ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
CARRERA DE INGENIERA EN
BIOTECNOLOGA AMBIENTAL
INFORME DE LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA
Prctica No 1
DATOS GENERALES
INTEGRANTES:

Klever Niquinga
Jeimy Prez
Mara Beln Veloz
Katherine Tipantasig
Norma Ugenio

FECHA DE REALIZACIN:
ENTREGA:
2015/ 04/ 27

FECHA DE
2015/ 05/

08

1. TEMA: EXTRACCION DEL ADN VEGETAL.

2. OBJETIVOS:
2.1

OBJETIVO GENERAL

2.2

Extraer el ADN de las Banana licuadas con agua.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Mediante la sencilla aplicacin de una tcnica separar

el ADN vegetales de las bananas.
Preparar una solucin de banana procesada con sal
agua destilada, shampoo y alcohol.
Identificar las hebras de ADN en la solucin final.

3. METODOLOGIA

3.1

MARCO TEORICO:
ADN

El cido desoxirribonucleico (polmero de unidades menores

denominados nucletidos) junto con el cido ribonucleico,
constituye la porcin prosttica de los nucleoproteidos, cuyo
nombre tiene un contexto histrico, ya que se descubrieron
en el ncleo de la clula.
Se trata de una molcula de gran peso molecular
(macromolcula) que est constituida por tres sustancias
distintas: cido fosfrico, un monosacrido aldehdico del
tipo pentosa (la desoxirribosa), y una basa nitrogenada
cclica que puede ser purica (adenina o citosina) o
pirimidinica (timina o guanina). La unin de la base
nitrogenada (citosina, adenina, guanina o timina) con la
pentosa (desoxirribosa) forma un nuclesido; este,
unindose al cido fosfrico, nos da un nucletido; la unin
de los nucletidos entre s en enlace diester nos da el poli
nucletido, en este caso el cido desoxirribonucleico. Las
bases nitrogenadas se hallan en relacin molecular 1:1, la
relacin adenina + timina/ guanina +citosina es de valor
constante para especie animal. Estructuralmente la molcula
de ADN se presente en forma de dos cadenas helicoidales
arrolladas alrededor de un mismo eje (imaginario); las
cadenas estn unidas entre s por las bases que la hacen en
pares. Los apareamientos son siempre adenina- timina y
citosina- guanina. El ADN es la base de la herencia.
Extraccin del ADN Vegetal

La extraccin de ADN de
una muestra celular se
basa en el hecho de que
los iones salinos son
atrados hacia las cargas
negativas
del
ADN,
permitiendo
su
disolucin y posterior
extraccin de la clula.
Se empieza por lisar
(romper)
las
clulas
mediante un detergente,
vacindose su contenido molecular en una disolucin
tampn en la que se disuelve el ADN. En este momento, el
tampn contiene el ADN, de gran longitud, e habrn
fraccionado en cadenas ms pequeas y separadas de el por
accin del detergente. Solo queda, por tanto, extraer ADN de
esa mezcla de tampn y detergente, para lo cual se utiliza
alcohol isoamilico, probablemente el nico reactivo de esta
prctica que no suele haber en una cocina.
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del ncleo de todas las
clulas, por lo tanto, podremos extraerlo a partir de
prcticamente cualquier material de origen biolgico por lo
que es necesario homogeneizar el tejido disgregndolo y
separando sus clulas y dems componentes, luego romper
las clulas para separar el ncleo y romper ste para liberar
el ADN, separarlo de las protenas y precipitarlo para
separarlo de la solucin acuosa.
4. EQUIPOS Y MATERIALES
4.1 MATERIALES

1 taza o vaso de plstico (por grupo)

Una cuchara plstica para medir y mezclar
Papel filtro
1 banana
1 pipeta de transferencia plstica o un gotero medico
1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o
91% de alcohol isopropilico
1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur

4.2 EQUIPOS

Licuadora

1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con

alcohol.

4.3 SUSTANCIAS
20 ml de agua destilada
Shampoo de color claro
Sal de mesa, con o sin Iodo
5. PROCEDIMENTO

En una licuadora,
mezclar una banana
por taza de agua
destilada (250 ml)

Licuar por 15-20

segundos hasta que la
solucin se mezcle.

En una taza preparar una

solucin consistente con
una cucharadita de t de
shampoo y 2 pizcas de
sal

A la solucin
preparada en el paso
3, agregar tres
cucharaditas de t de
la mezcla de banana
del paso 1

Disolver la sal y el
shampoo revolviendo
lentamente con la
cuchara de plstico
evitando formar espuma

Agregar 20ml (4
cucharaditas de agua
destilada)

Mezclar la solucin
con la cuchara por
5-10 minutos

Mientras uno de los

miembros del grupo
mezcla la solucin de
banana, otro miembro
pondr el papel filtro
dentro de otra taza de
plstico

Doblar el borde del

filtro alrededor de la
taza para que el filtro
no toque el fondo de
la taza.

Tomar un tubo de
ensayo con Alcohol
frio. Para mejores
resultados el alcohol
debe estar tan fra
como sea posible

Filtrar por lo
menos unos 5ml
aproximadamente
para testear

Filtrar la mezcla
virtindola dentro del
filtro y dejar que la
solucin drene por
algunos minutos.

Llenar la pipeta
plstica con la
solucin de
banana y
agregarla al
alcohol

El ADN no es soluble en
alcohol, cuando el
alcohol sea agregado a
la mezcla los
componentes excepto el
ADN permanecen en la
solucin mientras el ADN
precipita en la capa de
alcohol.

Dejar la solucin reposar

por 2 a 3 min sin mover.
Es importante no batir el
tubo. Se puede observar
el ADN blanco el cual
precipita en la capa de
alcohol.

El ADN tiene la
apariencia de
mucus blanco y
fibroso.

Cuando se obtienen
buenos resultados,
habr suficiente ADN
para levantar con una
varilla de vidrio (el ADN
se enrolla a la varilla)

6. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
6.1

CONCLUSIONES

Se extrajo el ADN que se encuentra en las bananas

que es un componente de todas las clulas. Una vez
rotas las clulas, todo el material celular queda libre y,
en presencia de detergente, se separan los
componentes en base a su solubilidad. El ADN se
precipita con alcohol y se separa del resto de los
componentes.
Esta tcnica a pesar de ser sencilla de realizar deba
hacerse con cuidado por lo cual si se logr llegar al fin
deseado que fue la obtencin e identificacin del ADN
vegetal procedente de la banana.
Esta solucin se prepar con la exactitud debida ya
que gracias a esto, por ser la parte ms importante
para la extraccin del ADN de la banana, se puede
realizar con xito la obtencin de la misma.
Al termino del laboratorio y despus de la preparacin
de la solucin en la licuadora y los consiguientes pasos

adems de la agitacin cuidadosa despus del tiempo

fijado de espera se empez a observar la aparicin de
un precipitado el cual eran las hebras de ADN
procedente de la banana.
6.2

RECOMENDACIONES

Realizar la filtracin las veces indicadas para que el

resultado final sea mejor.
Agitar de manera cuidadosa para evitar la formacin
de espuma producida por el shampoo.
Utilizar la cucharita de t para que las medidas sean lo
ms exactas posibles.
No licuar ms tiempo del debido para no alterar el
resultado final.

7. BIBLIOGRAFIA
LAB 9 ADN BANANA
http://es.scribd.com/doc/55189641/LAB-8-ADN-levadura
s.f
EXTRACCION CASERA DE ADN
http://platea.pntic.mec.es/jpascual/vida/biomoleculas/Extr
accionADN.pdf
s.f
BIOLOGIA SLASH 1718
http://wwwbioflash.com/ensayos/Biologia/25052333.html
Abril. 2003
CUESTIONARIO PRACTICO
http://es.scribd.com/doc/85030414/cuestionario-practica
s.f
ANABIOLOGICO
http://anabiologica2.blogspot.com/2012/12/tropismoobjetivos-comprobar.html
13-Abril-2014
EXTRACCION DE ADN VEGETAL
http://software.fundacitemerida.gob.ve/casaciencia/index.php?
option=com_content&view=article&id=192&ltemid=1
s.f
8. ANEXOS
8.1

CUESTIONARIO

Preguntas para el anlisis de la experiencia.

Por qu se puede suponer que la banana contiene

ADN? Dnde se encuentra ese ADN?
Se puede suponer que la banana contiene ADN ya que
todos los seres vivos lo poseen. Y estas se encuentren en
todas las clulas de la banana, tanto del fruto comestible
como en su cascara y tambin en sus semillas. Hablando
especficamente se encuentran el ADN en el ncleo de las
clulas mayoritariamente, por ello al saber que la banana
est compuesto de clulas, es indiscutible pensar que el
banano contiene ADN.
Qu otro tipo de sustancias es posible encontrar
entre los componentes de la banana?
Se podra encontrar carbohidratos y fibras, tambin
contiene mucho potasio, magnesio y cido fosfrico.
Cul es la funcin del detergente en la
experiencia?
El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las
protenas de la membrana celular, rompiendo las uniones
que mantienen la integridad de la misma. De esta forma
se libera el contenido celular, luego el detergente forma
complejos con los lpidos y las protenas, permitiendo que
los mismos sean separados del ADN por filtracin. Es
decir, recogen las protenas y a las grasas adems hacen
separar el ADN.
Cul es la funcin de la sal en la experiencia?
El agua con una pizca de sal es una mezcla isotnica. Es
para que lo que se va a sacar de la semilla sufra lo
menos posible. En la licuadora se rompe la cubierta de las
semillas, la sal permite que el ADN precipite en una
solucin fra de alcohol y que las cadenas de ADN no se
corten, es decir; la funcin fue aumentar la solubilidad del
ADN en la fase acuosa.
Cul es la funcin del alcohol en la experiencia?
Al aadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene
ms afinidad con el alcohol que con el agua. La funcin
del alcohol es cambiar la polaridad de la solucin acuosa
volvindose insoluble el ADN.
Al finalizar la experiencia se obtienen mucus blanco
y fibroso que sera el ADN. Es posible que la
molcula de ADN se visualice a simple vista? Por
qu?
No se puede visualizar una molcula de ADN, puesto que
debido a su tamao microscpico lo que se aprecia es un
muculo de ADN.
A partir de la pregunta anterior Qu creen que
contiene el ADN obtenido en la experiencia?

Es un cumulo de muchsimas molculas de ADN juntas,

posiblemente millones al grado de poderse visualizar
dado el tamao de este.
Preguntas para reflexionar

8.2

Se podra utilizar otros alimentos para extraer el

ADN? En tal caso Cules podran ser esos
alimentos?
Si, podran ser cualquiera que provenga de un ser vivo ya
sea animal o vegetal.
Se podra decir, entonces, que comemos genes?
Si, comemos los genes de los organismos que forman
parte de la alimentacin.
Qu ocurre con el material gentico que se
consume?
El material gentico consumidos est relacionado con la
nutricin, la degradacin de los componentes de los
alimentos y el aprovechamiento de las unidades
constitutivas (nucletidos en este caso) para fabricar los
componentes del propio cuerpo.
IMGENES

Foto 1: Colocar 250 ml de agua

destilada con una banana en la
licuadora y proceder a licuar por
15- 20 seg.

Foto 2: proceder a vaciarlo

en un vaso de precipitacin
para
trabajar
con
la
mezcla.

Foto 3: Se puede observar el Foto 4: El ADN tiene la

ADN blanco el cual precipita en apariencia de un mucus
la capa de alcohol.
blanco y fibroso.