UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INFORME DE PRÁCTICA N° 08

SEMANA 9

BIOQUÍMICA Y NUTRIC. HUMANA

Alumno:

Flores Jimenez, Josué Israel

ID: 000251890

Grupo: 02

NRC: 7929

Asignatura: Bioquímica y nutrición

humana practica

Docente de Práctica: Cabos Sanchez, Jeisson

David

Piura – Perú
2022

Presentación del Trabajo: 13/06/2022

GUÍA DE PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN HUMANA 3

SEMANA N° 9
LABORATORIO N° 8
DEMOSTRACIÓN EXPERIMENTAL DEL METABOLISMO DEL
GLUCÓGENO EN EL HÍGADO

1. INTRODUCCIÓN
La glucosa se almacena en el hígado como glucógeno en el período
postprandial bajo la acción de la insulina que incrementa su síntesis
(glucogénesis) por activación de la glucógeno sintasa. En el ayuno
el glucagón aumenta la degradación del glucógeno (glucogenolisis)
vía AMP cíclico activando la fosforilasa cinasa y fosforilasa, y la
glucosa es liberada a la sangre gracias a la glucosa 6 fosfatasa
a fin de que los tejidos que necesitan glucosa como el cerebro y
hematíes puedan utilizarla. El hígado acumula glucógeno hasta 5%
de su peso haciendo un total promedio de 90 gramos. El
objetivo de esta práctica es demostrar la presencia de glucógeno
en el hígado y su variación con el tiempo.

2. MATERIAL Y REACTIVOS
● Lugol 1 :30
● Solución Krebs
● Ácido tricloroacético TCA 5 %
● Reactivo de Fehling
● Cobayo
● Pinza
● Centrífuga
● Baño maría

3. PROCEDIMIENTO
1. Sacrificar un cobayo. Extraer el hígado y colocarlo en trozos de
1 cm aproximadamente en un Petri con suero fisiológico a O°C
2. Marcar tres tubos de ensayo con 0 min, 30 min y 60 min, colocar
en cada uno de ellos 3 ml de solución de Krebs y colocar 3 a 4
cortes de hígado en cada tubo
3. Extraer de inmediato los cortes de hígado del tubo 0 minutos y
colocarlo en un mortero con 4 ml de ácido tricloroacético. Molerlos
bien y centrifugar por 5 minutos a 3500 rpm. El sobrenadante
pasarlo a un tubo marcado como SN- 0. Conservar el líquido de
incubación en un tubo marcado con LI-0 para determinar la
glucosa en él.
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4. A los 30 y 60 minutos de incubación, repetir el procedimiento con

los cortes de hígado a los tubos 30 min. y 60 min. Respectivamente.
Marcar los tubos como SN-30 y SN-60
5. Para determinar el glucógeno armar el siguiente sistema:

Agitar los tubos. Observar la coloración de los tubos y

anotar laturbidez
como mayor presencia de glucógeno.
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6. Para determinar la glucosa rotular armar el siguiente sistema:

Empleando pinzas colocar por 3 minutos al mechero o en

bañode agua de agua hirviente.

Observar el cambio de color y la precipitación de

precipitado decolor rojo en cada tubo.
GUÍA DE PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN HUMANA 51

Opcionalmente, puede determinarse glucosa por método de

glucosa oxidasa usando el líquido de incubación 0, 30 y 60
min

Resultado Tubo 1 (0) Tubo 2 (30) Tubo 3 (60)

Cantidad glucosa 202.6 mg/dl 265.7 mg/dl 277.3 mg/dl

RESULTADOS
Observar los cambios de color en ambas determinaciones y
cuantificarla en cruces +, ++ y +++

Resultado Tubo 1 (0) Tubo 2 (30) Tubo 3 (60)

Cambio de color + ++ +++
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4. INTERPRETACIÓN
De acuerdo al cambio de color

5. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la estructura del glucógeno y cuál es su función?
El glucógeno es un polisacárido, el cual se encuentra compuesto
por cadenas ramificadas de glucosa (la cual es una hexosa). Esta
puede llegar a constituir el 10% de masa del hígado y 1% de
masa muscular del cuerpo. Aporta junto con el almidón la mayor
parte de carbohidratos requeridos en la dieta.

Estructura:

El glucógeno está estructurado por cadenas de 12-14 residuos

de glucosa los cuales tienen forma de alfa-D-glucosa; estos
residuos se unen mediante enlaces de alfa (1→4) de forma lineal,
y alfa (1→6) las ramificaciones.

Función:

-Glucógeno muscular: este sirve como reserva energética

(mediante la reserva de glucosa) para los músculos en estado de
ayuno para poder ejercer sus funciones.
-Glucógeno hepático: el glucógeno hepático sirve como reserva
energética pero no solo para este mismo órgano, sino para el
resto del cuerpo también. Esto es debido a que los hepatocitos
presentan glucosa 6-fosfatasa, la cual es una enzima capaz de
convertir la glucosa 6-fosfato en glucosa libre; dicha enzima no
está presente en los miocitos. A diferencia de la glucosa
fosforilada, la glucosa libre puede pasar a través de la membrana
de los hepatocitos mediante difusión. De este modo, si el estado
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de ayuno se vuelve prolongado, el hígado puede seguir

aportando glucosa a la circulación y mantener los niveles de
glucosa estable.

2. ¿Qué cambios sufre el metabolismo del glucógeno en el

ayuno y estado postprandial? Haga un esquema

Durante el estado postprandial, es decir, inmediatamente después

de comer la glucosa es utilizada por las células para producir
energía, pero el exceso de glucosa se almacena por un proceso
llamado glucogénesis, dicho proceso consiste en la formación de
glucógeno, polisacárido de glucosas. Durante este la glucosa ya
convertida en glucosa 1-fosfato reacciona mediante una UDPG
pirofosforilasa para convertirse en uridina difosfato de glucosa, y
esta mediante la glucógeno sintasa se forman enlaces alfa (1→4)
en base a un primer glucogenina, y luego mediante una enzima de
ramificación se forman los enlaces alfa (1→6), de tal manera que
se obtiene glucógeno.
Por otro lado, en el lado derecho del esquema se observa lo que
sería el proceso de glucogenólisis, el cual se realiza en el caso de
un estado de ayuno. Debido a durante este la glucosa disminuye,
entonces para compensar los niveles de glicemia y de esa forma
también obtener energía se lleva a cabo una degradación del
glucógeno. Durante esta, primeramente, actúa una enzima
glucógeno fosforilasa la cual rompe los enlaces alfa (1→4), luego
una glucógeno transferasa, la cual transfiere los enlaces que no
llega a cortar la glucógeno fosforilasa desde la cadena ramificada
a la cadena primer. Después actúa una enzima desramificante, la
cual rompe el enlace alfa (1→6) y finalmente vuelve a actuar la
glucógeno fosforilasa para romper la cadena línea restante.
54 GUÍA DE PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN HUMANA

En este esquema se muestra en el lado izquierdo el proceso de

glucogénesis y en el derecho el de glucogenólisis.
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3. ¿Cómo se regula la glucogénesis? Haga un esquema

La glucogénesis es regulada positivamente por acción de la

insulina; en primer lugar porque es esta hormona la que permite
el ingreso de glucosa a los miocitos activando los canales glut 4,
y en segundo lugar porque esta hormona activa una enzima
fosfodiesterasa, la cual degrada el AMPc a su forma inactiva AMP
5’. De este modo tanto las activaciones como las inactivaciones
producidas por el AMPc no se llevarán a cabo. Una de ellas es
que permanecerá activa la glucógeno sintasa, enzima que inicia
la glucogénesis, de forma que forma los enlaces alfa (1→4).

4. ¿Cómo se regula la glucogenólisis? Haga un esquema

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En la glucogenólisis actúan como moduladores positivos las

hormonas glucagón y adrenalina. Dichas hormonas interactúan
con un receptor acoplado a proteína G, lo que produce como
respuesta la activación de la enzima adenilato ciclasa, esta
convierte el ATP en AMPc, posteriormente la proteína quinasa b
se convierte en proteína quinasa a, activándose por medio del
AMPc. Luego la proteína quinasa a, por un lado, activa la
fosforilasa cinasa b convirtiéndola en fosforilasa cinasa a; y por
otro lado inactiva la glucógeno sintasa a volviéndola glucógeno
sintasa b, este último proceso modula negativamente la
glucogénesis. Posteriormente, la fosforilasa cinasa a, activa la
glucógeno fosforilasa b convirtiéndola en glucógeno fosforilasa a;
de este modo regula positivamente la glucogenólisis ya que esta
enzima glucógeno fosforilasa a, es la que inicia la glucogenólisis
rompiendo los enlaces alfa (1→4).

5. ¿Cuáles son las semejanzas y diferencias del metabolismo

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del glucógeno hepático y muscular?

Semejanzas:

-Como semejanzas tanto el glucógeno muscular como el

hepático aportan energía, es decir glucosa, en estado de ayuno.
-Ambos están formados por alfa-D-glucosa.
-Ambos están regulados por la insulina y adrenalina.

Diferencias:

-La velocidad con la que se consume el glucógeno muscular

depende de la intensidad de la actividad física, así como su
duración y frecuencia.
-Aproximadamente aporta el 10% del peso del hígado el
glucógeno hepático y un 1-2 % del peso corporal el glucógeno
muscular.
-La energía aportada por el glucógeno muscular es
específicamente para los músculos debido a que carece de la
glucosa-6 fosfatasa, por lo que no tiene la capacidad de producir
glucosa libre. Por otro lado, en los hepatocitos sí hay presencia
de glucosa-6 fosfatasa, por lo que el hígado suministra energía
para cualquier órgano durante el ayuno.

6. Haga un cuadro con las principales glucogenosis.

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6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
(1) de C. eolisacárido de reserva energética de los animales
[Internet]. Wikipedia.org. Wikimedia Foundation, Inc.; 2003
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[citado 13 de junio de 2022]. Disponible en:

https://es.wikipedia.org/wiki/Gluc%C3%B3geno
(2) RodwelL V, Bender D, Botham K, Kennelly P, Weil P.Harper.
Bioquímica Ilustrada
(3) Baynes, J. W., & Dominiczak, M. H. (2011). Bioquímica médica
(3a. ed. --.). Barcelona, España: Elsevier España. S.L.

DISCUSIONES:

• En el tubo 0 minutos, se observó como resultado una mayor

cantidad de glucógeno que de glucosa. Esto es debido a que el
hígado se pudo haber dejado un poco más de los 0 minutos por
error experimental, lo cual permitió que la enzima actuará
degradando al glucógeno en mínima proporción, por lo que en el
espectrofotómetro se expresa la cantidad de glucosa de 202.3
mg/dl. Esto se debería ver expresado con una mayor turbidez
debido a mayor glucógeno, sin embargo comprobando con Fehling
resultó ser el de menor color rojo ladrillo y en el espectrofotómetro,
como ya se observó tuvo la menor cantidad de glucosa; entonces,
a pesar de haber baja turbidez, se comprueba la mayor presencia
de glucógeno que en el tubo 30 min y 60 min; y una menor cantidad
de glucosa respectivamente.

• En el tubo 30 minutos, el glucógeno presente en el hígado de

cobayo se degradó en mayor cantidad, debido a que este se dejó
mayor cantidad de tiempo en la solución con la enzima. De este
modo se obtuvo una cantidad de 265.7 mg/dl y una menor cantidad
de glucógeno. Esto sí es expresado de forma intermedia entre los
dos otros tubos, por lo que la turbidez de glucógeno es ni tan clara
ni tan oscura, y por otro lado, en Fehling se comprobó con un color
medio de rojo ladrillo la cantidad intermedia de glucosa, resultando
asimismo con el espectrofotómetro una menor cantidad de glucosa
que el tubo de 60 minutos y mayor glucosa que el de 0 minutos.

• En el tubo 60 minutos el hígado del cobayo permaneció una mayor

cantidad de tiempo, lo cual permitió que hubiera una mayor
cantidad de glucogenólisis y por ende producción de glucosa, esto
se expresa en la cantidad de glucosa 277.3. Dicha expresión
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también debería darse con una menor turbidez en el tubo 60

minutos, sin embargo, no es erróneo el hecho de que hay menor
glucógeno y más glucosa ya que eso se comprobó con un Fehling
con mayor coloración rojo ladrillo, lo que indica la gran cantidad de
presencia de esta hexosa azúcar reductor, asimismo se
comprueba con el espectrofotómetro.

CONCLUSIONES:

• Mientras mayor cantidad de tiempo permanezca en reacción el

glucógeno en un medio que produzca su degradación, este se
degradará más y producirá mayor cantidad de glucosa. En este
caso se podría comparar con un estado de ayuno, en el cual, si se
mantiene una mayor cantidad de tiempo sin ingesta de alimentos,
entonces se producirá en mayor cantidad la glucogenólisis a fin de
compensar los niveles de glucemia.

• Por otro lado, si el glucógeno permanece una menor cantidad de

tiempo en el medio que provoque su degradación, entonces la
conversión de glucógeno a glucosa será menor. Lo cual quiere
decir que en un menor tiempo de estado de ayuno, la
glucogenólisis serpa menor, y por lo tanto las reservas de glucosa
mediante glucógeno muscular y hepático permanecerá casi
constante.