Primera Sesión de Prácticas 

Análisis Bioquímico 

ALUMNA

Sánchez Sánchez Rosa M

 
DOCENTE

Chamorro Virginia

 
 
 
 
CEIP Atlántida

Laboratorio Clínico y Biomédico

2º Curso 2019/2020

Asignatura Técnicas Análisis Bioquímico 

 
 ÍNDICE 

INTRODUCCIÓN 2 

MATERIAL 2 

PRÁCTICA 3 

RESULTADOS 4 

SEGUNDA PRÁCTICA 7 

MATERIALES 7 

PROCEDIMIENTO 7 

ACTIVIDADES 11 

BIBLIOGRAFÍA 15 

1   
INTRODUCCIÓN 

Durante  las  prácticas  nos explicaron el funcionamiento del refractómetro clínico, 

en  el  laboratorio  de  análisis  clínicos,  el  refractómetro  se  emplea  en  la  refractometría de 
líquidos. 

La  refractometría  de  líquidos  es  una  técnica  de  análisis  cuantitativo  basada  en  el 
fenómeno  de  refracción  de  la  luz,  para  poder  realizar  la  técnica  se usó el refractómetro, 
este  consta  de  dos  prismas  entre los cuales se coloca la muestra, y sobre los que hacemos 
incidir la radiación, el haz de luz, al atravesar la muestra, se refracta y se recoge como un 
único  rayo  de  luz  blanca,  cuyo  ángulo  puede  ser  medido  por  un  sistema  óptico  a  través 
de  un  ocular  podemos  ver  un  círculo  en  el  que  aparecen  diferenciadas  una  zona clara y 
otra oscura.  

- En caso de muestras de​ baja concentración​, la diferencia entre los índices 

de refracción de la muestra y el prisma es elevada, y el ángulo de 
refracción es amplio. 
- Cuando las muestras presentan una ​concentración elevada​, la diferencia 
entre los índices es menor y por tanto, el ángulo de refracción es menor. 

MATERIAL 

- Refractómetro clínico  
- Pipeta pasteur 
- Agua destilada 
- Papel de filtro 
- Muestras de zumo y orina. 

2   
PRÁCTICA 

El objetivo de la práctica consistió en medir la densidad con el refractómetro de 

dos soluciones: 

- Orina 
- Zumo 

Pasos previos: 

1. Para comenzar la práctica lo primero que se ha de hacer es calibrar el 

refractómetro clínico, para ello se limpia tanto la placa como el prisma con 
alcohol y un paño suave que no desprenda ni pelusas ni fibras. 
2. Dirigimos la parte del prisma hacia la luz brillante y ajustamos el anillo de 
dioptrías hasta que se pueda ver claramente la escala. 
3. Colocamos unas gotas de agua destilada ( 1 o 2 gotas), después cerramos la tapa 
que cubre la placa. 
4. Giramos el tornillo de ajuste hasta que haga coincidir la línea divisoria 
azul-blanca con el 0  
5. Abrimos la placa y secamos. 
6. Se coloca una o dos gotas del líquido que queremos medir. 
7. El refractómetro tiene tres escalas: 

1. Proteínas en suero 
2. Peso específico de la orina 
3. Indice de refraccion 

3   
RESULTADOS 

Se añadió una gota de la solución de orina, los resultados fueron los siguientes : 

ORINA 

Imagen del resultado a través del refractómetro, donde nos dió​ 4 brix​, se hizo la 
conversión según tabla que adjunto en la imagen inferior, dando un total de 1013.8 g/l 
con lo cual se encuentra dentro de los valores normales (1005-1030 mg/ml). La tabla 
viene en gramos/litro con lo cual tenemos que hacer la conversión.  

  

4   
ZUMO 

Imagen  del  resultado  a  través  del  refractómetro,  donde  nos  dió  como  resultado  
11  brix​,  igualmente  los  valores  son  normales,  para  determinar  que  estos  valores  son 
normales tenemos en cuenta que: 

- De 0 a 20 brix: jugos de frutas no concentrados, vino, almíbar ligero, remolacha 

roja 
- De 20 a 55 brix salsas. 
- De 55 a 90 brix: jarabes y salsas densas, pulpas concentradas de azucar, zumos de 
frutas concentradas. 

5   
ORINA CONCENTRADA 

Resultados ​5 brix​. Sigue según tabla dentro de los valores normales. 

A saber: 

Los grados​ Brix ​son una unidad de cantidad que sirven para determinar el cociente total 
de materia seca (generalmente azúcares) disuelta en un líquido. Una solución de 25 °Bx 
contiene 25 g. de sólido disuelto por 100 g. de disolución total. 

SEGUNDA PRÁCTICA 

Determinación de colesterol en sangre mediante espectrofotometría, método 

GPO-POD, este consistió en calcular los valores de colesterol, para hacer una curva 
patrón.  

Pasos previos:  

- 1 ml de reactivo ( R) + 10 microlitros de patrón  

6   
 - Preparamos el blanco y el patrón 
- A partir de tubo EDTA se centrifuga y posterior medimos el plasma. 

MATERIALES 

- Muestras sanguíneas en tubos con EDTA 

- Centrífuga 
- Gradillas 
- Micropipetas y puntas  
- Tubos eppendorf 1,5 ml 
- Cubetas para el espectrofotómetro 
- Espectrofotómetro 
- Guantes 

PROCEDIMIENTO 

Para poder realizar la técnica se usará el plasma previamente preparado para poder 
analizarlo. 

1. prepararemos 4 tubos eppendorf que serán: 

a. Blanco 
b. Patrón 
c. Muestra 1 
d. Muestra 2 

Las cantidades serán las siguientes: 

7   
 

2. Mezclamos e incubamos a 37ºC durante 5 minutos o 10 minutos tº ambiente. 

3. Ajustaremos el espectrofotómetro a cero frente al blanco de reactivo, para ello 
introducimos el blanco en el espectrofotómetro y leemos que la longitud de onda 
es de 505 nm 

4. Ahora se introduce la curva patrón y obtenemos 558 nm. 

8   
 5. Se introducen las muestras, primero nuestra muestra 1, obtenemos como 
resultado 1051 nm.  

6. Introducimos la muestra 2, obtenemos como resultado 1048 nm. 

9   
 7. Para poder realizar los cálculos aplicamos la fórmula: 

Muestra 1: 1051-0/ 558-0 x 200 = 376,7 mg/dl 

Muestra 2: 1048-0/ 558-0 x 200 = 375,6 mg/dl 

En la imagen, tenemos los resultados que cada grupo obtuvo durante las prácticas, 
si hacemos la media de los resultado obtenidos, tenemos que: 

Media Muestra 1  Media Muestra 2 

760,03 absorbancia  776 absorbancia 

10   
ACTIVIDADES 

1. Teniendo en cuenta los valores normales de colesterol total en sangre, indica el 
estado de los pacientes tras analizar sus muestras y calcular los valores de 
colesterol que presentan en sangre. Una vez calculados los valores de colesterol de 
cada muestra, se hace una media que aquellas que pertenezcan al mismo 
paciente. 

VALORES DE REFERENCIA 

● Menos de 200 mg/dL: Normal 

● 200-239 mg/dL: Límite alto 
● Mayor de 240 mg/dL: Límite muy alto 

Resultado de la muestra número 1= 376,7 mg/dl, esto significa que el paciente se 
encuentra con un valor muy alto. 

Resultado de la muestra número 2= 375,6 mg/dl, esto significa que el paciente se 
encuentra con un valor muy alto. 

Si hacemos la media de los dos resultados obtenidos nos da 376,15 mg/dl de media. 

2. ¿Qué ocurrirá si alguno de los dos pacientes presentan niveles de colesterol en 
sangre por encima de 200 mg/dl? 

Los  pacientes  con  niveles  de  colesterol  elevados  tienen  el  riesgo  de  padecer 
aterosclerosis  o  el desarrollo de depósitos de placa en los vasos sanguíneos, si con el paso 
del tiempo no se controla puede causar complicaciones graves como: 

11   
 

- Enfermedad de la arteria carótida 

- Enfermedad coronaria (angina de pecho, ataque cardiaco..) 
- Enfermedad arterial periférica 
- Derrame cerebral 

Las  lipoproteínas  HDL  protegen  el  corazón  de  la  enfermedad  aterosclerótica;  por 
ello,  el  colesterol  HDL  algunas  veces  recibe  el  nombre  de  colesterol  bueno,  estas 
lipoproteínas  son  las  encargadas  del  transporte  del  75%  del colesterol de la sangre hacia 
los  tejidos  periféricos,  si  la  cantidad  de  lipoproteína  LDL  es  demasiado  alta,  el  hígado es 
incapaz  de  eliminarla  por  completo,  es  por  eso  que  se  va  depositando  en  los  vasos 
sanguíneos  contribuyendo  al  desarrollo  de  aterosclerosis,  es  por  eso  que  el  colesterol 
LDL se le denomina colesterol malo. 

Formación de placas de ateroma, debido al exceso de colesterol 

12   
 3. En caso de que alguno de los pacientes presentasen niveles de colesterol en sangre 
por encima de 200 mg/dl ¿que le recomendarias? ¿y con niveles superiores a 250 
mg/dl? ¿Cual es el término médico para los niveles altos de colesterol? 

La  recomendación  sería  modificar  el  estilo  de  vida,  como  la  dieta,  el  ejercicio 
físico, y el abandono de hábitos tóxicos como el tabaco o el consumo de alcohol. 

En  cuanto  a  la  dieta  ​elegir  grasas  más  saludables,  limitando  la  ingesta  de  grasas 
saturadas,  limitar  los  alimentos  con  colesterol  (  hígado,  vísceras,  yemas  de  huevo, 
camarones,  productos  lácteos).  Tomar  alimentos  ricos  en  fibra, estos evitan que el tracto 
digestivo absorba el colesterol.  

Es importante también limitar la sal y limitar el consumo de alcohol. 

Ejemplo de alimentos saludables 

13   
 

En definitiva, la hipercolesterolemia se puede prevenir siguiendo las siguientes 

recomendaciones: 

14   
 - Con una alimentación equilibrada y sin grasas saturadas. La dieta mediterránea 
tiene un gran aporte de grasas proviene fundamentalmente de los ácidos grasos 
monoinsaturados y poliinsaturados presentes en el pescado y los aceites de oliva y 
de semillas. También es importante el consumo de vegetales, legumbres, cereales, 
hortalizas y frutas. 

- Haciendo un programa de ejercicio aeróbico (caminar, carrera suave, ciclismo, 

natación…), a intensidad moderada (65-70 por ciento de frecuencia cardiaca 
máxima) y desarrollado de manera regular (tres a cinco sesiones por semana), 
aumenta el HDL (colesterol bueno) y reduce el LDL (colesterol malo) y los niveles 
de triglicéridos. 

En pacientes con niveles por encima de 250 mg/dl, son valores excesivamente 
altos con lo que el médico optará por un tratamiento con fármacos, como por ejemplo: 

- Estatinas 
- Resinas de intercambio 
- Fitosteroles 
- Fibratos 
- Exetimibe 

Las estatinas son medicamentos que pueden reducir el colesterol. Funcionan como 
bloqueadores de una sustancia que el cuerpo necesita para producir colesterol 

El término médico es trastorno lipídico, hiperlipidemia o hipercolesterolemia, las causas 

15   
cuando los niveles son muy superiores pueden ser: 

- Hipercolesterolemia familiar, es decir de tipo genético 

- Hipercolesterolemia poligénica grave, Se caracteriza por un nivel elevado de 

colesterol-LDL causado por factores genéticos y ambientales 

- Hiperlipemia familiar combinada, niveles muy elevados de colesterol o de 

triglicéridos 

16   
BIBLIOGRAFÍA 

- El colesterol y el riesgo cardiovascular, 

https://fundaciondelcorazon.com/prevencion/riesgo-cardiovascular/colesterol.htm
l 
- Efectos secundarios de las estatinas, 
https://www.botanical-online.com/medicina-natural/estatinas-efectos-secundarios 
- Medicamentos para el colesterol, 
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/high-blood-cholesterol/in-de
pth/statins/art-20045772 
- ¿Cómo aparecen las placas de ateroma en las coronarias y cómo se afecta el flujo?, 
https://ecocardio.com/documentos/biblioteca-preguntas-basicas/preguntas-al-cardi
ologo/1075-como-aparecen-placas-ateroma-en-coronarias-y-como-afecta-flujo.html 
- Temario Análisis Bioquímico, editorial Altamar. 

17   
 Segunda Sesión de prácticas  
Análisis Bioquímico 

 
ALUMNA

Sánchez Sánchez Rosa M

 
DOCENTE

Chamorro Virginia

 
 

 
CEIP Atlántida

Laboratorio Clínico y Biomédico

2º Curso 2019/2020

Asignatura Técnicas Análisis Bioquímico 

18   
 ÍNDICE 
 
 
ÍNDICE 1 

INTRODUCCIÓN 2 

MATERIAL 2 

PROCEDIMIENTO 4 

Procedimiento 4 

2º PRACTICA : Determinacion cuantitativa de proteinas (metodo Biuret) 8 

PROCEDIMIENTO 9 

ACTIVIDADES 12 

BIBLIOGRAFÍA 13 

 
 

19   
INTRODUCCIÓN 

Se nos explicó que son los triglicéridos y su fórmula 

Consideraciones previas: 

- A mayor cantidad de triglicéridos es mayor cantidad de color rojo 

- Kit de determinación donde tenemos el r1 que es tampon, y el r2 enzimas 
- Se trabajó con un blanco con un patrón y con una muestra 
- La composición fué la del cuadro blanco 1.0, patrón 1.0, etc.  
- Vamos a tener dos blancos: 

- Uno de agua destilada para poner a 0 que lo colocaba Juanjo antes de 
colocar cada muestra  
- Otro el blanco rt 

MATERIAL 

1. Pipetas y micropipetas 
2. Preparamos 3 tubos eppendorf, para blanco, patrón 
y muestra 
3. Muestra 
4. Kit reactivos 

20   
 

Kit de reactivos 

PROCEDIMIENTO 

Consideraciones previas: 

- Longitud de onda 505 nm en función de la muestra la longitud de onda puede 

variar 
- Cubeta de 1 cm de paso de luz 
- Temperatura 37/15-25 
- Nuestro grupo fue el 6.  

21   
Procedimiento 

1. Preparamos las muestras 

2. Preparamos los 3 tubos y siguiendo las cantidades de la tabla pasamos el volumen 

a cada tubo eppendorf y añadimos, en uno de ellos el volumen de la muestra 

22   
 

3. Añadimos el patrón 

4. Observamos el color 

23   
 1. Taramos a 0 con agua destilada el espectrofotómetro 
2. Pipeteamos en una cubeta 
3. Mezclamos  e  incubamos  5  minutos  a  37  grados  para  que  se  produzcan  las 
reacciones o 10 minutos a temperatura ambiente. 
4. Leeremos la absorbancia del patrón y la muestra 

Blanco: 386 nm 

Patrón nos dio como resultado: 1467 nm 

Muestra nos dio como resultado: 652 nm 

Los cálculos son: 

Se encuentra por debajo de los valores normales ya que se encuentra fuera de los valores 
normales ( 49.2 mg /dl ) 

652 - 386 / 1467 - 386 x 200 = 49,2 mg/dl 

24   
ACTIVIDADES 

1. Realiza los cálculos e indica si los resultados están dentro de los valores normales 

Se encuentra por debajo de los valores normales ya que se encuentra fuera de los valores 
normales ( 49.2 mg /dl ) 

652 - 386 / 1467 - 386 x 200 = 49,2 mg/dl 

2. ¿Cual es el término que define un nivel de triglicéridos alto en sangre? 

Hipertrigliceridemia o Hiperlipidemia 

3. ¿ A qué se debe el aumento de estos valores en sangre? ¿Que puede ocurrir si 
estos valores son muy altos? 

las causas son: 

- Edad 
- Aumento de peso 
- Enfermedades hepáticas 
- Enfermedades genéticas 
- Por el uso de algunos medicamentos 

Puede ocurrir que se comienza a crear placas de ateroma,es una lesión que se 
produce por la aparición de un “abultamiento” en la pared interna de una arteria. el 
infarto de miocardio se produce cuando la placa se rompe y la matriz lipídica, que es 
altamente trombogénica, entra en contacto con la sangre y produce la trombosis y la 
oclusión de la luz.  

25   
 

4. ¿Cómo podemos evitar el aumento excesivo de triglicéridos en sangre? 

Siguiendo una vida saludable, acompañada de una dieta y ejercicios moderados. 

5. ¿Cual es la función de los triglicéridos en nuestro organismo? 

Es la de almacén de calorías no utilizadas y proporcionan energía. 

6. ¿Cuales pueden ser las causas de niveles bajos de triglicéridos en sangre? 

Los niveles muy por debajo pueden ser patológicos. 

2º PRACTICA : Determinacion cuantitativa de proteinas (metodo Biuret) 

Como solo había una micropipeta de 25 vamos a tomar 30 microlitros de patrón y otros 
30 de muestra (no se debe hacer) para que todos los grupos puedan trabajar 

Consideraciones previas: 

- Longitud de onda 546 ya que nuestro espectrofotómetro mide a esa longitud 

- Cubeta 1 cm de paso de luz 
- Temperatura 37gº 15/25 

26   
PROCEDIMIENTO 

1. Añadimos primero 1 ml de reactivo en cada tubo eppendorf 

2. Añadimos después 30 microlitros de patrón solo al tubo patrón  

3. Añadimos después 30 microlitros de muestra al tubo eppendorf muestra 

27   
 4. Homogeneizamos quedando así: 

5. Una vez pasan los 10 minutos pasamos a las cubetas de espectrofotometría e 

introducimos en el espectrofotómetro.  

28   
 6. Resultados 

Blanco: 103 nm 

Patrón: 838 nm 

Muestra: 721 nm 

Cálculos: 

721 nm - 103 nm / 838 - 103 x 7 = 5,88 g/dl de proteínas totales. 

29   
 

ACTIVIDADES 

1. Indica si los resultados obtenidos están dentro de los valores normales 

El resultado obtenido se encuentra por debajo de los valores normales. 

2. ¿En qué casos puede ocurrir una hipoproteinemia? 

En patologías hepatohepáticas, en malnutrición, en pacientes con colitis, etc, por el 

contrario, un exceso de inmunoglobulinas podría indicarnos la existencia de algún tipo 
de tumor. 

3. Cuales son los vales de referencia en adultos 

En adultos los valores se encuentran entre 6,6 y 8,3 g/dl 

4. ¿Que función presenta el reactivo de Biuret? 

El reactivo de Biuret son iones de cobre con lo cual quiere decir que cuanto más color 
más cantidad de proteína. 

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BIBLIOGRAFÍA 

- Temario de Análisis Bioquímico, editorial Altamar. 

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