disolucin y mezclen perfectamente
3. Disuelvan 300 g de tratrato de sodio y potasio en 500 ml de agua (estabilizante de
color)
4. Mezclen ambas disoluciones, agiten y enrasen a 1.0 l con agua destilada
Cuantificacin de azcares totales:
1. Pesen 1.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 10 ml de H2SO4
2M
2. Calienten en bao de agua hirviendo durante 20 minutos
3. Dejen enfriar y aadan con mucho cuidado 12 ml de NaOH al 10% p/v
4. Agiten y filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada
5. Transfieraan 10 ml de la disolucin de la mermelada a otro matraz aforado de 100
ml y enrasar con agua destilada
Cuantificacin de azcares reductores:
1. Pesen 3.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 50 ml de agua
destilada
2. Calienten y agiten durante 10 minutos
3. Filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada
4. Transfieran 10 ml de la a otro matraz aforado de 100 ml y enrasar con agua
destilada
Obtencin de la curva de calibracin:
1. Preparen la solucin estndar de glucosa (15 mg/ml): pesen 1.5 g de glucosa en
un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada
2. Etiqueten 5 matraces aforados de 100 ml con las letras A, B, C, D y E
3. En cada matraz transfieran los volmenes de solucin estndar de glucosa y
agua destilada de acuerdo a la siguiente tabla:

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Matraz

Volumen de solucin estndar de glucosa (ml)

10

Volumen de agua destilada (ml)

98

97

94

92

90

Concentracin de glucosa (mg/ml)

0.3

0.45

0.9

1.2

1.5

4. Etiqueten y llenen seis tubos de muestra, tal y como se muestra en la siguiente

tabla:
Nmero de la muestra

Blanco

N/A

Volumen de solucin estndar de glucosa (ml)

Volumen de reactivo DNSA (ml)

Volumen de agua destilada (ml)

Solucin estndar de glucosa (matraz)

5. Calienten los tubos en agua hirviendo durante 5 minutos

6. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo
7. Midan la transmitancia de cada uno de los tubos a 430 nm en el espectrofotmetro
Concentracin de
glucosa (mg/ml)

Transmitancia
(lectura del
Spektra, T%)

Absorbancia
(A)

Absorbancia
especfica de la
glucosa (A
Ablanco)

0 (Blanco)
0.30
0.45
0.90
1.20
1.50

27.54
23.44
20.04
18.21
15.13
14.45

0.56
0.63
0.69
0.74
0.82
0.84

0
0.07
0.13
0.18
0.26
0.28

8. Grafiquen los valores de absorbancia vs. Concentracin, para obtener la curva de

calibracin

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Medidas de las muestras de mermelada:

1. Coloquen 1 ml de la disolucin de mermelada, 1 ml del reactivo de DNSA y 2 ml
de agua destilada en un tubo de ensayo
2. Calienten los tubos en agua hirviendo, durante 5 minutos
3. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo
4. Determinen la transmitancia de cada tobo en el espectrofotmetro a 430 nm.
5. Los valores obtenidos para las muestras fueron los siguientes:
Muestra

Transmitancia
(lectura del
Spektra, T%)

Absorbancia
(A)

1
2

18.6
21.3

0.73
0.67

Absorbancia
especfica de la
glucosa
(A Ablanco)
0.17
0.11

6. Con la ayuda de la curva estndar, determinen la concentracin de glucosa en las

muestras
7. Finalmente, determinen la concentracin de glucosa por gramo de mermelada, no
olviden considerar las diluciones de cada una de las muestras
8. Realicen un reporte con los apartados sealadas a continuacin:
a) Ttulo de la prctica
b) Marco terico
c) Objetivos
d) Desarrollo (materiales, reactivos y procedimiento)
e) Resultados
f) Anlisis de resultados
g) Conclusiones
h) Referencias

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Actividad 6. Prctica 2: Cuantificacin de plomo en material de empaque y dulces

de tamarindo
Elaboren la prctica simulada de laboratorio desarrollando nicamente los
procedimientos de cuantificacin de sustancias que se indican a continuacin.
Antes de iniciar, investiguen por qu es importante dejar reposar el material en cido
ntrico y enjuagarlo con agua desionizada. Adems, cul es la concentracin de plomo
permitida en alimentos por la Secretaria de Salubridad y Asistencia.
1. Laven todo el material a utilizar con jabn libre de plomo, y enjuagenlo con agua
de la llave
2. Sumerjan el material en un recipente con HNO3 al 30%
3. Dejenlo tapado y reposando durante 24 horas
4. Enjuaguen el material con agua desionizada. Dejen escurrir y secar pos s solo
Preparacin de las muestras:
1. Pesen 200 mg del material de empaque (sin lavar) y coloquenlo en un matraz
Kjeldhal con 10 ml de cido ntrico concentrado
2. Calienten en un digestor durante 3 horas, la muestra debe quedar traslcida, si
queda mbar, adicionar perxido de hidrgeno gota a gota con agitacin continua
3. Dejen enfriar y filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua
desionizada
4. Trabajen en las mismas condiciones un blanco de reactivo
5. Preparen el espectrofotmetro de absorcin atmica de flama, coloquen la
lmpara de ctodo hueco para plomo, empleando la lnea de resonancia a 217 nm,
en un sistema quemador de flujo laminar-nebulizador y una flama de aire-acetileno
6. Calibren el espectrofotmetro usando el blanco, ajustando el instrumento a cero
7. Determinen la absorbancia de las disoluciones estndar, de menor a mayor
concentracin
8. Determinen la absorbancia de las muestras problema
9. Los resultados de la curva estndar y de las muestras problema son las
siguientes:

Blanco
Estndar 1
Estndar 2
Estndar 3
Estndar 4

Curva estndar de plomo

ppm
0.0
0.1
0.2
0.4
0.8

Absorbancia
-0.0009
0.0050
0.0084
0.0172
0.0331

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10

Estndar 5
Estndar 6
Estndar 7

1.2
1.6
2.0

0.0506
0.0663
0.0821

Absorbancias de muestras problema

Muestras

Absorbancia

Empaque (celofn)

0.0137

Empaque (plstico)

0.0075

Dulce + empaque (celofn)

0.0185

10. Tracen la curva estndar y determinen la concentracin de plomo en las

muestras problema
11. Concluyan respecto a la concentracin de plomo encontrada en las muestras y
los lmites que establece la Secretara de Salubridad y Asistencia
12. Realicen un reporte con los apartados sealadas a continuacin:
a) Ttulo de la prctica
b) Marco terico
c) Objetivos
d) Desarrollo (materiales, reactivos y procedimiento)
e) Resultados
f) Anlisis de resultados
g) Conclusiones
h) Referencias

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Ejercicios

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12

4.1 Espectrofotometra
1. Convertir los siguientes valores de absorbancia en tanto por ciento de
transmitancia:
a) 0.375
b) 1.325
c) 0.012
2. Convertir los siguientes valores de tanto por ciento de transmitancia en valores de
absorbancias:
a) 33.6
b) 92.1
c) 1.75
3. Del anlisis de los siguientes resultados experimentales, comprueba si hay o no
cumplimiento de la ley de Beer:
C (M)
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05

%T
30
40
50
60
70

4. A 575 nm (la longitud de onda de absorcin mxima del complejo) las disoluciones
del quelato CuX22+ cumplen la ley de Lambert-Beer en una amplia gama de
concentraciones. Ni el Cu2+ ni el ligando X absorben a esta longitud de onda. Una
disolucin 3.4 x 10-5 M de CuX22+ en una celdilla de 1 cm de paso ptico tiene una
transmitancia de 18.2 %.
a) Calcular la absorbancia de esta disolucin.
b) Calcular la absorbancia de una disolucin del quelato CuX22+ cuya
transmitancia a esta longitud de onda es del 36.4%.
5. Se pesan 500 mg de una muestra que contiene un compuesto coloreado X, se
disuelven y se diluyen a 500 ml. La transmitancia de una alcuota de esta solucin,
medida a 400 nm y en cubetas de 1 cm de paso, es de 35.5%. Se pesan 10 mg de
sustancia X pura, se disuelven en el mismo solvente y se diluyen a 1 litro; su
transmitancia medida en las mismas condiciones es 50.2%. Cul es el porcentaje
de X en la muestra original?
6. El anlisis del contenido de calcio en una suspensin oral se muestra a
continuacin: 5.0 ml de la suspensin son tratados con 5.0 ml de HCl 6.0M y lla
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mezcla se lleva a ebullicin por 30 minutos. la solucin anterior se filtra y se afora

a 25 ml con agua destilada. De la solucin anterior se toman 2.0 ml y se aforan a
100 ml con agua destilada, la absorbancia de esta solucin fue de 0.079. Cul
ser la cantidad de calcio en la muestra original (mg/ml) si una solucin patrn de
calcio de 2.0 ppm, reporta una absorbancia de 0.123 bajo las mismas condiciones.
7. Una alcuota de 25.0 ml de una disolucin problema de quinina se diluy a 50.0 ml
y, al ser medida en un espectrofotmetro con b= 1 cm present una absorbancia
de 0.416 a 348 nm. Una segunda alcuota de 25.0 ml se mezcl con 10.0 ml de
una disolucin de quinina cuya concentracin es de 23.4 mg/l; luego de diluir esta
mezcla a 50.0 ml present una absorbancia de 0.610 para b= 1cm. Calcula la
concentracin de quinina en la muestra expresada en ppm.
8. El anlisis de oro puede llevarse a cabo por espectrofotometraextractiva (en
forma del complejo bromoauratotri-octilfosfina). Para ello, una muestra de 0.500 g
de mineral se trata con agua regia y se lleva a un volumen de 500 ml. A 25 ml de
una disolucin que contena in bromuro y cido fosfrico en exceso se agrega 5
ml de la disolucin de la muestra y se agitan con 5 ml de disolucin clorofrmica
de xido de trioctilfosfina. Suponiendo que se extrae el 90% del oro a la fase
orgnica, la absorbancia del extracto orgnico fue de 0.780 unidades utilizando
celdillas de 1.00 cm de paso ptico.
Con un patrn de oro que contena 1000 g por cada 5 ml de fase orgnica se
tomaron volmenes de 0, 0.5, 1.0, 2.0 y 2.5 ml y se llevaron a 10 ml con
Cloroformo. Las absorbancias obtenidas fueron las siguientes:
V ml
Abs.

0
0.040

0.5
0.230

1.0
0.420

1.5
0.610

2.0
0.800

2.5
0.990

a) Calcular el porcentaje de oro en la muestra.

9. La determinacin de cobre, por absorcin atmica en llama, en muestras de
suspensiones custicas producidas durante la fabricacin de sosa, se llevaron a cabo
por el siguiente procedimiento: Una muestra de 200 ml de la disolucin custica, tras el
tratamiento adecuado, se lleva a un volumen de 500ml. Utilizando absorcin atmica, y
con patrones de Cu. Se obtienen los resultados que se representan en la tabla.
Disolucin
blanco
Patrn 1
Patrn 2
Patrn 3
Patrn 4

ppm de cobre
0
0.20
0.50
1.00
2.00

Absorbancia
0.007
0.014
0.036
0.072
0.230

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Muestra

--

0.027

a) Determinar la concentracin de cobre en la suspensin custica.

10. Cuando una solucin de 8.50x10-5 del compuesto A es medida en una celda de
1.0 cm reporta una absorbancia de 0.129 y 0.764 a 475 y 700 nm,
respectivamente. Una solucin de concentracin de 4.65x10-5 M del compuesto
Bexhibe absorbancias de 0.567 y 0.083 bajo las mismas condiciones. Calcula la
concentracin de A y B en una solucin que reporte las siguientes absorbancias
en una celda de 1.25 cm:
a) 0.502 a 475 y 0.912 a 700 nm
11. En qu posiciones aproximadas absorbern en el IR los siguientes compuestos?

12. La siguiente tabla contiene los valores de absorbancia de una curva estndar para
determinar protenas totales en una muestra de plasma:
Cantidad de protena (mg)

Absorbancia

0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0

0.100
0.188
0.272
0.392
0.430
0.496

Cul ser la cantidad de protenas en una muestra de plasma, cuyo valor de

absorbancia fue de 0.406?

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