CARRERA(s): Estomatología

Medicina Humana

PRÁCTICA DE LABORATORIO

CURSO: Bioquímica

PROFESOR: Juan Salazar

INFORME PRÁCTICA
PRÁCTICA N.º 4

TÍTULO: DETERMINACIÓN DE UREA

INTEGRANTES:

● Alvarado Bravo, Máximo Armando 100093259

● Luhi Daniel Agüero Palomino 100088117
● Florencio Roldán, Dayan Ximena 100086633
● Villaverde Sotacuro, Ana Lucia 100123014

HORARIO DE PRÁCTICA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 28 de abril del 2023

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 3 de mayo del 2023

LIMA-PERÚ
 PRÁCTICA N°5

DETERMINACIÓN DE UREA
Logro de Determinar la concentración de urea en suero sanguíneo.
aprendizaje:
Interpretar los resultados obtenidos de urea de acuerdo

con valores de referencia.

I. MATERIALES EN LA MESA DE LOS ESTUDIANTES

• 01 gradilla
• 05 tubos de ensayo 13x100mm
• 01 piseta con agua destilada
• 02 pipeta volumétrica o graduada 5 mL
• 02 pipeta volumétrica o graduada 10 mL
• 02 propipetas

II. MATERIALES EN LA MESA CENTRAL DEL PROFESOR

• 01 suero tubo de tapa rosca 2 mL

• Estuche comercial para determinar urea (01 estándar de urea (0.60g/L) frasco 1 mL;
01 ureasa frasco 1 mL; 01 reactivo de trabajo 1 frasco 12 mL; 01 reactivo de
trabajo 2 frasco 12 mL)
• Espectrofotómetro
• 04 micropipetas 10 – 100 µL y/o de 5 – 50 µL
• 06 puntas descartables de micropipetas
• 06 cubetas para espectrofotometría
• Baño maría 37°C
• Vórtex

PROCEDIMIENTO

El personal técnico colocará en las mesas TODO el material requerido.

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 INTRODUCCIÓN

PRÁCTICA N°5
DETERMINACIÓN DE UREA

La urea es un compuesto nitrogenado que se sintetiza en el hígado a partir del ion amonio,
bicarbonato y ATP. La enzima que cataliza esta primera reacción esel carbamoil fosfato
sintetasa I, cuya actividad es regulada por el N – acetil glutamato. La excreción de urea
por la orina depende fundamentalmente de la ingesta proteica. Un incremento de urea en
sangre puede ocurrir a causa de unaprobable disfunción renal.

Competencia

1. Determinar la concentración de urea en suero.

2. Interpretar los valores obtenidos de urea de acuerdo con los valores de referencias.

Fundamento teórico

La determinación de urea en orina se fundamenta en la acción que ejerce la enzima

ureasa sobre la urea, descomponiéndola en anhídrido carbónico y amoniaco. Este
amoniaco reacciona con hipoclorito y fenolen medio alcalino, formando un compuesto
coloreado denominada azul de indofenol, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de urea.

INSTRUCCIONES PARA EL DESARROLLO DE LA EXPERIENCIA

PRÁCTICA

Preparar el siguiente sistema:

B X St

Estándar de urea (µL) - - 20

Suero (µL) - 20 -

Ureasa (gota) 1 1 1

Mezclar mediante agitación e incubar a 37°C por 5 minutos.

B X St

Reactivo 1 (mL) 1 1 1

Reactivo 2 (mL) 1 1 1

Mezclar e incubar 37°C por 5 minutos y leer en el espectrofotómetro a540 nm.

 INSTRUCCIONES PARA EL DESARROLLO DEL INFORME DE LA
EXPERIENCIA PRÁCTICA SOBRE DETERMINACIÓN DE UREA
Apellidos Nombres N° Mesa Fecha

INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO (S)

.La urea es uno de los constituyentes nitrogenados no proteicos (NNP) más
abundante en el cuerpo. Los demás son la creatinina, el ácido úrico, el amonio y los
aminoácidos.La urea se produce a través de un proceso de degradación proteínica: la proteína
se transforma a partir de aminoácidos en amoníaco (diseminación oxidativa) como
un producto final y de ahí en urea (ciclo de la ornitina) dentro del hígado. Debido a que el
organismo no utiliza urea, es transportada en la sangre hasta que se excreta por vía urinaria.
.Por lo cual ,la determinación de urea en sangre se realiza para valorar el funcionamiento de los
riñones e indagar sobre la presencia o evolución de las enfermedades renales.
Objetivos:
.Observar que la concentración de la urea presente en la muestra es proporcional a la intensidad
del color formado.
.Correlacionar los resultados con los hallazgos clínicos

MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales:
● 3 tubos de ensayo . Espectrofotómetro
● 1 pipeta de 5 ml. .Reactivos de la práctica
● 1 micropipeta de 0.02 ml.
● 2 vasos de precipitado
Métodos:
1.- Marcar 3 tubos de ensaye: B (blanco), M (muestra) y P (patrón) y proceder como sigue.
Mientras que continuamos con el 3 tubo para pasarlo por baño María.

RESULTADOS

Muestra estándar

St = 66 Mg/dL
 ANTES / DESPUÉS

Determinación
Valores normales de úrea = 12 - 54 mg/dL

DISCUSIÓN
El ciclo comienza en el interior de las mitocondrias de los hepatocitos. El primer grupo amino
(proveniente del amoníaco libre) es utilizado junto al bicarbonato (proveniente de la respiración
celular), para producir carbamoil-fosfato. Esta reacción requiere gasto de ATP y es catalizada
por la carbamoil-fosfato-sintetasa 1. Por una reacción catalizada por la ornitina
transcarbamilasa, el carbamoil-fosfato da su grupo carbamoil a la ornitina para generar citrulina
que luego pasa a ser liberada al citoplasma. A continuación, por una reacción catalizada por la
argininosuccinato sintetasa, el segundo grupo amino del aspartato se condensa con la citrulina
formando argininosuccinato.Después, el argininosuccinato se hidroliza por acción del arginino
succinato liasa, produciendo arginina libre y fumarato.Luego, el fumarato ingresa en el ciclo de
Krebs y la arginina libre se hidroliza en el citoplasma por la arginasa, obteniendo urea y
ornitina. Finalmente, la ornitina se transporta a la mitocondria para dar inicio
nuevamente al ciclo de la urea.

CONCLUSIONES

● La determinación de proteínas plasmáticas es un examen de diagnóstico importante que

puede proporcionar información sobre la función hepática, el estado nutricional, el sistema
inmunológico y otros procesos fisiológicos.

● La determinación de proteínas plasmáticas se realiza a través de un análisis de sangre y

es un examen solicitado solicitado en un conjunto amplio de situaciones clínicas, como
parte de un examen de rutina, como evaluación preoperatoria, para seguimiento de
 enfermedades crónicas, y para diagnosticar enfermedades.

● La determinación de proteínas plasmáticas es un examen simple pero importante que

puede proporcionar información valiosa para la evaluación y el tratamiento de diversas
condiciones clínicas.

RECOMENDACIONES

● Es importante seguir las instrucciones del médico o el laboratorio de acuerdo a las necesidades
del examen.

● Tenga en cuenta que los resultados de la prueba de proteínas plasmáticas se interpretan mejor
en el contexto clínico adecuado, es decir, en combinación con la historia clínica del paciente y
otras investigaciones de laboratorio.
● La determinación de proteínas plasmáticas es una herramienta valiosa en la evaluación de la
función hepática, el estado nutricional, el sistema inmunológico y otros procesos fisiológicos.
● Debemos tener cuidado con los datos proporcionados por este examen, ya que, estos nos
ayudan a determinar un resultado.
● Cuidar muy bien la manipulación de los instrumentos usados para el experimento y usar los
equipos de bioseguridad requeridos en todo momento.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Kathleen Morrison Treseler. Laboratorio clínico y pruebas de diagnóstico. EditorialManual
Moderno
.ttp://themedicalbiochemistrypage.org/es/ureacycledisorders-sp.php
.http://lasaludfamiliar.com/contenido/articolos-salud-204.htm

CRITERIOS QUE SE TOMARÁN EN CUENTA PARA LA

EVALUACIÓN DEL INFORME DE PRÁCTICA
ASPECTO / Niveles de desempeño
CRITERIO A
EVALUAR LOGRADO EN PROCESO NO LOGRADO

Introducción y objetivo Elabora una introducción y objetivo Elabora una introducción y objetivo Elabora una introducción
(s) de la práctica (s) de la práctica de manera (s) de la práctica de manera parcial y objetivo (s) de la
correcta práctica de manera
incorrecta

2 puntos 3.5 puntos 0 puntos

Materiales y métodos Desarrolla materiales y métodos de Desarrolla materiales y métodos de Desarrolla materiales y
manera correcta manera parcial métodos de manera
incorrecta

4 puntos 2.5 puntos 0 puntos

Procedimiento Explica el procedimiento Explica el procedimiento Explica el procedimiento

experimental experimental de manera correcta experimental de manera parcial experimental de manera
incorrecta

5 puntos 2.5 puntos 0 puntos

Análisis de resultados Describe los resultados y discusión Describe los resultados y discusión Describe los resultados y
de los hallazgos evidenciando el de los hallazgos evidenciando el discusión de los hallazgos
análisis de manera correcta análisis de manera parcial evidenciando el análisis
de manera incorrecta

6 puntos 2.5 puntos 0 puntos

Conclusiones, Elabora conclusiones, Elabora conclusiones, Elabora conclusiones,

recomendaciones y recomendaciones y referencias de recomendaciones y referencias de recomendaciones y
referencias manera correcta manera parcial referencias de manera
incorrecta

3 puntos 1 puntos 0 puntos

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