LABORATORIO

VALORACIÓN DE BILIRRUBINAS EN SUERO

4E - G1
Acevedo Suarez Luisa
Amaya Suarez Tatiana
Arredondo Figueroa Yisell
Bustamante Valencia Laura
Brito Ortiz Lilian
García Castaño Jacobo
ÍNDICE

●
INTRODUCCIÓN
 FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La bilirrubina directa presente en la muestra reacciona con el ácido
sulfanílico diazoado, originando un complejo coloreado que puede
BILIRRUBINA DIRECTA determinarse espectrofotométricamente. La cetrimida solubiliza la
Ácido Sulfanílico + Bilirrubina 2 Azodipirroles
Conjugada bilirrubina indirecta permitiendo su reacción junto con la fracción
BILIRRUBINA TOTAL
directa. Los términos “directa” y “total” se refieren a las
Ácido Sulfanílico +R-OH + Bilirrubina 2 Azodipirroles características de reacción en presencia o ausencia de solubilizantes
(aceleradores). La bilirrubina “directa” e “ indirecta” equivale sólo de
No Conjugada

BILIRRUBINA INDIRECTA forma aproximada a las fracciones conjugada y no conjugada.

BI: Bilirrubina Total-Bilirrubina Directa

(1)
 MATERIALES
-Algodón
-Auxiliar de pipeteo
-Gradilla
-Guantes
-Palillo
-Pipeta graduada
-Torniquete
-Tubos de ensayo
(1)
-Jeringa x 5ml.
 EQUIPOS NECESARIOS

-Centrífuga.
-Analizador,
espectrofotómetro o
fotómetro para
lecturas a 500 ± 20nm.

(1)
 REACTIVOS
BILIRRUBINA (TOTAL): AT. Reactivo. Ácido
sulfanílico 29 mmol/L, ácido clorhídrico
0,2 mol/L, cetrimida 50 mmol/L.
BT. Reactivo. Nitrito sódico 11,6 mmol/L.
BILIRRUBINA (DIRECTA): AD. Reactivo.
Ácido sulfanílico 35 mmol/L, ácido
clorhídrico 0,24 mol/L.
BD. Reactivo. Nitrito sódico 3,5 mmol/L.
CONSERVACIÓN: Conservar a 15-30ºC. Los
Reactivos son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta, siempre que
se conserven bien cerrados y se evite la
contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro:
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez,
absorbancia del blanco superior a 0,05 a 540
nm (cubeta de 1 cm)
(1)
 TOMA DE MUESTRAS

Suero recogido mediante procedimientos estándar.

La bilirrubina en suero es estable 2 días a 2-8ºC si se protege
de la luz

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS

1. Desinfectarse las manos y colocarse guantes

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS

2. Pedirle al paciente que extienda el brazo en la

superficie adecuada

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS
3. Se coloca una banda elástica 4. Pedirle al paciente que
alrededor de la parte superior del tenga el puño cerrado
brazo con el fin de aplicar presión
en la zona. Esto hace que la vena se
llene de sangre.

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS
5. Preparación del sitio de punción.
(5)
6. Insertar la aguja en un ángulo de
25 grados en la piel y observar como
el reflujo de sangre llena la cámara
de la aguja, esto indica que se está
dentro de la vena.
 TOMA DE MUESTRA-PASOS
7. Aspiramos manualmente con la 8. Se suelta la banda elástica, se le pide
jeringa hasta sacar la cantidad al paciente que abra la mano, y se saca
deseada. la aguja.

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS
9. Se coloca una curita o gasa 10. Se recoge la sangre en un frasco
presionando el punto de punción. hermético o en un tubo adherido a la
aguja.

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS
11. Se desecha la aguja en el 12. Se rotula la muestra de
guardián sangre.

(5)
 TOMA DE MUESTRA-PASOS

13. Se coloca el tubo de ensayo en la gradilla.

(5)
 VIDEO DE REFERENCIA

https://www.youtube.com/watch?v=d7ajC8GIg8g&ab_channel=Secci%C3%B3n2
 PROCEDIMIENTO PARA USO DE LA
CENTRIFUGADORA
1. Coloca la centrifugadora sobre una superficie firme y
nivelada.
2. Elige el rotor adecuado para usar a la velocidad que necesitas.
3. Carga los tubos opuestos entre sí en la centrifugadora.
4. Ingresa la velocidad de la centrifugadora.
5. Mantente a una distancia segura mientras la centrifugadora
fuga.
6. Apaga la centrifugadora si se tambalea.
7. Abre la tapa solo después de que el rotor se haya detenido
completamente.
8. Retira los tubos cuidadosamente después de que la
centrifugadora haya dejado de girar completamente. (2)
9. Limpia el rotor y la centrifugadora después de cada uso.
 VIDEO DE REFERENCIA
https://youtu.be/T-NByVzL0jU
 EPICRISIS
Nombre: Paola Herrera
Edad:28 años
Sexo:Femenino
Estatura:1,57cm
Peso:60 kg
Antecedentes familiares: Padre fallecido a causa de cirrosis
Antecedentes personales:Bronquitis a los 9 años de edad
Hábitos Fisiológicos alimentación:3 veces al día rica en carbohidratos,
Micción: 4 veces durante el dia, Deposición: 2 veces al dia.
No consume alcohol (3)
Fuma de 2 a tres tabacos por día
 EPICRISIS
Paciente refiere que tras no haber desayunado hoy en la mañana, que
hace aproximadamente 5 horas tras haber participado en competencia de
ciclismo, y recibir una llamada de su jefe con quien tuvo una discusión,
observa la presencia de ictericia a nivel de piel y esclerótica además de
astenia. Por lo que acude inmediatamente al servicio de salud.

(3)
 REVISIÓN DE SISTEMAS
• SISTEMA CARDIORRESPIRATORIO.Aparentemente normal
• SISTEMA DIGESTIVO.Aparentemente normal
• SISTEMA ENDOCRINO y METABÓLICO.Lo referido en la enfermedad
actual
• SISTEMA NEUROLÓGICO.Aparentemente normal.
• SISTEMA LOCOMOTOR.Aparentemente normal El Resto de Aparatos y
Sistemas aparentemente normales. (3)
EXÁMENES COMPLEMENTARIOS

1,46 mg/dl
0,7mg/dl 0 a 0,2

0,76 mg/dl

(3)
 PROCEDIMIENTO
BILIRRUBINA TOTAL
1. Pipetear en tubos de
ensayo:

2.Agitar bien y dejar durante 2 minutos a temperatura

Ambiente.
3. Leer la absorbancia (A) de los Blancos de Muestra a 540 nm
frente a agua destilada.
(1)
4. Leer la absorbancia (A) de las Muestras a 540 nm frente al
Blanco de Reactivos.
 PROCEDIMIENTO
BILIRRUBINA
1. Pipetear en tubos de DIRECTA
ensayo:

2.Agitar bien y dejar reaccionar durante exactamente 5 minutos a 37°C.

3. Leer la absorbancia (A) de los Blancos de Muestra a 540 nm frente a (1)
agua destilada.
4. Leer la absorbancia (A) de las Muestras a 540 nm frente al Blanco de
Reactivos.
 (1)
VALORES DE REFERENCIA
CALCULOS

(1)
 CALCULOS BILIRRUBINA
TOTAL (1)

Los valores de absorbancia son el resultado que arrojó el

espectrofotómetro y la concentración obtenida en la composición
del patrón.

A. Muestra:0.047. A. blanco muestra:0.003

A. Patrón:0.3

Concentración del patrón:10mg/dl

CALCULOS BILIRRUBINA
TOTAL (1)
 CALCULOS BILIRRUBINA
DIRECTA (1)

Los valores de absorbancia son el resultado que arrojó el

espectrofotómetro y la concentración obtenida en la composición
del patrón.

A. Muestra:0.015 A. blanco muestra:0.008

A. Patrón:0.1

Concentración del patrón:10mg/dl

CALCULOS BILIRRUBINA
DIRECTA (1)
 CALCULOS BILIRRUBINA
INDIRECTA (1)

La bilirrubina indirecta es la resta entre la bilirrubina total y la

directa

1.46 mg/dl- 0,7 mg/dl=0,76 mg/dl

ANALISIS, DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO
SINDROME DE
GILBERT
 SINDROME DE GILBERT
El síndrome de Gilbert es una alteración
hereditaria autosómica recesiva asociada a un
elevado nivel de bilirrubina(hiperbilirrubinemia
no conjugada) en sangre y por lo general no
presenta síntomas, aunque una leve ictericia
puede aparecer en condiciones de esfuerzo
excesivo, estrés, insomnio, cirugías, ayuno,
cuando hay infecciones o tras la ingesta de
algunos medicamentos como el paracetamol, ya
que la concentración de bilirrubina en la sangre
aumenta en estas situaciones. El síndrome
causa fatiga y depresión. (4)
 DIAGNÓSTICO
El médico puede sospechar síndrome de Gilbert si padeces ictericia
o si tu nivel de bilirrubina en sangre es elevado. Entre otros signos
y síntomas que indican síndrome de Gilbert, además de varias
otras enfermedades hepáticas, se incluyen la orina de color oscuro
y el dolor abdominal. Para descartar enfermedades hepáticas más
comunes, es posible que tu médico te pida un hemograma
completo y análisis de la función hepática.

(4)
 TRATAMIENTO
No hay tratamiento necesario para la mayoría de pacientes. No
hay problemas de salud asociados a esta condición y la mayoría de
los pacientes no necesitan así ninguna terapia.Los pacientes con el
síndrome de Gilbert tienen una esperanza de vida normal y no
tienen un riesgo aumentado de otras dolencias del hígado.

(4)
 TRATAMIENTO PARA LA ICTERICIA
Las bililuces o luces azules especiales se refieren a un tipo de terapia
con luz (fototerapia) que se utiliza para tratar la ictericia del recién
nacido. La ictericia es una coloración amarillenta de la piel y de los ojos.
Es causada por la presencia de demasiada cantidad de una sustancia
amarilla llamada bilirrubina. La bilirrubina
se produce cuando el cuerpo reemplaza los glóbulos rojos viejos por
nuevos.

(4)
 TRATAMIENTO PARA LA ICTERICIA
Exanguinotransfusión
Es un procedimiento potencialmente salvavidas que se lleva a cabo
para contrarrestar los efectos de la ictericia grave o cambios en la
sangre, debido a enfermedades como la anemia drepanocítica.El
procedimiento consiste en extraer lentamente la sangre de la persona
y reemplazarla con sangre o plasma fresco de un donante.

(4)
 VIDEO DE REFERENCIA

https://youtu.be/GKLyqCgIr2o
REFERENCIAS
1. Bilirrubina BB. BILIRUBIN (TOTAL AND DIRECT) [Internet]. Com.co. [citado el 8 de abril
de 2021]. Disponible en:
https://www.biosystems.com.co/wp-content/uploads/2020/11/11515c-bilirrubina-total-
y-directa.pdf

2. Cómo usar una centrifugadora: 14 Pasos (con imágenes) [Internet]. Es.wikihow.com. 2021 [cited 8 April 2021]. Available
from:
https://es.wikihow.com/usar-una-centrifugadora#:~:text=Usar%20la%20centrifugadora,-%7B%22smallUrl%22%3A&text=C
oloca%20la%20centrifugadora%20sobre%20una,el%20peso%20de%20la%20centrifugadora.
3. EG. Caso clinico sindrome gilbert [Internet]. Es.slideshare.net. 2015 [cited 8 April 2021].
Available from:
https://es.slideshare.net/alvaroenriquez31/caso-clinico-sindrome-gilbert
4. Síndrome de Gilbert - Síntomas y causas - Mayo Clinic. Mayoclinic.org. (2021). Retrieved
8 abril 2021,from
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/gilberts-syndrome/symptoms-ca
uses/syc-20372811.
5. Oliva L. Toma de muestra sanguínea [Internet]. Slideshare.net. 2012 [citado el 28 de
febrero de 2021]. Disponible en:
https://es.slideshare.net/LuisOliva5/toma-de-muestra-sangunea