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Endocrinología de animales domésticos 51 (2015) 74–77

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Comunicación corta

Regulación conjunta de las concentraciones de glucagón a través de la insulina

plasmática y la glucosa en vacas lecheras.

M. Zarrina,b, O. Wellnitza, RM Bruckmaiera,*

aFisiología Veterinaria, Facultad Vetsuisse, Universidad de Berna, 3001 Berna, Suiza
bDepartamento de Ciencia Animal, Facultad de Agricultura, Universidad Yasouj, 75918-74831, Yasouj, IR Irán

información del artículo abstracto

Historia del artículo: La insulina y el glucagón son hormonas glucorreguladoras que contribuyen a la homeostasis de la glucosa.
Recibido el 29 de julio de 2014 La insulina plasmática se eleva durante la normoglucemia o la hiperglucemia y actúa como supresor de la
Recibido en forma revisada el 13 de noviembre de 2014
secreción de glucagón. Hemos investigado si y cómo la insulina y la glucosa contribuyen a la regulación de la
Aceptado el 14 de noviembre de 2014
secreción de glucagón a través de concentraciones elevadas de insulina a largo plazo (48 h) durante
hipoglucemia o euglucemia simultánea en vacas lecheras en lactancia media. Diecinueve vacas lecheras
Palabras clave:
Holstein fueron asignadas aleatoriamente a 3 grupos de tratamiento: una infusión intravenosa de insulina
Glucosa
(HypoG, n¼5) para disminuir las concentraciones de glucosa en plasma (2,5 mmol/L), una pinza
Insulina
glucagón hiperinsulinémica-euglucémica para estudiar los efectos de la insulina a concentraciones de glucosa
Metabolismo simultáneamente normales (EuG, n¼6) y una infusión de solución salina al 0,9% (NaCl, n¼8). La glucosa
Homeostasis plasmática se midió a intervalos de 5 minutos y las velocidades de infusión de insulina y glucosa se ajustaron
Vaca lechera en consecuencia. El área bajo la curva de las concentraciones horarias de glucosa, insulina y glucagón en el
día 2 de la infusión se evaluó mediante análisis de varianza con los tratamientos como efecto fijo. La infusión
de insulina provocó un aumento del área bajo la curva de insulina plasmática (AUC)/h en HypoG (41,9 - 8,1
mU/L) y EuG (57,8 - 7,8 mU/L) en comparación con NaCl (13,9 - 1,1 mU/L);PAG <0,01). La hiperinsulinemia
inducida provocó una disminución del AUC/h de la glucosa plasmática a 2,3 - 0,1 mmol/L en HypoG (PAG <
0,01), mientras que el AUC/h de la glucosa plasmática se mantuvo sin cambios en EuG (3,8 - 0,2 mmol/L) y
NaCl (4,1 - 0,1 mmol/L). El AUC/h de glucagón en plasma fue menor en EuG (84,0 - 6,3 pg/ml;PAG <0,05) y
elevado en HypoG (129,0 - 7,0 pg/mL;PAG <0,01) en comparación con NaCl (106,1 - 5,4 pg/ml). Los resultados
muestran que la infusión intravenosa de insulina induce concentraciones elevadas de glucagón durante la
hipoglucemia, aunque la misma infusión de insulina reduce las concentraciones de glucagón a
concentraciones de glucosa simultáneamente normales. Por tanto, la insulina generalmente no tiene un
efecto inhibidor sobre las concentraciones de glucagón. Si simultáneamente la glucosa es baja y la insulina
alta, el glucagón se regula positivamente para aumentar la disponibilidad de glucosa. Por lo tanto, la insulina
y la glucosa son factores reguladores conjuntos de las concentraciones de glucagón en las vacas lecheras, y
el estado de la glucosa plasmática es el factor clave para decidir si sus concentraciones aumentan o
disminuyen. Este efecto regulador puede ser importante para el mantenimiento de la homeostasis de la
glucosa si la secreción de insulina está regulada positivamente por otros factores además de la glucosa alta,
como concentraciones altas de lípidos y proteínas en plasma con glucosa simultáneamente baja.

- 2015 Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.

1. Introducción

La glucosa es un sustrato esencial para la síntesis de lactosa

mamaria y sus requerimientos aumentan significativamente después del
* Autor correspondiente. Tel.:þ41 264077296; fax:þ41 264077297. Dirección de parto en vacas lecheras.[1]. Al comienzo de la lactancia, la mayor parte
correo electrónico:rupert.bruckmaier@vetsuisse.unibe.ch (RM Bruckmaier). de la glucosa disponible se utiliza para la síntesis de lactosa en el

0739-7240/$ – ver portada - 2015 Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.
http://dx.doi.org/10.1016/j.domaniend.2014.11.004
 M. Zarrin et al. / Endocrinología de animales domésticos 51 (2015) 74–77
glándula mamaria[2]. Debido a que la glucosa plasmática puede ser un
factor limitante para la síntesis de leche, el nivel de producción de leche
depende de las concentraciones de glucosa plasmática.[3]. En los
rumiantes, la mayor parte de la glucosa disponible se deriva de la
gluconeogénesis hepática.[3]. La regulación de la homeostasis de la
glucosa está mediada tanto por la insulina como por el glucagón.[4].
Durante la hiperglucemia, la secreción de insulina aumenta para
mantener las concentraciones plasmáticas de glucosa a un nivel
fisiológico. La insulina regula la homeostasis de la glucosa plasmática
facilitando el transporte de glucosa a los músculos esqueléticos y al
tejido adiposo y aumenta la síntesis de glucógeno hepático mientras que
simultáneamente se inhibe la gluconeogénesis. [5,6]. La regulación del
glucagón de la homeostasis de la glucosa está mediada por un aumento
de la gluconeogénesis, la glucogenólisis y una disminución de la
glucogénesis.[7]. La investigación en humanos indicó que la insulina es
generalmente aceptada como un supresor de la secreción de glucagón
que induce una disminución de la secreción de glucagón mediante la
inhibición de la transcripción del gen del glucagón, la activación del
ácido gamma amino butírico (GABA) y el GABA.Areceptor y modulación
de la actividad del canal K-ATP[8]. Hasta donde sabemos, los efectos de
la insulina en interacción con las concentraciones de glucosa sobre las
concentraciones de glucagón no se han demostrado en vacas lecheras.
Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue investigar los efectos de
las pinzas hipoglucémicas hiperinsulinémicas e hiperinsulinémicas
euglicémicas que duraron 48 h sobre las concentraciones de glucagón
en vacas lecheras en lactancia media.
2. Material y métodos
Los detalles de los animales y los tratamientos de este estudio se
describieron en otra parte.[9]. En resumen, el estudio se llevó a cabo en
19 vacas lecheras Holstein no preñadas con una paridad de 3,0 a 0,1 y
28,0 a 0,2 (media - DE) semanas después del parto. Se seleccionaron
vacas en lactancia tardía para permitir la investigación de los efectos
directos de la infusión del tratamiento sin interferencia con un balance
energético negativo y los cambios endocrinos y metabólicos
característicos durante el período de transición. A partir de 2 semanas
antes y durante todo el experimento, los animales fueron alimentados
con heno ad libitum y con un concentrado rico en proteínas y energía
dos veces al día de acuerdo con la producción de leche individual. Las
vacas fueron asignadas aleatoriamente a 3 grupos de tratamiento: una
infusión intravenosa de insulina ajustada para inducir hipoglucemia a
concentraciones de glucosa en plasma de 2,5 mmol/L (HypoG, n¼5), una
pinza hiperinsulinémica-euglucémica para mantener las concentraciones
de glucosa plasmática en las concentraciones previas a la infusión para
estudiar los efectos de la insulina a concentraciones de glucosa
normales simultáneamente (EuG, n¼6), y una infusión de solución salina
al 0,9% (NaCl, n¼8) como control con concentraciones normales de
insulina y glucosa. Las infusiones y/o pinzas comenzaron a las 9 a. m. y
continuaron hasta las 9 a. m. dos días después a través de uno de los
catéteres intravenosos permanentes (Cavafix Certo Splittocan, B. Braun
Melsungen AG, Alemania), mientras que el segundo catéter se usó para
la toma de muestras de sangre.
Se indujo hipoglucemia hiperinsulinémica mediante
infusión de insulina bovina (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO,
#I4011, EE.UU.). Las velocidades de infusión de insulina se ajustaron de
acuerdo con las concentraciones de glucosa en plasma, que se midieron
cada 5 minutos durante las primeras 2 horas y cada hora durante el ciclo
posterior de la infusión. Pinza hiperinsulinémica-euglucémica
75
se realizó mediante infusión de insulina a una velocidad de infusión
constante de 0,6 mU/kg BW/min (de acuerdo con la velocidad de
infusión promedio en HypoG) y una infusión adicional de glucosa
continuamente regulada (Dr. G. Bichsel AG, Interlaken, Suiza) para
mantener la glucosa plasmática. a las concentraciones previas a la
infusión. A las vacas de control (NaCl) se les infundió
continuamente una solución salina al 0,9% a una velocidad de
infusión de 20 ml/h administrada a través de una bomba
automática (Perfuser, B. Braun Melsungen AG).
Las muestras de referencia se tomaron 1 semana e inmediatamente
antes del inicio de las infusiones. Las concentraciones de glucosa en
plasma se midieron enzimáticamente por duplicado con un analizador
automatizado (Cobas Mira 2, Hoffmann-La Roche, Basilea, Suiza)
mediante un kit comercial (BioMerieux no. 61270, Marcy l'Etoile, Francia,
coeficiente de variación intra e interensayo ( CV) ambos <4%). La insulina
plasmática se midió por duplicado mediante radioinmunoensayo como
se describió anteriormente.
[10]con CV intra e interensayo 8,2 % y 15,5 %, respectivamente,
y las concentraciones plasmáticas de glucagón se midieron por
duplicado utilizando un kit de radioinmunoensayo comercial
(n.º de cat. GL-32K, MILLIPORE, Zug, Suiza, CV intra e
interensayo 4,0 % y 12,5%, respectivamente).
El área bajo la curva (AUC) de las variables medidas durante
el día 2 del experimento se calculó mediante la regla
trapezoidal (combinación de compartimentos de área
rectangular y triangular). El AUC se calculó para todo el
período de tiempo y luego se dividió por el número de horas
para lograr valores similares a una única concentración de
medición (AUC/h). Los datos se evaluaron utilizando un
procedimiento de modelos lineales generales de SAS (SAS
Institute Inc, Cary, NC, EE. UU., 2002–2008, versión 9.2),
incluidos los tratamientos (HypoG, EuG y NaCl) como efectos
fijos. Los datos obtenidos de las muestras de referencia se
incluyeron como covariables en el modelo para compensar las
diferencias iniciales entre los individuos. Las diferencias entre
medias se determinaron mediante la prueba de Tukey. Los
datos se presentan como medias: error estándar de la media y
las diferencias se consideraron significativas siPAG <0,05.
3. Resultados
Durante las infusiones (48 h), la velocidad media de infusión de
insulina después del aumento de las concentraciones de insulina
mediante la administración de un bolo de 4 mU/kg BW de solución de
insulina fue de 0,6 mU/kg BW/min en HypoG y EuG. En EuG, la velocidad
de infusión de glucosa para mantener las concentraciones de glucosa en
plasma al nivel previo a la infusión fue de 2,20 a 0,04 mmol/kg/min
(media-error estándar de la media). La infusión de insulina provocó un
aumento del AUC/h de insulina plasmática (tabla 1;PAG <0,01) con una
disminución simultánea del AUC/h de glucosa plasmática (PAG <0,01), en
HypoG en comparación con la insulina plasmática y el AUC de glucosa en
NaCl. En HypoG, el AUC/h de glucagón plasmático aumentó
notablemente durante las infusiones de insulina en comparación con los
niveles previos a la infusión y con NaCl (Figura 1;tabla 1;PAG <0,01). En
EuG, la administración intravenosa de insulina combinada con la
infusión de glucosa provocó un aumento del AUC/h de insulina
plasmática (PAG < 0,01) con concentraciones de glucosa en plasma
simultáneamente sin cambios. A diferencia de HypoG, la infusión
simultánea de insulina y glucosa en EuG provocó una disminución de las
concentraciones plasmáticas de glucagón en comparación con el nivel
previo a la infusión y en comparación con HypoG y NaCl (PAG <0,01).
76 M. Zarrin et al. / Endocrinología de animales domésticos 51 (2015) 74–77
tabla 1
AUC/h variable plasmática en vacas lecheras hipoglucémicas hiperinsulinémicas (HypoG), euglucémicas hiperinsulinémicas (EuG) y con infusión de NaCl.
Variable AUC/h media LS - SEM día 2, grupo
hipog
Glucosa, mmol/L 2,3 - 0,1b
Insulina, mU/L 41,9 - 8,1b
Glucagón, pg/mL 129,0 - 7,0C
Abreviaturas: ANOVA, análisis de varianza; AUC, área bajo la curva; EuG: grupo hiperinsulinémico-euglucémico; HypoG, grupo hiperinsulinémico-hipoglucémico; NaCl,
grupo de vacas que recibieron solución salina fisiológica; SEM, error estándar de la media.
Los datos se presentan como medias de mínimos cuadrados - SEM del área bajo la curva (AUC/h) en el día 2. a,b,c Los
grupos de tratamiento sin letras comunes son significativamente diferentes (PAG <0,05).
Figura 1.Concentraciones plasmáticas medias de glucagón en vacas infundidas con NaCl,
vacas hipoglucémicas hiperinsulinémicas (HypoG) y vacas euglucémicas hiperinsulinémicas
(EuG) durante una infusión de 48 h. Los valores representan la media - SEM. A, B, C: los grupos
de tratamiento sin letras comunes son significativamente diferentes para el AUC de glucagón
plasmático en el día 2 del experimento (PAG <0,05). AUC, área bajo la curva; SEM, error
estándar de la media.
4. Discusión
Hasta donde sabemos, este es el primer estudio que investiga
los efectos de la hiperinsulinemia a largo plazo (48 h) a diferentes
niveles de concentraciones de glucosa plasmática sobre la
secreción de glucagón en vacas lecheras.
La hipoglucemia hiperinsulinémica inducida a largo plazo (48 h) y la
euglucemia hiperinsulinémica tuvieron éxito en vacas lecheras.[9]. La
infusión de insulina aumentó las concentraciones plasmáticas de
insulina en ambos grupos de tratamiento[9]como se informó en
estudios anteriores[11,12]. Los resultados del grupo EuG en el presente
estudio se confirman con evidencia anterior de supresión de la secreción
de glucagón por perfusión de los islotes.[13-15], lo que indica que el
glucagón es suprimible en respuesta a concentraciones elevadas de
insulina con normoglucemia simultánea. La insulina y el glucagón son
cruciales para la regulación de la homeostasis de la glucosa por su
función recíproca y si hay concentraciones de glucosa normales o
elevadas, un aumento de la secreción de insulina suprime la secreción
de glucagón.
[dieciséis]. Entre los sustratos conocidos que suprimen la
secreción de glucagón, como la insulina[dieciséis], polipéptido
amiloide, Zn2þ,ATP y GABA[8], la insulina es la más eficaz
según estudios previos[17,18].
La secreción de insulina también puede ser desencadenada por altas
concentraciones plasmáticas de lípidos o proteínas.[19-21]. Además de una
disminución de estos componentes sanguíneos, esto también induciría una
disminución de las concentraciones de glucosa en sangre, y es el papel de
ANOVA
(PAG-valor, grupo)
EU G NaCl
3,8 - 0,2a 4,1 - 0,1a <0,01
57,8 - 7,8b 13,9 - 1,1a <0,01
84,0 - 6,3a 106,1 - 5,4b <0,01
glucagón para mantener la homeostasis de la glucosa. Esta
situación fue simulada en nuestro tratamiento con HypoG, y la
secreción de glucagón aumentó como consecuencia de la
hiperinsulinemia con hipoglucemia simultánea.
Se puede especular que la disponibilidad de energía y glucosa son los
principales factores atribuidos a la homeostasis glucorreguladora endocrina.
Por otro lado, una mayor disponibilidad de energía tiene efectos ahorradores
de glucosa e influye en la homeostasis de la glucosa regulada por la
disminución de la gluconeogénesis y la glucogenólisis a través de la
disminución de las concentraciones de glucagón.[22]. Los resultados del
presente estudio respaldan la importancia de las concentraciones de glucosa
como un factor clave para las funciones de las hormonas glucorreguladoras
endocrinas, en particular el glucagón, que puede proteger al organismo de
hipoglucemias graves inducidas por altas concentraciones de insulina como
consecuencia de la alta producción de ácidos grasos volátiles en el organismo.
rumen de vacas lecheras[19-21]. En conclusión, nuestros hallazgos
demuestran claramente que la insulina actúa de manera diferente sobre la
secreción de glucagón, dependiendo de las concentraciones concomitantes de
glucosa, es decir, el estado de la glucosa determina la forma de interacción
entre la insulina y el glucagón. Por lo tanto, la insulina y la glucosa son factores
reguladores conjuntos de las concentraciones de glucagón en las vacas
lecheras, lo que permitirá obtener nuevos conocimientos importantes sobre
los mecanismos reguladores endocrinos y metabólicos que subyacen a la
función de las vacas lecheras.
Expresiones de gratitud
Este estudio fue apoyado por una subvención de la
Fundación Nacional Suiza para la Ciencia, Suiza. Los autores
agradecen a Yolande Zbinden, Claudine Morel y Chantal
Philipona (Fisiología Veterinaria, Facultad Vetsuisse de la
Universidad de Berna, Suiza) por su excelente asistencia
técnica de laboratorio.
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