INFORME #1

Extracción de ADN de tejido vegetal (cebolla)

INTEGRANTES
• Johanny Ruíz 2-748-423
• Isaac Rojas 8-976-267

PROFESORA
Edilma Montalvo

CÓDIGO DE HORARIO
4117 (L1)

2021

“Separar al hombre de la naturaleza como si no tuvieran

nada que ver es un grave error. La naturaleza está en
nuestro ADN”.
Nadine Gordimer
 Extracción de ADN
INTRODUCCIÓN
La extracción del ADN, ya sea en procariotas como en eucariotas, es el primer paso para el
estudio de la estructura y función del mismo. Está requiere una serie de etapas básicas. En
primer lugar, tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder
acceder al núcleo de la célula. A continuación, debe romperse también la membrana nuclear
para dejar libre el ADN. Por último, hay que proteger el ADN de enzimas que puedan
degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
El presente informe contempla una serie de pasos que describiremos detalladamente en el
proceso de extracción.

OBJETIVO GENERAL

• Extraer ADN a partir de células vegetales

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Observar la estructura fibrilar del ADN.

• Aplicar una técnica sencilla para obtener ADN de células vegetales.
• Demostrar que puede extraerse ADN de un tejido vegetal con instrumental casero.

MATERIALES

• Cebolla fresca
• Jabón líquido lavavajillas
• Sal
• Agua destilada
• Jugo de piña
• Vaso de vidrio grande transparente
previamente enfriado en la nevera
• Vaso de vidrio pequeño
• Cuchillo
• Batidora
• Palito de chorizo/paleta
• Colador
• Papel filtro de café
• Alcohol 95%
 PROCEDIMIENTO
PASO 1: Cortamos la cebolla en cubos de aproximadamente 1 cm.
PASO 2: Echamos 3 cucharadas de jabón líquido lavavajillas y una de sal, en un vaso de
vidrio pequeño.
PASO 3: Añadimos agua destilada hasta la mitad del vaso de vidrio.
PASO 4: Mezclamos esta solución con los trozos de cebolla.
PASO 5: Licuamos el conjunto, con la batidora, a velocidad máxima durante 30 segundos.
PASO 6: Filtramos el líquido obtenido con un papel filtro de café hasta la mitad del vaso de
vidrio transparente previamente enfriado en la nevera.
PASO 7: Agregamos 3 cucharadas de jugo de piña y mezclamos bien.
PASO 8: Añadimos un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado,
cuidadosamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que formara una capa
sobre el filtrado.
PASO 9: Dejamos reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se formara una zona turbia entre
las dos capas.

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RESULTADOS

Observamos marañas de fibras blancas de ADN que se

formaron en la parte superior de nuestra solución.

ANÁLISIS DE RESULTADOS
Pudimos obtener óptimos resultados debido a las funciones vitales que tenían los materiales
(lavavajillas, sal, jugo de piña y alcohol) en el proceso de extracción.
• La solución de lavavajillas y la sal ayudada por la acción de la licuadora fueron
capaces de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.
• El jugo de piña contiene una enzima, la papaína, que contribuyó a eliminar las
proteínas que pudieron contaminar el ADN.
• El alcohol se utilizó para precipitar el ADN que es soluble en agua, pero, cuando se
encuentra en alcohol se desenrolla y finalmente precipitó en la interfase entre el
alcohol y el agua.

CUESTIONARIO (libro)
1. ¿Qué función tienen los siguientes reactivos en la extracción del ADN en las
células eucariotas?
DETERGENTE: Rompe la membranas celular y nuclear, dejando al ADN libre.
ABLANDADOR: Contiene proteasas que ayudan en la degradación de otras
proteínas.
ALCOHOL ETÍLICO: Precipita el ADN.

2. Explique ¿cómo se puede determinar la concentración de ADN?

Se puede determinar la concentración del ADN mediante espectrofotometría
basándose en la capacidad de absorbancia de un compuesto presente en una solución
a una longitud de onda determinada.

3. ¿Qué información se puede obtener al hacer la electroforesis de ADN? Explique

La información que se obtiene mediante la electroforesis es que podemos separar
fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño, visualizarlos mediante una
 sencilla tinción, y de esta forma determinar el contenido de ácidos nucleicos de una
muestra, teniendo una estimación de su concentración y grado de entereza.

CUESTIONARIO (PROPORCIONADO POR LA PROFESORA)

1. ¿Qué es un cromosoma?, explique su organización y por qué está asociado a
proteínas.
DEFINICIÓN: Orgánulo en forma de filamento que se halla en el interior del núcleo
de una célula eucariota y que contiene el material genético; el número de cromosomas
es constante para las células de una misma especie.

Los cromosomas se encuentran en el núcleo celular separados del resto de la célula

por la membrana nuclear. Un cromosoma tiene tres partes fundamentales:
centrómero, telómero y los brazos.

Los cromosomas facilitan la compactación del ADN en el interior del núcleo.

Además, las proteínas asociadas que facilitan la protección frente a agentes químicos
y las estructuras como los telómeros contribuyen a preservar el ADN.

2. ¿Cómo el detergente produce la lisis de las células animal y vegetal?

Los detergentes rompen la barrera lipídica solubilizando las proteínas e
interrumpiendo la interacción lípido-lípido, lípido-proteína y proteína-proteína. Los
detergentes, al igual que los lípidos, se asocian entre ellos y se unen a superficies
hidrofóbicas.

3. ¿Cuál es la función del NaCl y la solución lisis en la extracción del ADN?

• NaCl (Cloruro de sodio): Las sales aumentan el poder iónico de la solución
y ocasionan la precipitación del ADN.

• SOLUCIÓN LISIS: Rompe las membranas para liberar los ácidos nucleicos
para su solubilización en solventes adecuados.

4. ¿Cuál es la función del fenol-cloroformo, en la extracción del ADN?

FENOL-CLOROFORMO: Tienen la función de llevar a 2 fases: una fase acuosa
superior que contiene los ácidos nucleicos y una fase orgánica que contiene las
proteínas disueltas en el fenol y los lípidos disueltos en el cloroformo.

5. ¿Por qué se puede utilizar un tinte básico para teñir las fibras de ADN?
Porque el ADN posee un grupo fosfato por esto se tiñe con colorantes básicos y otros
colorantes básicos como la difenilamina y el Bromuro de Etidio.

6. ¿Qué representa la muestra teñida observada en la placa?

La muestra teñida en la placa representa el ADN vegetal que se pudo extraer en el
experimento.
 7. ¿Qué acción realiza el detergente sobre la membrana celular de la cebolla?
Las plantas, como las cebollas, tienen paredes celulares que protegen a los orgánulos
el detergente rompe las paredes celulares, de manera que los orgánulos quedan
expuestos.

8. ¿Cuál es la importancia de realizar la lisis a una temperatura de 55-60°C?

La importancia de la lisis a esta temperatura es que ésta ablanda los fosfolípidos en
la membrana celular y desnaturaliza las Dnasas que podrían segmentar el DNA en
fragmentos muy pequeños para ser extraídos.

9. ¿Qué función tienen las enzimas Bromelina y Papaína dentro de la extracción de

ADN?
• BROMELINA: Es una enzima que rompe moléculas. Se trata de una enzima
proteolítica que rompe las proteínas, ayudando así a limpiar el ADN.

• PAPAÍNA: Contiene proteasas que son proteínas especializadas en la

degradación de otras proteínas.

10. ¿Cómo actúa el alcohol en la precipitación?

El ADN no se disuelve en alcohol y por lo tanto se precipita y separa del ADN de
otras sustancias macromoleculares y contenidos celulares.

11. ¿Cuál es la función del TBE para conservar el ADN?

Para extraer el ADN de la solución, este se hace insoluble mediante la adición de
etanol o isopropanol (alcohol isopropílico). Al hacer esto, el ADN se hace visible en
la solución como una sustancia blanca. A pesar de que cuando el ADN es insoluble
se lo puede aislar de los componentes celulares restantes, no es "utilizable". Después
de aislarlo, se elimina el alcohol, y el ADN debe ser devuelto a una solución buffer
biológica, tal como la solución.

CONCLUSIÓN
Hemos concluido el experimento con éxito, ya que pudimos observar las marañas de ADN a
simple vista. Las paredes celulares se han roto, las membranas nucleares también, y, por
tanto, el ADN ha salido del interior de las células y se ha entrelazado sin dañarse gracias a la
papaína, que contenía el jugo de piña.
También podemos concluir que pudimos llevar a cabo los objetivos que plateamos al
comienzo de este informe, debido a que observamos la estructura fibrilar del ADN extraído
del tejido vegetal (cebolla) y aplicamos una técnica sencilla en la que pudimos utilizar
materiales encontrados en nuestra casa.
BIBLIOGRAFÍA
Fernandes, A. Z. (2021, 27 abril). Extracción de ADN: experimento casero (con explicación).
Toda Materia. Recuperado 20211–05-20, de https://www.todamateria.com/extraccion-adn-
experimento/
Marcos-Merino. (2018, 14 marzo). Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo de
una estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos. Scielo. org. mx.
Recuperado 20 de mayo de 2022, de
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-893X2019000100058