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ADN
Dirigir el funcionamiento de la célula. El ADN contiene las instrucciones que
un organismo necesita para desarrollarse, sobrevivir y reproducirse. Para
realizar estas funciones, las secuencias de ADN deben ser transcritas a
mensajes que puedan traducirse para la fabricación de proteínas, que son
las moléculas complejas que hacen la mayor parte del trabajo en
nuestro cuerpo.
EXTRACCIÓN DE
ADN
• Proceso de liberación del
material genético contenido
dentro de una célula.
Espectrofotometría
Los ácidos nucleicos tienen un máximo de absorción de la luz a 260 nm.
Cualitativo
:
Detección con electroforesis en gel de agarosa
Detección con electroforesis en gel de
agarosa
Gel revelado
COMPETENCIAS
10. Observación del DNA: Vertemos muy lentamente el alcohol en el tubo de ensayo
con la solución. Al cabo de pocos segundos seremos capaces de observar tres capas
bien diferenciadas. Encima de todo estará el alcohol, debajo de todo estarán los
restos celulares (membranas, orgánulos) del plátano y los otros componentes de la
solución y, en la interfase observaremos una especie de hilos blancos rodeados de
burbujas. Eso es el DNA.
PROCEDIMIENTO
Extracción de ADN en Célula Animal (Hepatocito)
a. Triturar 10g de hígado de pollo en 50 ml de agua corriente. Puede realizarse mediante una batidora
o con un mortero con arena lavada. Con ello se consigue romper las membranas citoplasmáticas y
que los núcleos queden sueltos.
b. Filtrar varias veces sobre una gasa para separar los restos de tejidos que hayan quedado por
romper.
c. Añadir al filtrado un volumen igual de NaCl 0,2 mM. Este medio es hipertónico y se produce el
estallido de los núcleos quedando libre las fibras de cromatina. A continuación se añade 1 ml de
desoxicolato de sodio al 20 %, o de detergente de tipo lavavajillas. La acción del detergente es
formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN.
d. Añadir mediante una pipeta 50 ml de alcohol de 96°. Hay que hacerlo de forma que el alcohol
resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase precipita el ADN.
e. Introducir una bagueta o agitador e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van
adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de
muchas fibras de ADN.
RESULTADOS
1. Realice los esquemas de cada una de las observaciones
2. Interprete los resultados
CUESTIONARIO
1. ¿Qué función cumple el lavavajillas en el proceso de extracción de ADN?
2. ¿Para qué utilizamos el zumo de piña en la extracción de ADN?
3. ¿Qué función cumple el etanol en el proceso de extracción de ADN?
4. ¿Para qué utilizamos sal en el proceso de extracción de ADN?
FUENTES DE INFORMACION
1. ALBERTS B; LEWIS J; JOHNSON A .2010. Biología molecular de la célula. Ediciones
Omega, S.L. 5 ª edición.
2. LODISH H; BERK A; MATSUDAIRA P; GIOVANNIELLO O; MÉNDEZ A.2005.Biología
celular y molecular. Editorial Médica Panamericana. 2 ª edición.